Page 61 - 《中国药房》2024年12期

表3 吴茱萸碱对高糖诱导的滋养层细胞相关 mRNA 4 讨论
表达的影响（x±s，n＝6） 研究发现，具有正常生物学功能的滋养层细胞对胎
组别 AGE mRNA RAGE mRNA NF-κB p65 mRNA MMP-2 mRNA MMP-9 mRNA 盘的发育至关重要，当滋养层细胞长期处于高糖环境
对照组 1 1 1 1 1 时，其侵袭、迁移和增殖会受到抑制，进而导致孕妇流产
高糖组 1.67±0.18 a 1.63±0.17 a 1.71±0.18 a 0.45±0.05 a 0.51±0.06 a [10]
吴茱萸碱低浓度组 1.42±0.15 b 1.39±0.16 b 1.48±0.14 b 0.62±0.06 b 0.69±0.08 b 和胎儿早产 。本研究通过在高糖环境下培养人绒毛
吴茱萸碱高浓度组 1.15±0.13 bc 1.11±0.12 bc 1.20±0.11 bc 0.87±0.09 bc 0.86±0.10 bc 膜滋养层细胞 HTR-8/SVneo 以体外模拟 GDM，结果显
pc-NC组 1.17±0.14 1.10±0.13 1.18±0.13 0.85±0.08 0.85±0.07 示，经高糖处理后，HTR-8/SVneo细胞的存活率和迁移、
pc-RAGE组 1.23±0.16 1.35±0.15 de 1.44±0.15 de 0.69±0.07 de 0.71±0.08 de
侵袭能力均较对照组显著降低或减弱，凋亡率较对照组
a：与对照组比较，P＜0.05；b：与高糖组比较，P＜0.05；c：与吴茱萸
碱低浓度组比较，P＜0.05；d：与吴茱萸碱高浓度组比较，P＜0.05；e：与 显著升高，提示高糖环境会损伤HTR-8/SVneo细胞的生
pc-NC组比较，P＜0.05。 物学功能。
3.5 吴茱萸碱对高糖诱导的滋养层细胞相关蛋白表达 作为中药吴茱萸的活性成分之一，吴茱萸碱可减轻
的影响 游离脂肪酸诱导的人脐静脉内皮细胞的炎症损伤，是治
[12]
与对照组比较，高糖组细胞 AGE、RAGE 蛋白的表 疗胰岛素抵抗和 2 型糖尿病的潜在药物 ；而妊娠期胰
达水平和 NF-κB p65 蛋白的磷酸化水平均显著升高， 岛素抵抗可导致胰岛 β 细胞功能障碍而使葡萄糖耐量
[2]
MMP-2、MMP-9 蛋 白 的 表 达 水 平 均 显 著 降 低（P＜ 受损，最终引发 GDM 。此外，吴茱萸碱具有降血糖作
0.05）；与高糖组比较，吴茱萸碱低、高浓度组细胞AGE、 用，能显著降低2型糖尿病大鼠的空腹血糖，并有一定的
[13]
RAGE蛋白的表达水平和NF-κB p65蛋白的磷酸化水平 胰腺、肝脏保护作用 。以上研究表明，吴茱萸碱可能
均显著降低，MMP-2、MMP-9蛋白的表达水平均显著升 是 GDM 的潜在治疗药物。另有研究显示，胎盘滋养层
高，且吴茱萸高浓度组的改善效果显著优于低浓度组 细胞侵袭子宫的行为受多因素的严格调控，其中MMP-
（P＜0.05）；与吴茱萸碱高浓度组和 pc-NC 组比较，pc- 2、MMP-9蛋白的合成和激活是必需环节，两者可显著增
[14]
RAGE组细胞RAGE蛋白的表达水平和NF-κB p65的磷 强滋养层细胞的侵袭能力 。本研究结果显示，经吴茱
酸化水平均显著升高，MMP-2、MMP-9蛋白的表达水平 萸碱干预后，高糖诱导的HTR-8/SVneo细胞的存活率和
均显著降低（P＜0.05）。结果见图4和表4。 迁移、侵袭能力均显著升高或增强，凋亡率显著降低，且
MMP-2、MMP-9 mRNA及蛋白的表达均显著上调，提示
AGE 70 kDa
