Page 41 - 《中国药房》2024年20期
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术、法半夏、茯苓用量，去橘红、甘草、生姜、大枣，增加钩                        科技股份有限公司；巴利森苷B对照品（批号PS011138，
          藤、石菖蒲、泽泻、红景天化裁而成。方中法半夏燥湿化                          纯度＞98%）购自北京翰隆达科技发展有限公司；巴利
          痰、降逆止呕、消痞散结，天麻熄风止痉、平抑肝阳、祛风                         森苷E对照品（批号PS012053，纯度＞98%）购自成都普
          通络，二者合为君药。白术与茯苓益气健脾、燥湿利水，                          思生物科技股份有限公司；对羟基苯甲醇对照品（批号

          两者共用，旺脾健运、湿去痰消，以治生痰之源；钩藤清                          C13112603，纯度＞98%）购自上海麦克林生化科技有限
          热平肝、熄风止痉，助天麻平肝熄风，三者共用，肝脾同                          公司；钩藤碱对照品（批号 RP200516，纯度＞99%）购自
          调，以增强化痰熄风之功，共为臣药。泽泻、石菖蒲为佐                          成都麦德生科技股份有限公司；甲醇、乙腈、磷酸均为色
          药，红景天为使药。全方健脾化痰、熄风通络、风痰并                           谱纯，水为超纯水。
          治、气血并调、标本兼顾。TJG 临床上用于治疗风痰上                         2 方法与结果
          扰之头晕、头痛、失眠，风痰上扰型中风所致肢体麻木、                          2.1 TJG的HPLC指纹图谱建立
          瘫痪等，疗效较好 ，且在治疗过程中未有患者出现不良                          2.1.1 色谱条件
                         [1]
          反应。本课题组前期对TJG的入脑成分进行鉴定，通过                              以 Waters C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm）为色谱柱；
          对比对照品确认了肌苷和天麻素。                                    以乙腈（A）-0.05% 磷酸（B）为流动相进行梯度洗脱
              目前，TJG的质量标准仅依据《中国药典》中的薄层                      （0～5 min，5%A；5～20 min，5%A→7.4%A；20～47 min，
          色谱。由于TJG药味多、成分复杂且具体化学成分尚不                          7.4%A→16.6%A；47～83 min，16.6%A→35.2%A；83～
          清楚，因此难以评价TJG的整体质量。指纹图谱具有整                          86 min，35.2%A→40.5%A；86～96 min，40.5%A→55.5%A；
          体性的特点，能全面反映中药及其复方制剂所包含的化                           96～116 min，55.5%A→5%A）；检测波长为 225 nm；柱
                    [2]
                                                [3]
          学成分信息 ，已被广泛用于中药的质量控制 。化学计                          温为35 ℃；进样量为10 μL；流速为1.0 mL/min。
          量学分析可通过降维的方式对多指标进行系统分析，具                           2.1.2 供试品溶液的制备
          有预测精度高的特点         [4―7] 。基于此，本研究采用高效液                  称取TJG 10 g（相当于生药13.35 g），置于具塞锥形
          相色谱（HPLC）法建立 TJG 的指纹图谱，采用化学计量                      瓶中，加入甲醇 50 mL，于 4 ℃浸渍 12 h，超声（功率 800
          学分析考察影响 TJG 质量的标志性成分，同时测定了                         W，频率 40 kHz，下同）处理 60 min，冷却，称定质量，用
          TJG 中肌苷、天麻素、巴利森苷 B 和巴利森苷 E（巴利森                     甲醇补充减失质量，滤过，滤液浓缩至干；残渣与甲醇混
          苷类化合物是天麻的主要成分，具有治疗脑部疾病的独                           合，再次超声，将复溶物移至 1 mL 容量瓶中，用甲醇定
                [8]
          特活性 ）的含量，旨在为TJG的质量控制提供参考。                          容，经0.22 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。
          1 材料                                               2.1.3 空白辅料、单味药及其阴性供试品溶液的制备
          1.1 主要仪器                                               称取空白辅料颗粒、各单味药颗粒及其阴性颗粒各
              本研究所用仪器包括 K2025 型悟空 HPLC 仪（山东                  10 g，按“2.1.2”项下方法制备，即得。
          悟空仪器有限公司）、AUW120D型十万分之一电子天平                        2.1.4 混合对照品溶液的制备
         （上海岛津实验器材有限公司）、HWS-26 型电热恒温水                            精密称取肌苷、天麻素、对羟基苯甲醇、红景天苷、
          浴锅（上海微川精密仪器有限公司）、KH-800KDE 型高                      钩藤碱、巴利森苷 B 和巴利森苷 E 对照品，加入甲醇溶
          效率数控超声波清洗器（昆山禾创超声仪器有限公司）、                          解，超声处理后，用甲醇定容至 1 mL 容量瓶中，制成上
          UPTA-20 型超纯水仪（上海力辰邦西仪器科技有限                         述各成分质量浓度分别为 1.240、0.920、1.110、1.560、
          公司）。                                               1.100、0.470、0.593 mg/mL的混合对照品溶液。
          1.2 主要药品与试剂                                        2.1.5 精密度试验

              13 批 TJG（编号 S1～S13，批号分别为 20210720、                 取“2.1.2”项下供试品溶液（编号S8），按“2.1.1”项下
          20220218、20220406、20220509、20220705、20220905、      色谱条件连续进样测定6次，以5号峰（肌苷）为参照峰，
          20221107、20221115、20221124、20221130、20221205、      计算得到各共有峰相对保留时间的RSD均≤0.92%（n＝
          20221210、20221219，粤药制备字 Z20190025000）、空白           6），相对峰面积的RSD均≤3.69%（n＝6），表明方法精密
          辅料颗粒、各单味药颗粒及其阴性颗粒均由东莞市中医                           度良好。
          院提供；肌苷对照品（批号E1824110，纯度＞98%）、天麻                    2.1.6 重复性试验
          素对照品（批号 F-2228257，纯度≥98%）、红景天苷对照                       取TJG（编号S8），共6份，按“2.1.2”项下方法制备供
          品（批号C2202383，纯度≥98%）均购自上海阿拉丁生化                     试品溶液，再按“2.1.1”项下色谱条件进样测定，以5号峰


          中国药房  2024年第35卷第20期                                              China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 20    · 2483 ·
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