Page 58 - 《中国药房》2024年11期
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2.6 肾组织中Nrf2、HO-1、NLRP3蛋白表达检测 表2 6 组大鼠血清中 IL-6、IL-1β、TNF-α 水平比较
采用Western blot法检测。取冻存的右肾组织约50 (x±s,n=12,ng/mL)
mg,解冻后制备匀浆,以蛋白裂解液裂解20 min提取组 组别 IL-6 IL-1β TNF-α
织中总蛋白,采用BCA法定量蛋白浓度,然后电泳分离 假手术组 7.12±0.82 42.16±3.15 51.35±6.77
模型组 16.46±2.13 a 203.16±14.50 a 141.36±11.18 a
蛋白样品并转膜;室温下将膜封闭2 h后,在4 ℃下与相 薯蓣皂苷低剂量组 13.04±2.01 b 148.45±9.17 b 119.48±13.05 b
应的一抗[Nrf2(稀释比例1∶790)、HO-1(稀释比例1∶790)、 薯蓣皂苷中剂量组 10.35±1.76 bc 110.48±9.02 bc 110.95±13.59 bc
NLRP3(稀释比例 1∶830)、GAPDH(稀释比例 1∶850)] 薯蓣皂苷高剂量组 8.03±1.13 bcd 76.15±7.35 bcd 86.15±9.67 bcd
地塞米松组 8.15±1.16 bcd 73.46±6.92 bcd 82.48±8.35 bcd
一起孵育 24 h;室温下用二抗(稀释比例 1∶1 700)孵育
a:与假手术组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05;c:与薯蓣
1 h后,以电化学发光试剂显影,使用Image J软件对蛋白
皂苷低剂量组比较,P<0.05;d:与薯蓣皂苷中剂量组比较,P<0.05。
表达进行定量分析。以目的蛋白与内参蛋白(GAPDH)
条带灰度值的比值表示目的蛋白的表达量。
2.7 统计学方法
使用SPSS 25.0软件对数据进行统计分析。计量资
料以 x±s 表示,多组间比较采用单因素方差分析,组间
两两比较采用SNK-q检验。检验水准α=0.05。
3 结果 A.假手术组 B.模型组
3.1 血清中Cr、BUN、NGAL、KIM-1水平检测结果
与假手术组比较,模型组大鼠血清中 Cr、BUN、
NGAL、KIM-1 水平均显著升高(P<0.05);与模型组比
较,各给药组大鼠血清中上述指标水平均显著降低(P<
0.05),且薯蓣皂苷的作用具有剂量依赖性(P<0.05);薯
蓣皂苷高剂量组大鼠上述指标水平与地塞米松组比较,
C.薯蓣皂苷低剂量组 D.薯蓣皂苷中剂量组
差异均无统计学意义(P>0.05)。结果见表1。
表1 6 组大鼠血清中 Cr、BUN、NGAL、KIM-1 水平比
较(x±s,n=12)
组别 Cr/(μmol/L) BUN/(mmol/L) NGAL/(ng/L) KIM-1/(ng/L)
假手术组 38.25±4.06 6.45±1.14 26.16±3.15 19.46±2.05
模型组 80.85±8.25 a 18.95±3.38 a 144.25±9.27 a 92.45±7.30 a
薯蓣皂苷低剂量组 64.56±7.02 b 13.64±2.44 b 96.56±9.15 b 64.31±6.62 b
薯蓣皂苷中剂量组 55.48±6.22 bc 10.86±2.06 bc 60.19±7.23 bc 47.60±4.13 bc E.薯蓣皂苷高剂量组 F.地塞米松组
薯蓣皂苷高剂量组 44.62±4.73 bcd 7.80±1.52 bcd 37.51±4.10 bcd 29.01±3.58 bcd 黑色箭头:炎症细胞浸润。
地塞米松组 43.18±4.52 bcd 7.73±1.57 bcd 35.38±4.37 bcd 27.58±3.17 bcd 图1 6组大鼠肾组织病理形态学观察结果(HE染色)
a:与假手术组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05;c:与薯蓣 3.4 肾组织中MDA水平和SOD活性检测结果
皂苷低剂量组比较,P<0.05;d:与薯蓣皂苷中剂量组比较,P<0.05。
与假手术组比较,模型组大鼠肾组织中 MDA 水平
3.2 血清中IL-6、IL-1β、TNF-α水平检测结果 显著升高(P<0.05),SOD 活性显著降低(P<0.05);与
与假手术组比较,模型组大鼠血清中 IL-6、IL-1β、 模型组比较,各给药组大鼠肾组织中 MDA 水平均显著
TNF-α 水平均显著升高(P<0.05);与模型组比较,各给 降低(P<0.05),SOD 活性均显著升高(P<0.05),且薯
药组大鼠血清中 IL-6、IL-1β、TNF-α 水平均显著降低 蓣皂苷的作用具有剂量依赖性(P<0.05);薯蓣皂苷高
(P<0.05),且薯蓣皂苷的作用具有剂量依赖性(P< 剂量组大鼠肾组织中上述指标水平与地塞米松组比较,
0.05);薯蓣皂苷高剂量组大鼠上述指标水平与地塞米松 差异均无统计学意义(P>0.05)。结果见表3。
组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结果见表2。 3.5 肾组织中Nrf2、HO-1、NLRP3蛋白表达检测结果
3.3 肾组织病理形态学观察结果 与假手术组比较,模型组大鼠肾组织中 Nrf2、HO-1
假手术组大鼠肾组织未见明显病理变化;模型组大 蛋白表达量显著降低(P<0.05),NLRP3 蛋白表达量显
鼠肾组织可见系膜增生、肾小管萎缩,肾小管间质被大 著升高(P<0.05);与模型组比较,各给药组大鼠肾组织
量炎症细胞浸润;薯蓣皂苷低剂量组大鼠肾组织可见系 中 Nrf2、HO-1 蛋 白 表 达 量 均 显 著 升 高(P<0.05),
膜增生、大量炎症细胞浸润肾小管;薯蓣皂苷中剂量组 NLRP3 蛋白表达量均显著降低(P<0.05),且薯蓣皂苷
大鼠肾组织炎症浸润情况缓解;薯蓣皂苷高剂量组和地 的作用具有剂量依赖性(P<0.05);薯蓣皂苷高剂量组
塞米松组大鼠肾组织可观察到正常的肾小管。结果 大鼠上述蛋白表达量与地塞米松组比较,差异均无统计
见图1。 学意义(P>0.05)。结果见图2、表4。
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