Page 62 - 《中国药房》2024年11期

number of cystic follicles， cell apoptosis index， protein expressions of Bax， Caspase-3， p-LATS1 and p-YAP were greatly
decreased （P＜0.05）； the number of corpus luteum， protein expressions of E2， Bcl-2， LATS1， YAP and TAZ were greatly
increased （P＜0.05）. Compared with ERI high-dose group， the above indexes in ERI high-dose + vitiporfin group were inhibited
（P＜0.05）. CONCLUSIONS ERI can promote the proliferation of ovarian granulosa cells and improve the level of sex hormones
in PCOS rats， and its mechanism of action may be related to the inhibition of the Hippo-YAP signaling pathway.
KEYWORDS erianin； granulosa cell； polycystic ovary syndrome； Hippo-YAP signaling pathway； ovarian function； sex hormone

多 囊 卵 巢 综 合 征（polycystic ovary syndrome， 公司；卵泡刺激素（follicle stimulating hormone，FSH）、睾
PCOS）是育龄妇女最常见的内分泌异常疾病，总患病率 酮（testosterone，T）ELISA 试剂盒和辣根过氧化物酶标

为8%～15%，通常与女性不孕症、月经不规律、排卵功能 记 的 羊 抗 兔 IgG 二 抗（批 号 分 别 为 SBJ-R0049、SBJ-
障碍及妊娠并发症有关，还涉及胰岛素抵抗、代谢综合 R0723、BI-WB021）均购自南京森贝伽生物科技有限公
[1]
征和抑郁症的代谢紊乱等 。然而，PCOS具体的发病机 司；苏木素-伊红（HE）染色试剂盒（批号abs9217）购自上
制和病因尚不清楚。卵巢颗粒细胞为卵母细胞的发育 海爱必信生物科技有限公司；TUNEL染色试剂盒（批号
提供营养和生长调节剂，在卵泡发育和排卵过程中起着 C11026-1）购自广州锐博生物科技有限公司；兔源 B 细
至关重要的作用。颗粒细胞凋亡会导致卵泡闭锁，引起 胞淋巴瘤2（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）、转录共激活子因
[2]
卵巢变性，进而引发 PCOS 。因此，PCOS 的发病与颗 子 PDZ 结合基序（transcriptional co-activator with PDZ
粒细胞增殖和凋亡的失调密切相关。 binding motif，TAZ）多克隆抗体和兔源Bcl-2相关X蛋白
Hippo信号通路是一条以YES相关蛋白（YES asso‐ （Bcl-2 associated X protein，Bax）、胱天蛋白酶 3（Cas‐
ciated protein，YAP）为下游效应器的激酶通路，能参与 pase-3）、甘油醛-3-磷酸脱氢酶（glyceraldehyde-3-phos‐
调节卵泡发育的所有阶段。研究发现，该信号通路可介 phate dehydrogenase，GAPDH）单克隆抗体（批号分别为
导卵巢颗粒细胞自噬和凋亡，调节卵泡发育 。既往研 ab196495、ab176396、ab32503、ab184787、ab181602）均购
[3]
究显示，石斛汤可提高 PCOS 患者的妊娠率 [4―5] ，而毛兰 自英国Abcam公司；兔源大肿瘤抑制激酶1（large tumor
素（erianin，ERI）是石斛的主要活性成分之一。鉴于此， suppressor kinase 1，LATS1）、磷酸化 LATS1（phosphory‐

本研究通过构建 PCOS 大鼠模型，探究了 ERI 对 PCOS lated LATS1，p-LATS1）、YAP、磷酸化 YAP（phosphory‐
大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响，并基于Hippo-YAP信号 lated YAP，p-YAP）单克隆抗体（批号分别为 3477、8654、
通路初步探讨了其作用机制，以期为 PCOS 的治疗提供 4912、4911）均购自美国CST公司。
新的方向。 1.3 实验动物
1 材料 雌性 SD 大鼠 65 只，SPF 级，8 周龄，体重 180～220
1.1 主要仪器 g，购自青岛隆和生物科技有限公司，动物生产许可证号
本研究所用主要仪器包括Axio Observer A1型显微 为 SCXK（鲁）2021-0002。大鼠饲养于温度（20±3） ℃、
®
镜（德国Zeiss公司），罗氏 ACCU-CHEK血糖仪[罗氏诊 相对湿度 45%～65% 的笼中，光照 12 h/黑暗 12 h 循环，
断产品（上海）有限公司]，xMark酶标仪（美国Bio-Rad公 均自由饮食。
司），Multifuge X1/X1R Pro 离心机、E-Gel Imager 凝胶 2 方法
TM
成像系统（美国Thermo Fisher Scientific公司）等。 2.1 PCOS大鼠模型制备
1.2 主要药品与试剂 取50只大鼠，参照已有研究方法诱导PCOS大鼠模
ERI 对照品（纯度≥98%，批号 SE8460）购自北京索 型：皮下注射 DHEA（按每 100 g 体重给予 6 mg DHEA，
莱 宝 科 技 有 限 公 司 ；脱 氢 表 雄 酮（dehydroepiandros‐ 溶于 0.2 mL 注射油），每日 1 次，连续 21 d 。造模大鼠
[6]
terone，DHEA）对照品（纯度99%，批号D106380）购自阿 阴道涂片持续以白细胞为主，血清 E2水平显著下降，T、
拉丁试剂（上海）有限公司；维替泊芬对照品（YAP 抑制 LH水平和LH/FSH显著增高，且经病理观察发现卵巢组
剂，纯度 99.26%，批号 HY-B0146）购自美国 MCE 公司； 织呈多囊性改变，即可确定 PCOS 大鼠诱导成功。本研
雌二醇（estradiol，E2 ）、黄体生成素（luteinizing hormone， 究造模过程中没有大鼠死亡。另随机选取 10 只正常大
LH）酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒（批号分别为 鼠作为正常组，以 0.2 mL/d 皮下注射与 PCOS 大鼠相同
BAS16134、BAS16165）均购自上海羽哚生物科技有限 剂量的注射油。

· 1340 · China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 11 中国药房 2024年第35卷第11期