Page 75 - 《中国药房》2024年13期

BMP2 25 kDa 3.5.2 肠道菌群的Alpha多样性
与对照组比较，模型组大鼠的 Chao 1、Shannon、
CSF1 55 kDa
Pielou’s evenness、Faith’s PD均显著降低（P＜0.05或P＜
TLR4 100 kDa 0.01）；与模型组比较，各药物组大鼠的Chao 1、Shannon、
Faith’s PD 和中药组大鼠的 Simpson 均显著升高（P＜
β-tubulin 55 kDa
0.05 或 P＜0.01）；而各组大鼠的 Good’s coverage 比较，
对照组 模型组 中药组 阳性对照组
A.电泳图 差异均无统计学意义（P＞0.05）。结果见图3。
对照组
10
模型组
a 中药组 3 000 1.02
8 阳性对照组 2 500 b Simpson 1.00 c
蛋白表达水平 6 4 b Chao 1 2 000 a b 0.98
0.96
a
1 500
K M X Z K M X Z
2
b 组别 组别
a
0 10
BMP2 CSF1 TLR4 0.85
B.柱形图（x±s，n＝6） Shannon 9 b s evenness
a：与对照组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.05。 b 0.80
图1 各组大鼠结肠组织中BMP2、CSF1、TLR4蛋白表 8 a Pielou’ 0.75 a
达情况比较（Western blot法） 0.70
K M X Z K M X Z
组别 组别
240
220 0.995
s PD b b s coverage 0.990
Faith’ 200 0.985
50 μm 50 μm d Good’
180
A.对照组 B.模型组 0.980
160
K M X Z K M X Z
组别 组别
K：对照组；M：模型组；X：阳性对照组；Z：中药组；a：与对照组比
较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.01；c：与模型组比较，P＜0.05；d：
与对照组比较，P＜0.05。
50 μm 50 μm
图3 各组大鼠肠道菌群Alpha多样性比较[M（P25，P75 ），
C.中药组 D.阳性对照组 n＝6]
箭头：BMP2蛋白阳性表达区域。
图2 各组大鼠结肠组织肌层中BMP2蛋白分布情况的 3.5.3 肠道菌群的物种组成
显微图（免疫组化法） （1）门水平下菌群物种组成分析结果（图4A）显示，
表5 各组大鼠结肠组织肌层中BMP2、CSF1、TLR4蛋 各组大鼠肠道菌群的物种组成均有所改变，其中厚壁菌
白的平均光密度比较（x±s，n＝6） 门 Firmicutes/拟杆菌门 Bacteroidetes 相对丰度比值的变
组别 BMP2 CSF1 TLR4 化最为明显，该比值由低到高依次为中药组、对照组、阳
对照组 0.145 0±0.026 0 0.004 4±0.003 3 0.068 7±0.008 2 性对照组、模型组。（2）PCoA 结果（图 4B）显示，模型组
模型组 0.001 4±0.000 2 a 0.101 2±0.010 0 a 1.100 4±0.059 2 a
中药组 0.091 1±0.019 3 b 0.051 4±0.005 5 b 0.413 4±0.022 2 b 大鼠的肠道菌群物种组成与对照组差异明显，中药组更
阳性对照组 0.004 8±0.000 5 c 0.047 0±0.006 2 b 0.450 9±0.070 1 b 贴近于对照组，而阳性对照组更贴近于模型组。
a：与对照组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.01；c：与模型组 3.5.4 肠道菌群的物种差异
比较，P＜0.05。
由 LEfSe 分析的多级物种层级树图（图 5）可见，在
3.5 痛泻要方对大鼠粪便菌群的影响 属水平下，对照组大鼠的优势菌属为罗氏菌属Rothia、葡
3.5.1 测序结果质量分析 萄糖菌属Staphylococcus、韦荣氏球菌属Veillonella、杆菌
经过DADA2序列去噪后，共获得875 554条去噪序
列，平均单个样本产生36 481条去噪序列。在97%的相似 属 Aggregatibacter；模型组大鼠的优势菌属为 Dorea、
Erysipelotrichaceae.p_75_a5、Akkermansia；阳性对照组
度水平下对序列进行聚类分析，所得稀释曲线显示，曲线随
测序量的增加而趋于平缓，各样本的操作分类单元（opera‐ 大鼠的优势菌属为双歧杆菌属 Bifidobacterium、拟杆菌
tional taxonomic units，OUTS）不会随测序量的增加而增 属 Bacteroides、Turicibacter、梭 菌 属 Clostridium、Rose‐
加，表明本研究所有样本序列充分，现有测序量能够覆 buria；中药组大鼠的优势菌属为普雷沃氏菌属 Pre‐
盖样本中的绝大部分物种，所得数据可用于后续分析。 votella、布劳特氏菌属Blautia、Phascolarctobacterium。

中国药房 2024年第35卷第13期 China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 13 · 1609 ·