Page 31 - 《中国药房》2024年22期
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伸筋草为石松科植物石松 Lycopodium japonicum                         表1 16批伸筋草样品产地信息
          Thunb.的干燥全草，具有祛风除湿、舒筋活络之功效，临                        编号     产地        批号      编号      产地       批号
                                                              S1    浙江磐安县      220803  S9    湖南桑植县     230902
                                       [1]
          床用于治疗关节酸痛、屈伸不利等 。现代研究发现，伸
                                                              S2    浙江天台县      230705  S10   湖南华容县     230701
          筋草主要含有生物碱类、三萜类、甾体类、黄酮类和苯丙                           S3    浙江仙居县      220901  S11   湖南龙山县     230801
                        [2]
          素类等化学成分 ，可显著抑制破骨细胞活性，具有良好                           S4    江苏东海县      220802  S12   云南砚山县     230902
                                                              S5    江苏丹阳市      230701  S13   云南宾川县     220701
          的抗炎和镇痛作用        [3―5] 。伸筋草收录于 2020 年版《中国
                                                              S6    江苏句容市      230906  S14   云南绥江县     230803
                                                [1]
          药典》（一部），但质量控制未涉及含量检测项 。其原产                          S7    湖北竹山县      230801  S15   贵州龙里县     230902
          于热带山区，现主要分布于东北、华东、中南和西南地                            S8    湖北鹤峰县      230701  S16   贵州贵定县     231001
          区，主产于贵州、浙江、湖北、江苏、云南等省，为贵州省                         2 方法与结果
          道地药材之一，龙里、贵定等地为其主产区。由于中药                           2.1 QAMS法测定多成分含量
          所含化学成分易受种属、产地气候土壤、采收时间及炮                           2.1.1 混合对照品溶液制备
          制方法的影响，为确保其临床治疗效果，本研究收集贵                               取各对照品适量，精密称定，用50%甲醇溶解，分别
          州、云南、湖北、湖南、浙江、江苏等6省不同产地的16批                        制成每 1 mL 含 α-玉柏碱 0.310 mg、β-玉柏碱 0.166 mg、
          伸 筋 草 药 材 ，采 用 一 测 多 评（quantitative  analysis  of   石松碱 0.018 mg、石松灵碱 0.024 mg、伸筋草萜宁醇
          multi-components by single-marker，QAMS）法同时测定       0.096 mg、21-表千层塔烯二醇 0.130 mg、豆甾醇 0.052
          伸筋草中 α-玉柏碱、β-玉柏碱、石松碱、石松灵碱、伸筋                       mg 和 β-谷甾醇 0.148 mg 的单一贮备液；精密吸取上述
          草萜宁醇、21-表千层塔烯二醇、豆甾醇和 β-谷甾醇共 8                      单一贮备液各 1 mL，置于同一 10 mL 容量瓶中，加 50%
                                                [6]
          个有效成分的含量，并采用化学计量学方法 和加权逼                           甲醇定容，摇匀，即得上述成分质量浓度分别为 31.00、
          近理想排序（technique for order preference by similarity   16.60、1.80、2.40、9.60、13.00、5.20和14.80 µg/mL的混合
                                  [7]
          to ideal solution，TOPSIS）法 对伸筋草的质量进行评              对照品溶液。
          价，旨在为伸筋草道地研究提供数据支撑，也为伸筋草                           2.1.2 供试品溶液制备
          质量差异性控制提供科学的试验依据。                                      取伸筋草样品粉末约 0.6 g，精密称定，置于具塞锥
          1 材料
                                                             形瓶中，精密加 50% 甲醇 25 mL，密塞，称定质量；加热
          1.1 主要仪器
                                                             回流提取60 min，放冷，再次称定质量，用50%甲醇补足
              本研究所用主要仪器包括Waters e2695型高效液相
                                                             减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。
          色谱仪（美国Waters公司）、Primaide 1430型高效液相色
                                                             2.1.3 色谱条件
          谱仪（日本Hitachi公司）、EL2401型电子分析天平（瑞士
                                                                 以 Nucleosil C18为色谱柱；以 0.05% 磷酸（A）-乙腈
          Mettler Toledo公司）等。
                                                            （B）为流动相进行梯度洗脱（0～12 min，20.0%B；12～
          1.2 主要药品与试剂
                                                             31 min，20.0%B→56.0%B；31～53 min，56.0%B→85.0%B；
              β-谷甾醇对照品（批号PRF8031544，纯度96.2%）和
                                                             53～60 min，85.0%B→20.0%B），运行时间为 60 min；检
          豆甾醇对照品（批号PRF8071843，纯度98.8%）均购自成
                                                             测波长为 256 nm（0～31 min 检测 α-玉柏碱、β-玉柏碱、
          都普瑞法科技开发有限公司；石松灵碱对照品（批号
                                                             石松碱和石松灵碱）、210 nm（31～60 min检测伸筋草萜
          CFS202201，纯度 98.2%）、伸筋草萜宁醇对照品（批号
                                                             宁醇、21-表千层塔烯二醇、豆甾醇和β-谷甾醇）；柱温为
          CFS202001，纯度 98.0%）和 21-表千层塔烯二醇对照品
                                                             30 ℃；流速为1.0 mL/min；进样量为10 µL。取混合对照
         （批号 CFS202301，纯度 98.5%）均购自武汉天植生物技
                                                             品溶液和供试品溶液（编号 S1）进样测定，记录色谱图
          术有限公司；α-玉柏碱对照品（批号 HY134036-146505，
          纯度 99.6%）、β-玉柏碱对照品（批号 HY-N11498-23126，            （图 1），结果显示，α-玉柏碱、β-玉柏碱、石松碱、石松灵
          纯度 98.2%）和石松碱对照品（批号 HY-114372-22154，               碱、伸筋草萜宁醇、21-表千层塔烯二醇、豆甾醇和β-谷甾
          纯度98.7%）均购自上海皓元生物医药科技有限公司；乙                        醇色谱峰均能达到基线分离，供试品溶液中8个成分色
          腈（色谱纯）和磷酸（色谱纯）均购自美国 Roe Scientific                 谱峰与对照品出峰位置基本一致。
          公司。                                                2.1.4 线性关系考察
              16 批伸筋草药材（编号 S1～S16）均经首都医科大                        按“2.1.1”项下方法，分别准确量取各单一贮备液适
          学附属北京积水潭医院中药房许保海主任药师按 2020                         量，采用逐级稀释法，用 50% 甲醇制得 6 个浓度梯度的
          年版《中国药典》标准，鉴定为石松科植物石松L. japoni‐                    混合对照品溶液；再按“2.1.3”项下色谱条件进样测定，
          cum Thunb.的干燥全草，产地信息见表1。                           记录 α-玉柏碱、β-玉柏碱、石松碱、石松灵碱、伸筋草萜


          中国药房  2024年第35卷第22期                                              China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 22    · 2733 ·
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