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距离为7.5时，13批TJG聚为3类，其中S1、S2、S8～S10、 标准，筛选影响TJG质量的标志性成分 [9―10] ，得到肌苷的
S12为一类，S3、S7为一类，S4～S6、S11、S13为一类。结 VIP 值＞1，表示该成分是影响 TJG 质量的标志性成分
2
果见图4。 （图 7）。进一步使用基于 R Y 和 Q 的七折交叉验证和
2
平方欧氏距离 200 次置换检验来控制 OPLS-DA 模型出现过拟合情
25
2
况。由图 8 可知，R 的截距为 0.078 7（＜0.2），Q 的截距
2
20
特征值 15 为－0.388（＜0.05），表明OPLS-DA模型未过拟合，模型
可靠。
10
5 1.6
1.4
1.2
0 1.0
S11 S4 S13 S5 S6 S3 S7 S8 S10 S1 S9 S2 S12 VIP值 0.8
0.6
图4 13批TJG的聚类分析树状图 0.4
0.2
0
肌苷 巴利森苷B 巴利森苷E 天麻素
2.3.2 主成分分析 成分
采用 SPSS 20.0 软件对肌苷等 4 个成分含量测定结 图7 肌苷等4个成分的VIP值
Validate Mode
果进行 Kaiser-Meyer-Olkin（KMO）检验和 Bartlett 检验， Intercepts：R ＝（0.0，0.078 7），Q ＝（0.0，－0.388）
2
2
2
得到 KMO 的度量值为 0.578（＞0.5），Bartlett 检验的 P ，（ Cum ） 0.6 R Y（Cum）
Q（Cum）
2
0.2
值＜0.05，表示可以进行主成分分析（principal compo‐ （ Cum ） Q 2 －0.2
nent analysis，PCA）。从碎石图（图 5）可知，前 2 个主成 －0.6
－1.0
R 2 Y －20 0 20 40 60 80 100 120
分的特征值＞1，累计方差贡献率为 99.829%，表示这 2 Correlation between original Y-vector and permuted Y-vector
200 permutations，component 2
个主成分可以反映原数据中的大部分信息。进一步采
图8 OPLS-DA置换检验模型
用SIMCA 18软件建立载荷散点图（图6），分析肌苷等4
3 讨论
个成分对 PCA 模型的贡献能力，结果显示，肌苷对第 2
3.1 供试品溶液制备方法和色谱条件的选择
主成分的贡献度最大，天麻素、巴利森苷 B、巴利森苷 E
本课题组前期分别对不同提取方法（超声提取、回
对第1主成分均有贡献。
流提取）、颗粒剂用量（1、10、20、30 g）、提取溶剂浸渍时
1 250 间（12、24、36、48 h）、超声功率（200、500、800 W）、超声
1 000
时间（15、30、60、90 min）、复溶溶剂（5% 乙腈、乙腈、甲
特征值 750 醇）、流动相体系（乙腈-水、乙腈-0.01%磷酸、乙腈-0.05%
500
磷酸）、检测波长（203、208、210、220、225、230、245、265、
250
277 nm）、柱温（25、30、35、40 ℃）进行了考察，结果显示，
0
1 2 3 4 采用本研究所用的供试品溶液制备方法和色谱条件时，
成分数
图5 主成分碎石图 得到的色谱峰数目最多、响应最佳、峰高分布差异最小、
邻峰分离度最优、基线稳定。
1.0
0.8 肌苷 3.2 指纹图谱及化学计量学分析结果评价
0.6
p[2] 0.4 本研究从 TJG 的 HPLC 指纹图谱中标定了 28 个共
0.2
0 天麻素
－0.2 巴利森苷B
－0.4 巴利森苷E 有峰，指认了其中7个共有峰，分别为天麻素、对羟基苯
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6
2
2
R X[1]＝0.725，R X[2]＝0.225 甲醇、巴利森苷E、巴利森苷B、钩藤碱、肌苷、红景天苷。
图6 肌苷等4个成分的载荷散点图
13 批 TJG 的相似度均大于 0.9，表明不同批次 TJG 的整
2.3.3 正交偏最小二乘法-判别分析 体化学成分组成相对稳定。聚类分析结果显示，13 批
以 4 个成分含量测定结果为变量，采用 SIMCA 18 TJG 聚为 3 类，其原因可能为制剂生产过程中所用的中
软件建立正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal par‐ 药饮片批次不同。PCA 和 OPLS-DA 结果显示，肌苷是
tial least squares-discriminant analysis，OPLS-DA）模型， TJG的主成分之一，也是影响TJG质量的标志性成分。
OPLS-DA 模型中，R X 为 0.949，Q 为 0.664，均大于 0.5， 3.3 含量结果分析
2
2
表明所建模型具有良好的解释和预测能力。以变量重 13 批 TJG 中肌苷、天麻素、巴利森苷 B、巴利森苷 E
要性投影（variable importance projection，VIP）值＞1 为 的含量分别为62.637～176.677、17.821～37.642、5.748～
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