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2.4 大鼠子宫组织病理学形态变化观察                                表1 各组大鼠血清中炎症因子水平比较（x±s，n＝14，
              取“2.2”项下于4%多聚甲醛中固定的子宫组织，经                           pg/mL）
          水洗、脱水、透明、浸蜡、包埋后切成厚度为 4 μm 的薄                        组别               IL-1β      IL-6       TNF-α
          片；切片在室温下用苏木精染色5 min，以磷酸盐缓冲液                         对照组           104.15±13.28  19.55±3.26  37.24±6.05
                                                              模型组           267.53±35.61 a  70.14±11.25 a  129.16±21.72 a
          洗涤，盐酸乙醇分化 3 s，然后用伊红染色 1 min，并用中
                                                              大黄素组          143.57±20.16 b  31.27±5.49 b  48.51±8.66 b
          性树胶封片。采用光学显微镜观察大鼠子宫组织的病                             IKK激活组        371.09±45.07 b  94.25±15.82 b  198.54±30.28 b
          理学形态变化。                                             大黄素+IKK激活组    254.71±33.28 cd  61.02±8.13 cd  117.28±20.04 cd
          2.5  大 鼠 子 宫 组 织 中 NLRP3、cleaved-caspase-1 及          a：与对照组相比，P＜0.05；b：与模型组相比，P＜0.05；c：与大黄素
                                                             组相比，P＜0.05；d：与IKK激活组相比，P＜0.05。
          IKK/IκB/NF-κB信号通路蛋白表达检测
              将“2.2”项下保存在－70℃的子宫组织在含有蛋白                      3.3 大黄素对模型大鼠血清中氧化应激指标的影响
          酶抑制剂的裂解液中裂解，匀浆后采用 BCA 法测定蛋                             与对照组相比，模型组大鼠血清中 SOD、CAT 水平
          白浓度。将蛋白样品变性处理后，进行十二烷基硫酸                            均显著降低，MDA 水平显著升高（P＜0.05）；与模型组
          钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、转膜。在室温下用5%脱脂牛                          相比，大黄素组大鼠血清中SOD、CAT水平均显著升高，
          奶封闭膜 2 h 后，加入 NLRP3（稀释度为 1∶2 000）、                 MDA 水平显著降低（P＜0.05），而 IKK 激活组大鼠血清
          cleaved-caspase-1（稀释度为 1∶2 000）、IKK（稀释度为           中SOD、CAT水平均显著降低，MDA水平显著升高（P＜
          1∶1 000）、IκB（稀释度为 1∶1 000）、NF-κB p65（稀释度           0.05）；与大黄素组相比，大黄素+IKK激活组大鼠血清中
          为 1∶1 700）、GAPDH（稀释度为 1∶2 100）抗体在 4 °C 下           SOD、CAT 水平均显著降低，MDA 水平显著升高（P＜
          孵育过夜；次日加入相应二抗（稀释度为1∶4 400），孵育                      0.05）；与IKK激活组相比，大黄素+IKK激活组大鼠血清
          后，加入显色剂进行显色，采用蛋白凝胶成像仪进行显                           中SOD、CAT水平均显著升高，MDA水平显著降低（P＜
          影，以Image J软件分析蛋白条带灰度值，以目的蛋白与                       0.05）。结果见表2。
          内参GAPDH的灰度值比值表示蛋白表达水平。                             表2 各组大鼠血清中氧化应激指标水平比较（x±s，
          2.6 统计学方法                                               n＝14）
              采用 SPSS 26.0 软件进行统计学分析，数据以 x±s                  组别              SOD/（U/mL）  CAT/（U/mL）  MDA/（nmol/mL）
          表示，多组间比较采用单因素方差分析，进一步组间两                            对照组             271.46±30.88  7.39±1.08  6.02±1.15
