Page 42 - 《中国药房》2024年20期

（肌苷）为参照峰，计算得到各共有峰相对保留时间的 蒲，可能是 3 味中药的共有成分；4 号峰来源于泽泻；5
RSD 均≤0.56%（n＝6），相对峰面积的 RSD 均≤3.95% （肌苷）、11（红景天苷）、12、24 号峰来源于红景天；另外
（n＝6），表明方法重复性良好。 10个成分未明确归属。结果见图2（鉴于篇幅有限，仅展

2.1.7 稳定性试验 示供试品溶液和混合对照品溶液的HPLC图）。
取“2.1.2”项下供试品溶液（编号S8），分别于4 ℃下 5
650
放置2、4、8、10、12、24、36 h时按“2.1.1”项下色谱条件进 600
550
样测定，以5号峰（肌苷）为参照峰，计算得到各共有峰相 500
450
对保留时间的 RSD 均≤0.83%（n＝7），相对峰面积的 400
350
RSD 均≤3.85%（n＝7），表明供试品溶液在 4 ℃下放置 信号/mV 300 11
250
36 h内稳定性良好。 200 6 12
150 1 18 19
2.1.8 指纹图谱的建立及相似度评价 100 3 8 9 14 16 20 22 25 26 27 28
50 2 4 7 10 13 15 17 21 23 24
取 13 批 TJG，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液， 0
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110
再按“2.1.1”项下色谱条件进样测定，使用《中药色谱指 时间/min
A.供试品溶液（编号S8）
纹图谱相似度评价系统（2012 版）》进行分析。以样品
14
S1为参照图谱，采用平均数法生成对照图谱R；以5号峰 1 100
1 000
（肌苷）为参照峰，通过多点校正和 Mark 峰匹配生成指 900 8
纹图谱。结果显示，共标定 28 个共有峰（图 1）。13 批 800
700
TJG 指纹图谱与对照图谱 R 的相似度分别为 0.971、 信号/mV 600
500
0.988、0.999、0.998、0.997、0.996、0.994、0.993、0.995、 400 11 18
5
300
0.992、0.975、0.949、0.987，表明不同批次 TJG 中化学成 200 6 23
分的整体相似度良好且基本一致。 100
0
2 100 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110
2 000 5 时间/min
1 900
1 800 B.混合对照品溶液
1 700 12
1 600 11 13 19 5：肌苷；6：天麻素；8：对羟基苯甲醇；11：红景天苷；14：巴利森苷
1 500 6 23 26 27
1 400 1 3 2 4 7 89 10 14 15 16 18 20 21 22 24 25 28 E；18：巴利森苷B；23：钩藤碱。
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1 300 R S13 图2 供试品溶液、混合对照品溶液的HPLC图
1 200
信号/mV 1 100 S12
1 000
S11
900
S9
800 S10 2.2 TJG中4种主要成分的含量测定
700 S8
600 S7
500 S6 2.2.1 色谱条件
400 S5
300 S4
200 S3 以 Waters C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm）为色谱柱；
100 S2
0 S1 以乙腈（A）-0.05%磷酸（B）为流动相进行梯度洗脱（0～
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110
时间/min 5 min，5%A；5～18 min，5%A→7.4%A；18～45 min，
图1 13批TJG的HPLC叠加指纹图谱及对照图谱R 7.4%A→16.6%A；45～48 min，16.6A%→5%A）；检测波
2.1.9 共有峰的归属及指认 长为 225 nm；柱温为 35 ℃；进样量为 10 μL；流速为 1.0
取“2.1.2”“2.1.3”“2.1.4”项下各溶液，按“2.1.1”项下 mL/min。
色谱条件进样测定，通过比对供试品溶液中色谱峰和对 2.2.2 混合对照品溶液的制备
照品中色谱峰的保留时间，对TJG中28个共有峰进行指 称取肌苷、天麻素、巴利森苷 B 和巴利森苷 E 对照
认并确认归属。结果显示，共指认了7个共有峰，分别为 品，加入甲醇溶解，超声处理后，用甲醇定容至 5 mL 容
5号峰（肌苷）、6号峰（天麻素）、8号峰（对羟基苯甲醇）、 量瓶中，制成上述各成分质量浓度分别为 0.856、1.084、
11号峰（红景天苷）、14号峰（巴利森苷E）、18号峰（巴利 1.368、1.124 mg/mL 的单一对照品储备液。精确移取上
森苷B）、23号峰（钩藤碱）。其中，6（天麻素）、8（对羟基 述各单一对照品储备液0.5 mL，置于2 mL容量瓶中，用
苯甲醇）、14（巴利森苷 E）、18（巴利森苷 B）号峰来源于 甲醇定容，制成上述各成分质量浓度分别为 0.214、
天麻；10 号峰来源于白术；13、15、16、23（钩藤碱）、26、 0.271、0.342、0.281 mg/mL 的混合对照品溶液，经 0.22
27、28号峰来源于钩藤；7号峰来源于茯苓、钩藤和石菖 μm微孔滤膜滤过，收集滤液，即得。

· 2484 · China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 20 中国药房 2024年第35卷第20期