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10]显著减弱，但 SC79 组裸鼠肿瘤组织中 Ki-67 阳性表                   表3 各组裸鼠肿瘤组织中Akt/MDM2/p53信号通路相
          达[（58.52±5.91）%，n＝10]显著增强（P＜0.05）；AU+                    关蛋白表达水平比较（x±s，n＝10）
          SC79 组 裸 鼠 肿 瘤 组 织 中 Ki-67 阳 性 表 达 [（40.28±         组别            p-Akt/Akt  p-MDM2/MDM2   p53/β-actin
                                                              肿瘤组           0.55±0.06   0.67±0.07    0.37±0.04
          4.18）%，n＝10]与 AU 组比较显著增强（P＜0.05），但与
                                                              AU组           0.28±0.03 a  0.34±0.04 a  0.61±0.07 a
          SC79组比较显著减弱（P＜0.05）。结果见图5。                          SC79组         0.78±0.08 a  0.88±0.09 a  0.19±0.02 a
                                                              AU+SC79组      0.59±0.06 bc  0.61±0.07 bc  0.34±0.04 bc
                                                                 a：与肿瘤组比较，P＜0.05；b：与AU组比较，P＜0.05；c：与SC79组
                                                              比较，P＜0.05。
                                                              4 讨论
                                                                  前列腺是男性生殖系统中重要的实质性器官，前列
                                                              腺癌是男性癌症相关死亡的第二大原因，被认为是一种
                                                                              [16]
                                                              雄激素依赖性癌症 。大多数 PC 患者被确诊时已经转
                                                              移或处于局部晚期，目前的治疗方法虽然在一定程度上
                   A.肿瘤组                   B. AU组
                                                              提高了患者存活率，但可能会引起尿频和尿急等副作用，
                                                                                                           [17]
                                                              影响患者的生活质量，并存在复发、并发症等风险 。
                                                              因此，寻找和开发有效治疗PC的药物已迫在眉睫。
                                                                  近年来，植物提取物和中草药因其副作用较小，已
                                                              成为治疗肿瘤的潜在候选物。AU 是一种环烯醚萜苷，
                                                              是从中草药中分离出来的天然化合物，具有抗肿瘤、抗
                                                                                                        [18]
                                                              骨质疏松、抗炎、保肝、抗氧化等多种生物学特性 。本
                   C. SC79组              D. AU+SC79组          研究中的平板克隆形成实验及 MTT 实验结果表明，经
          图5 各组裸鼠肿瘤组织中Ki-67蛋白表达观察结果（免                         AU干预后，PC3细胞克隆、增殖能力降低，表明AU可抑
               疫组化法）                                          制PC细胞增殖。流式细胞术检测结果显示，AU处理细

          3.2.3 AU 对裸鼠肿瘤组织中 Akt/MDM2/p53 信号通路                 胞后，PC3细胞凋亡率升高，表明AU可诱导PC3细胞凋
          相关蛋白表达的影响                                           亡。Ki-67 是细胞核内与增殖相关的核蛋白，可反映肿
                                                                            [19]
                                                              瘤细胞增殖活性 。动物实验结果进一步显示，裸鼠肿
              与肿瘤组比较，AU 组裸鼠肿瘤组织中 p53 蛋白表
                                                              瘤组织中Ki-67蛋白表达下调，表明AU可抑制异种移植
          达水平显著升高（P＜0.05），Akt、MDM2 蛋白的磷酸化
                                                              肿瘤生长。以上结果提示，AU可能具有抗PC的作用。
          水平均显著降低（P＜0.05），而 SC79 组裸鼠肿瘤组织中
                                                                  Akt 是一种丝氨酸/苏氨酸激酶，可参与 DNA 损伤
          上述指标变化与 AU 组相反（P＜0.05）；AU+SC79 组与
                                                              反应的传导，且其被证实可负向调节 p53 蛋白表达。p-
          AU 组比较裸鼠肿瘤组织中 p53 蛋白表达水平显著降
                                                              Akt可诱导MDM2发生磷酸化，从而使MDM2蛋白从细
          低，Akt、MDM2 蛋白的磷酸化水平均显著升高（P＜
                                                              胞质转移到细胞核，在细胞核中MDM2可降解p53蛋白
          0.05），但与 SC79 组比较裸鼠肿瘤组织中上述指标变化                      并参与 p53 蛋白表达的负向调控 。p53 蛋白作为肿瘤
                                                                                          [20]
          相反（P＜0.05）。结果见图6、表3。                                抑制因子，通常在多种人类癌症中突变或功能失活，进
                 p-Akt                           60 kDa       而影响DNA损伤反应的修复过程。本研究通过体内外
                                                              实验发现，AU 可抑制裸鼠肿瘤组织及 PC3 细胞中 Akt、
                  Akt                            60 kDa       MDM2蛋白磷酸化，促进p53蛋白表达，这提示AU可能
                                                              是通过调节 Akt/MDM2/p53 信号通路发挥抗 PC 作用。
               p-MDM2                            90 kDa
                                                              SC79是一种特异性Akt活化剂，可用于增强各种生理和
                                                              病理条件下 Akt 活性。本研究通过体内外实验验证，结
                MDM2                             90 kDa
                                                              果显示，单独加入SC79可激活Akt/MDM2信号通路，进
                                                              而抑制 p53 蛋白表达，促进 PC 细胞恶性发展及肿瘤生
                  p53                            53 kDa
                                                              长，但联合 AU 处理后，上述作用效果被扭转。这表明
                                                              AU可能是通过抑制Akt/MDM2/p53信号通路实现抗PC
                β-actin                          42 kDa
                                                              作用。
                        A      B      C      D
             A：肿瘤组；B：AU组；C：SC79组；D：AU+SC79组。                      综上所述，AU可通过抑制Akt/MDM2/p53信号通路
          图6 各组细胞中p-Akt、p-MDM2、p53、Akt、MDM2蛋                  对PC发挥抗肿瘤作用。这为AU抗肿瘤的临床应用提供
               白表达的电泳图                                        了依据，但是否涉及其他作用机制，仍有待进一步研究。


          · 1622 ·    China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 13                            中国药房  2024年第35卷第13期
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