                                                              模型组             146.29±18.07 a  3.26±0.55 a  35.16±5.87 a
          两比较采用SNK-q检验。检验水准α＝0.05。
                                                              大黄素组            245.08±26.55 b  6.25±0.94 b  10.25±1.73 b
          3 结果                                                IKK激活组          91.43±11.02 b  2.03±0.27 b  54.97±8.01 b
          3.1 大黄素对模型大鼠子宫肌条肌张力的影响                              大黄素+IKK激活组      158.25±17.18 cd  3.94±0.68 cd  31.22±4.69 cd
              对照组、模型组、大黄素组、IKK 激活组、大黄素+                         a：与对照组相比，P＜0.05；b：与模型组相比，P＜0.05；c：与大黄素
                                                             组相比，P＜0.05；d：与IKK激活组相比，P＜0.05。
          IKK 激活组大鼠子宫肌条肌张力依次为（1.58±0.14）、
                                                             3.4 大黄素对模型大鼠子宫组织病理变化的影响
         （2.73±0.36）、（1.98±0.17）、（4.15±0.44）、（2.36±0.28）
          N。与对照组相比，模型组大鼠的子宫肌条肌张力显著                               对照组大鼠子宫平滑肌结构正常、排列整齐；模型
          升高（P＜0.05）；与模型组相比，大黄素组大鼠子宫肌条                       组大鼠子宫平滑肌出现了大量炎症细胞浸润，细胞分布
          肌张力显著降低（P＜0.05），IKK激活组大鼠子宫肌条肌                      不规则；与模型组相比，大黄素组大鼠子宫平滑肌炎症
          张力显著升高（P＜0.05）；与大黄素组相比，大黄素+IKK                     细胞浸润现象减轻，而IKK激活组大鼠子宫平滑肌层炎
          激活组大鼠子宫肌条肌张力显著升高（P＜0.05）；与IKK                      症细胞浸润现象加重；大黄素+IKK 激活组与模型组大
          激活组相比，大黄素+IKK 激活组大鼠子宫肌条肌张力                         鼠子宫平滑肌层病理结构类似。结果见图1。
          显著降低（P＜0.05）。                                      3.5 大黄素对模型大鼠子宫组织中 NLRP3、cleaved-
          3.2 大黄素对感染性早产大鼠血清中炎症因子水平的                          caspase-1及IKK/IκB/NF-κB信号通路蛋白表达的影响
          影响                                                     与 对 照 组 相 比 ，模 型 组 大 鼠 子 宫 组 织 NLRP3、
              与对照组相比，模型组大鼠血清中 IL-1β、IL-6、                    cleaved-caspase-1、IKK、IκB、NF-κB p65 蛋白表达水平
          TNF-α 水平均显著升高（P＜0.05）；与模型组相比，大黄                    均显著升高（P＜0.05）；与模型组相比，大黄素组大鼠子
          素组大鼠血清中 IL-1β、IL-6、TNF-α 水平均显著降低                   宫组织中上述蛋白表达水平均显著降低（P＜0.05），IKK
         （P＜0.05），IKK 激活组大鼠血清中 IL-1β、IL-6、TNF-α              激活组大鼠子宫组织中上述蛋白表达水平均显著升高
          水平均显著升高（P＜0.05）；与大黄素组相比，大黄素+                      （P＜0.05）；与大黄素组相比，大黄素+IKK 激活组大鼠
          IKK 激活组大鼠血清中 IL-1β、IL-6、TNF-α 水平均显著                子宫组织中上述蛋白表达水平均显著升高（P＜0.05）；
          升高（P＜0.05）；与 IKK 激活组相比，大黄素+IKK 激活                  与 IKK 激活组相比，大黄素+IKK 激活组大鼠子宫组织
          组大鼠血清中 IL-1β、IL-6、TNF-α 水平均显著降低（P＜                 中上述蛋白表达水平均显著降低（P＜0.05）。结果见图
          0.05）。结果见表1。                                       2、表3。


          中国药房  2024年第35卷第21期                                              China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 21    · 2631 ·
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