Page 58 - 《中国药房》2024年11期
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2.6 肾组织中Nrf2、HO-1、NLRP3蛋白表达检测                       表2 6 组大鼠血清中 IL-6、IL-1β、TNF-α 水平比较
              采用Western blot法检测。取冻存的右肾组织约50                       (x±s,n=12,ng/mL)
          mg,解冻后制备匀浆,以蛋白裂解液裂解20 min提取组                        组别               IL-6       IL-1β       TNF-α
          织中总蛋白,采用BCA法定量蛋白浓度,然后电泳分离                           假手术组           7.12±0.82   42.16±3.15  51.35±6.77
                                                              模型组            16.46±2.13 a  203.16±14.50 a  141.36±11.18 a
          蛋白样品并转膜;室温下将膜封闭2 h后,在4 ℃下与相                         薯蓣皂苷低剂量组       13.04±2.01 b  148.45±9.17 b  119.48±13.05 b
          应的一抗[Nrf2(稀释比例1∶790)、HO-1(稀释比例1∶790)、               薯蓣皂苷中剂量组       10.35±1.76 bc  110.48±9.02 bc  110.95±13.59 bc
          NLRP3(稀释比例 1∶830)、GAPDH(稀释比例 1∶850)]                薯蓣皂苷高剂量组       8.03±1.13 bcd  76.15±7.35 bcd  86.15±9.67 bcd
                                                              地塞米松组          8.15±1.16 bcd  73.46±6.92 bcd  82.48±8.35 bcd
          一起孵育 24 h;室温下用二抗(稀释比例 1∶1 700)孵育
                                                                 a:与假手术组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05;c:与薯蓣
          1 h后,以电化学发光试剂显影,使用Image J软件对蛋白
                                                              皂苷低剂量组比较,P<0.05;d:与薯蓣皂苷中剂量组比较,P<0.05。
          表达进行定量分析。以目的蛋白与内参蛋白(GAPDH)
          条带灰度值的比值表示目的蛋白的表达量。
          2.7 统计学方法
              使用SPSS 25.0软件对数据进行统计分析。计量资
          料以 x±s 表示,多组间比较采用单因素方差分析,组间
          两两比较采用SNK-q检验。检验水准α=0.05。
          3 结果                                                        A.假手术组                   B.模型组
          3.1 血清中Cr、BUN、NGAL、KIM-1水平检测结果
              与假手术组比较,模型组大鼠血清中 Cr、BUN、
          NGAL、KIM-1 水平均显著升高(P<0.05);与模型组比
          较,各给药组大鼠血清中上述指标水平均显著降低(P<
          0.05),且薯蓣皂苷的作用具有剂量依赖性(P<0.05);薯
          蓣皂苷高剂量组大鼠上述指标水平与地塞米松组比较,
                                                                   C.薯蓣皂苷低剂量组              D.薯蓣皂苷中剂量组
          差异均无统计学意义(P>0.05)。结果见表1。
          表1 6 组大鼠血清中 Cr、BUN、NGAL、KIM-1 水平比
               较(x±s,n=12)
           组别         Cr/(μmol/L)  BUN/(mmol/L)  NGAL/(ng/L)  KIM-1/(ng/L)
           假手术组       38.25±4.06  6.45±1.14  26.16±3.15  19.46±2.05
           模型组        80.85±8.25 a  18.95±3.38 a  144.25±9.27 a  92.45±7.30 a
           薯蓣皂苷低剂量组   64.56±7.02 b  13.64±2.44 b  96.56±9.15 b  64.31±6.62 b
           薯蓣皂苷中剂量组   55.48±6.22 bc  10.86±2.06 bc  60.19±7.23 bc  47.60±4.13 bc  E.薯蓣皂苷高剂量组  F.地塞米松组
           薯蓣皂苷高剂量组   44.62±4.73 bcd  7.80±1.52 bcd  37.51±4.10 bcd  29.01±3.58 bcd  黑色箭头:炎症细胞浸润。
           地塞米松组      43.18±4.52 bcd  7.73±1.57 bcd  35.38±4.37 bcd  27.58±3.17 bcd  图1 6组大鼠肾组织病理形态学观察结果(HE染色)
             a:与假手术组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05;c:与薯蓣           3.4 肾组织中MDA水平和SOD活性检测结果
          皂苷低剂量组比较,P<0.05;d:与薯蓣皂苷中剂量组比较,P<0.05。
                                                                  与假手术组比较,模型组大鼠肾组织中 MDA 水平
          3.2 血清中IL-6、IL-1β、TNF-α水平检测结果                       显著升高(P<0.05),SOD 活性显著降低(P<0.05);与
              与假手术组比较,模型组大鼠血清中 IL-6、IL-1β、                    模型组比较,各给药组大鼠肾组织中 MDA 水平均显著
          TNF-α 水平均显著升高(P<0.05);与模型组比较,各给                     降低(P<0.05),SOD 活性均显著升高(P<0.05),且薯
          药组大鼠血清中 IL-6、IL-1β、TNF-α 水平均显著降低                    蓣皂苷的作用具有剂量依赖性(P<0.05);薯蓣皂苷高
         (P<0.05),且薯蓣皂苷的作用具有剂量依赖性(P<                          剂量组大鼠肾组织中上述指标水平与地塞米松组比较,
          0.05);薯蓣皂苷高剂量组大鼠上述指标水平与地塞米松                         差异均无统计学意义(P>0.05)。结果见表3。
          组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结果见表2。                        3.5 肾组织中Nrf2、HO-1、NLRP3蛋白表达检测结果
          3.3 肾组织病理形态学观察结果                                        与假手术组比较,模型组大鼠肾组织中 Nrf2、HO-1
              假手术组大鼠肾组织未见明显病理变化;模型组大                          蛋白表达量显著降低(P<0.05),NLRP3 蛋白表达量显
          鼠肾组织可见系膜增生、肾小管萎缩,肾小管间质被大                            著升高(P<0.05);与模型组比较,各给药组大鼠肾组织
          量炎症细胞浸润;薯蓣皂苷低剂量组大鼠肾组织可见系                            中 Nrf2、HO-1 蛋 白 表 达 量 均 显 著 升 高(P<0.05),
          膜增生、大量炎症细胞浸润肾小管;薯蓣皂苷中剂量组                            NLRP3 蛋白表达量均显著降低(P<0.05),且薯蓣皂苷
          大鼠肾组织炎症浸润情况缓解;薯蓣皂苷高剂量组和地                            的作用具有剂量依赖性(P<0.05);薯蓣皂苷高剂量组
          塞米松组大鼠肾组织可观察到正常的肾小管。结果                              大鼠上述蛋白表达量与地塞米松组比较,差异均无统计
          见图1。                                                学意义(P>0.05)。结果见图2、表4。


          · 1336 ·    China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 11                            中国药房  2024年第35卷第11期
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