Page 65 - 《中国药房》2024年11期

表4 各组大鼠卵巢组织中凋亡相关蛋白表达水平比较 巢生理异常；E2水平降低与发情周期异常和多发性囊肿
（x±s，n＝10） 形成有关 。本研究采用 DHEA 诱导 PCOS 大鼠模型，
[10]
组别 Bax/GAPDH Bcl-2/GAPDH Caspase-3/GAPDH 并使用低、中、高剂量的 ERI 进行干预后发现，PCOS 大
正常组 0.47±0.05 0.97±0.10 0.37±0.05
PCOS组 0.95±0.10 a 0.38±0.04 a 0.85±0.09 a 鼠的卵巢多囊特征减轻，闭锁卵泡数量减少，颗粒细胞
ERI低剂量组 0.83±0.09 b 0.52±0.06 b 0.74±0.08 b 层增厚，体重、FPG水平、T水平、LH水平、LH/FSH下降，
ERI中剂量组 0.69±0.08 b 0.79±0.09 b 0.56±0.07 b
ERI高剂量组 0.57±0.06 b 0.91±0.10 b 0.43±0.05 b E2水平升高，这提示ERI能够改善PCOS大鼠肥胖，调节
ERI高剂量+维替泊芬组 0.87±0.09 c 0.43±0.05 c 0.77±0.08 c 性激素水平，减少卵巢组织的多囊特征改变。
a：与正常组比较，P＜0.05；b：与PCOS组比较，P＜0.05；c：与ERI高 颗粒细胞是卵巢的主要组成部分，其凋亡是 PCOS
剂量组比较，P＜0.05。
卵巢储备功能减弱的原因。Bcl-2是抑制细胞凋亡的原
白表达水平均显著降低（P＜0.05）；与PCOS组比较，ERI
[11]
癌基因，Bax 是促凋亡基因 。Caspase-3 是细胞凋亡的
低、中、高剂量组大鼠卵巢组织中 p-LATS1、p-YAP 蛋白
主要执行者，对染色质凝聚、DNA断裂、细胞核和细胞膜
表达水平均显著降低，LATS1、YAP、TAZ 蛋白表达水平
[12]
空泡化至关重要，并与凋亡小体的形成过程有关 。
均显著升高（P＜0.05）；与 ERI 高剂量组比较，ERI 高剂
ERI 已被发现能够通过抑制 Caspase-3 上调和 Bax/Bcl-2
量+维替泊芬组大鼠卵巢组织中p-LATS1、p-YAP蛋白表
平衡中断等途径引发细胞凋亡，进而改善葡萄糖诱导的
达水平均显著升高，LATS1、YAP、TAZ 蛋白表达水平均
[13]
肾小管上皮细胞损伤 。本研究结果发现，经低、中、高
显著降低（P＜0.05）。结果见图4、表5。
剂量 ERI 干预后的 PCOS 大鼠的卵巢组织细胞凋亡减
LATS1 140 kDa
少，细胞凋亡指数和 Bax、Caspase-3 蛋白表达水平均显
p-LATS1 140 kDa 著降低，Bcl-2 蛋白表达水平升高，这提示 ERI 能通过减
YAP 78 kDa 少卵巢组织细胞凋亡，改善大鼠 PCOS。由于颗粒细胞
是影响卵泡发育的关键因素之一，且是组成卵泡的最大
p-YAP 33 kDa
细胞群，而卵泡的数量和质量直接影响卵巢的生命力，
GAPDH 36 kDa
A B C D E F 故本研究推测卵巢组织中凋亡的细胞为颗粒细胞，后期
A：正常组；B：PCOS组；C：ERI低剂量组；D：ERI中剂量组；E：ERI 将对颗粒细胞进行特异性标记，进而确定凋亡的细胞
高剂量组；F：ERI高剂量+维替泊芬组。 类型。
图4 各组大鼠卵巢组织中 Hippo-YAP 信号通路相关
蛋白表达的电泳图 Hippo信号通路通过调节细胞增殖和凋亡来控制器
官发育。Hippo 信号通路激活导致 YAP/TAZ 复合物磷
表5 各组大鼠卵巢组织中 Hippo-YAP 信号通路相关
蛋白表达水平比较（x±s，n＝10） 酸化，使其滞留在细胞质中并最终降解，致使生长促进
[5]
组别 LATS1/GAPDH p-LATS1/GAPDH YAP/GAPDH p-YAP/GAPDH TAZ/GAPDH 基因表达减少，细胞增殖和器官发育被抑制 。已有研
正常组 0.93±0.10 0.38±0.05 0.91±0.10 0.25±0.04 1.07±0.10 究显示，激活 Hippo-YAP 信号通路，可导致雌性小鼠生
PCOS组 0.43±0.05 a 0.95±0.07 a 0.38±0.05 a 0.84±0.05 a 0.35±0.04 a [14]
ERI低剂量组 0.58±0.07 b 0.79±0.08 b 0.55±0.07 b 0.72±0.08 b 0.54±0.06 b 育能力降低 。本研究结果发现，经低、中、高剂量 ERI
ERI中剂量组 0.71±0.08 b 0.57±0.06 b 0.72±0.08 b 0.59±0.07 b 0.70±0.08 b 干预后，PCOS 大鼠卵巢组织中 p-LATS1、p-YAP 蛋白表
ERI高剂量组 0.89±0.10 b 0.42±0.04 b 0.84±0.06 b 0.36±0.04 b 0.98±0.09 b
ERI高剂量+维替泊芬组 0.52±0.05 c 0.89±0.09 c 0.41±0.06 c 0.79±0.08 c 0.44±0.04 c 达水平均显著降低，LATS1、YAP、TAZ 蛋白表达水平均
a：与正常组比较，P＜0.05；b：与PCOS组比较，P＜0.05；c：与ERI高 显著升高，这提示 ERI 能抑制 Hippo-YAP 信号通路激
剂量组比较，P＜0.05。 活，促进卵巢颗粒细胞增殖。为进一步探究ERI通过调
4 讨论 节 Hippo-YAP 信号通路在 PCOS 中的作用，本研究在高
DHEA刺激大鼠模型表现出与人类PCOS相似的卵 剂量 ERI 干预的基础上使用 YAP 抑制剂维替泊芬处理
巢、内分泌和代谢特征，如多囊卵巢、雄激素过多和葡萄 PCOS 大鼠，发现 ERI 对 PCOS 大鼠性激素水平、卵巢组
[9]
糖耐受不良，被广泛应用于 PCOS 的研究 。已有研究 织形态学及细胞凋亡的调节和改善作用被抑制。这进
表明，T水平升高表明雄激素的过度表达，可导致循环高 一步验证了 ERI 可能通过抑制 Hippo-YAP 信号通路在

雄激素血症和激素失衡，进而引发PCOS和体重增加；下 PCOS中发挥改善作用。
丘脑-垂体-性腺轴在调节生殖功能和高雄激素血症中起 综上所述，ERI 能促进 PCOS 大鼠卵巢颗粒细胞增
着至关重要的作用，PCOS 大鼠表现出 LH 水平和 LH/ 殖，调节性激素水平，其作用机制可能与抑制 Hippo-
FSH升高，这表明下丘脑-垂体-性腺轴被破坏，出现了卵 YAP信号通路有关。

中国药房 2024年第35卷第11期 China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 11 · 1343 ·