Page 34 - 《中国药房》2024年21期
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burned wound were significantly decreased (P<0.05). Compared with the model group, the pathological changes and the levels of
the above indicators in the serum and central tissue of the burned wound in the CAS low- and high-dose groups were significantly
reversed (P<0.05), and the changes in the CAS high-dose group were significantly more pronounced than those in the CAS low-
dose group (P<0.05). The addition of the PI3K inhibitor LY294002 could reverse the promoting effect of CAS on the wound
healing of superficial second-degree burned rats (P<0.05). CONCLUSIONS CAS can promote the healing of superficial second-
degree burned wounds in rats, and its mechanism of action may be related to the activation of the PI3K/AKT/mTOR signaling
pathway.
KEYWORDS casticin; superficial second-degree burn; wound healing; PI3K/AKT/mTOR signaling pathway
烧伤是由火焰、热液等外界因素造成的外伤性损 215094,规格30 g/支,津药达仁堂京万红(天津)药业有限
伤,浅Ⅱ度烧伤则是指烧伤程度至表皮生发层及真皮 公司];苏木素-伊红(HE)染色试剂盒(批号231119,上海
层,患者通常表现出烧伤部位皮肤红肿、表面有水疱及 翌圣生物科技股份有限公司);白细胞介素6(interleukin-6,
渗液等症状,其疼痛程度高、创面愈合缓慢且治疗周期 IL-6;批号230604)、IL-1β(批号221014)、肿瘤坏死因子
长,会对患者的身体及心理健康造成不良影响 [1―2] 。目 α(tumor necrosis factor-α,TNF-α;批号201126)、基质金
前临床针对浅Ⅱ度烧伤患者通常给予清创以及抗感染 属 蛋 白 酶 2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2;批 号
治疗,若处理不当,极易引发感染,严重者甚至会发展至 230608)、MMP-9(批号 230709)、血管内皮生长因子
全身感染,增加多器官功能衰竭的发生风险 [3―4] 。因此, (vascular endothelial growth factor,VEGF;批号 231118)
寻找能够促进烧伤创面愈合的药物具有重要意义。 酶联免疫吸附检测(enzyme-linked immunosorbent as‐
紫花牡荆素(casticin,CAS)是一种从蔓荆子中分离 say,ELISA)试剂盒均购自上海酶联生物科技有限公司;
并提取出的黄酮类化合物,既往已有研究报道CAS具有 兔抗磷酸化 PI3K(p-PI3K,批号 201216)、兔抗 PI3K(批
抗癌、抗氧化等多种生理活性 [5―6] 。此外,CAS还被证实 号 200605)、兔抗磷酸化 AKT(p-AKT,批号 221123)、兔
能够抑制神经元损伤、膝骨关节炎等炎性疾病的发生及 抗 AKT(批号 221129)和兔抗甘油醛-3-磷酸脱氢酶
发展 [7―8] 。因此笔者推测CAS可抑制烧伤创面炎症反应 (GAPDH,批号 200903)一抗均购自英国Abcam公司;鼠
的发生并促进创面愈合。磷脂酰肌醇3-激酶(phosphati‐ 抗磷酸化 mTOR(p-mTOR,批号 2000514)、鼠抗 mTOR
dylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶 B(protein kinases, (批号220624)一抗均购自美国Cell Signaling公司;辣根
AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of 过氧化酶(HRP)标记的山羊抗兔免疫球蛋白G(IgG)二
rapamycin,mTOR)信号通路是一条经典的信号传导通 抗(批号 201129)、HRP 标记的山羊抗鼠 IgG 二抗(批号
路,可调控包括冠状动脉内膜增殖、关节炎等在内的炎 201112)均购自上海碧云天生物技术有限公司。
性疾病的发生发展 [9―11] ,但目前尚无 CAS 作用于 PI3K/ 1.3 动物
AKT/mTOR 信号通路对浅Ⅱ度烧伤创面愈合影响的相 本研究所用动物为SPF级雄性SD大鼠,共90只,体
关报道。因此,本研究将基于 PI3K/AKT/mTOR 信号通 重 230~250 g,购自常州卡文斯实验动物有限公司,动
路探究 CAS 对浅Ⅱ度烧伤创面愈合的促进作用及可能 物生产许可证号为 SCXK(苏)2021-0013。所有大鼠均
机制,以期为CAS的进一步开发利用提供参考。 于通风良好、温度25 ℃、相对湿度50%的条件下适应性
1 材料 饲养 1 周后开展后续实验,饲养期间自由饮水和摄食。
1.1 主要仪器 该研究经安徽医科大学实验动物伦理委员会批准(编号
MD spectraMax Plus 384 型全波长光吸收酶标仪 LLSC20221357),符合《实验动物护理和使用指南》中的
(上海远耀生物科技有限公司);HM450 型切片机(上海 相关要求。
聚慕医疗器械有限公司);TGear HC15 型高速离心机 2 方法
(北京天根生化科技有限公司);Ⅳ-73P1F 型显微镜(日 2.1 造模与分组
本Olympus公司)。 将大鼠按随机数字表法分为对照组,模型组,CAS
1.2 主要药品与试剂 低、高剂量组,CAS高剂量+LY294002组和阳性对照组,
本研究所用的主要药品与试剂有:CAS 对照品(批 每组15只。除对照组外,其余各组均构建浅Ⅱ度烧伤大
号 220605,纯度 98.2%,上海甄准生物科技有限公司); 鼠模型,具体造模方式如下:腹腔注射戊巴比妥钠溶液
PI3K 抑 制 剂 LY294002 对 照 品(批 号 210822,纯 度 (40 mg/kg)对大鼠进行麻醉,剔除其背部毛发(面积约为
99.8%,上海联迈生物工程有限公司);京万红软膏[批号 2 cm×4 cm),用自制烧伤模具(石棉网)固定烧伤区域,
· 2604 · China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 21 中国药房 2024年第35卷第21期