该成分可减轻高糖条件下滋养层细胞的损伤，改善受损
RAGE 46 kDa 滋养层细胞的生物学功能。
AGE是由蛋白、脂质和核酸的游离氨基与还原糖的
p-NF-κB p65 65 kDa
醛基发生非酶基化等一系列反应而产生的化合物。在
pNF-κB p65 65 kDa
糖尿病中，高血糖可导致AGE积累，激活AGE/RAGE通
[15]
MMP-2 74 kDa 路，进而加剧高糖诱导的细胞功能损伤 ；同时，活化的
AGE 可结合 RAGE，进一步触发 NF-κB 介导的炎症反
MMP-9 78 kDa
[16]
应，最终影响糖尿病大鼠的骨代谢 。另有研究发现，
GAPDH 36 kDa
GDM 产妇脐带血样品中 AGE 水平过高，是新生儿低血
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ [17]
Ⅰ：对照组；Ⅱ：高糖组；Ⅲ：吴茱萸碱低浓度组；Ⅳ：吴茱萸碱高浓 糖发生的危险因素 ；同时，GDM 孕妇血清样品中
度组；Ⅴ：pc-NC组；Ⅵ：pc-RAGE组。 RAGE 水平高于非 GDM 孕妇，提示该指标对孕妇发生
图4 吴茱萸碱对高糖诱导的滋养层细胞相关蛋白表达 胰岛素抵抗及不良妊娠结局具有一定临床指导价值 。
[18]
影响的电泳图 本研究结果显示，在高糖环境中，HTR-8/SVneo 细胞中
表4 吴茱萸碱对高糖诱导的滋养层细胞相关蛋白表达 AGE、RAGE 蛋 白 及 mRNA 的 表 达 水 平 、NF- κB p65
的影响（x±s，n＝6） mRNA 的表达水平和 NF-κB p65 蛋白的磷酸化水平均
组别 AGE/GAPDH RAGE/GAPDH p-NF-κB p65/NF-κB p65 MMP-2/GAPDH MMP-9/GAPDH 显著升高，提示高糖环境会激活细胞中的AGE/RAGE信
对照组 0.45±0.05 0.51±0.06 0.38±0.03 0.84±0.08 0.89±0.09 号通路。经吴茱萸碱干预后，HTR-8/SVneo细胞的上述
高糖组 0.97±0.10 a 0.93±0.09 a 0.89±0.09 a 0.32±0.03 a 0.43±0.04 a [8]
吴茱萸碱低浓度组 0.78±0.08 b 0.75±0.07 b 0.73±0.07 b 0.46±0.04 b 0.57±0.06 b 指标均显著降低，与Dai等 的研究结果基本一致，提示
吴茱萸碱高浓度组 0.53±0.06 bc 0.58±0.06 bc 0.49±0.06 bc 0.67±0.06 bc 0.82±0.08 bc 吴茱萸碱可通过调节 AGE/RAGE 信号通路缓解高糖诱
pc-NC组 0.50±0.05 0.60±0.06 0.54±0.05 0.69±0.07 0.78±0.07 导的滋养层细胞功能损伤，促进其增殖、迁移和侵袭。
pc-RAGE组 0.52±0.06 0.73±0.07 de 0.67±0.07 de 0.55±0.05 de 0.64±0.05 de
为了进一步验证上述结果，本研究在HTR-8/SVneo细胞
a：与对照组比较，P＜0.05；b：与高糖组比较，P＜0.05；c：与吴茱萸
中转染 pc-RAGE 以过表达 RAGE，结果显示，过表达
碱低浓度组比较，P＜0.05；d：与吴茱萸碱高浓度组比较，P＜0.05；e：与
pc-NC组比较，P＜0.05。 RAGE 会减弱吴茱萸碱对高糖诱导的滋养层细胞功能

中国药房 2024年第35卷第12期 China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 12 · 1467 ·