Page 38 - 《中国药房》2024年11期
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3  cells，  and  improve  symptoms  in  acute  myeloid  leukemia  mice，  the  mechanism  of  which  may  be  associated  with  enhancing  the
          immune function.
          KEYWORDS     Mimosa  pudica  root；  ethyl  acetate  extract；  acute  myeloid  leukemia；  white  blood  cell  differentiation；  immune
          function


              白血病是一类以异常造血细胞恶性增殖、分化受                           仑生物技术有限公司；鼠源分化簇 3（cluster of differen‐
          阻、凋亡受抑并造成正常血细胞减少为特征的疾病，发                            tiation 3，CD3）抗体、鼠源 CD19 抗体、鼠源 CD11b 抗体
          病率在肿瘤疾病中居第 6 位 。其中，急性粒-单核细胞                        （ 批 号 分 别 为 E-AB-F1013D、E-AB-F0986D、E-AB-
                                  [1]
          白血病是由粒细胞和单核细胞系同时发生恶性增生所                             F1081C）均购自武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司；
          导致的急性白血病，其发病人数约占急性髓系白血病                             鼠源 CD107b（即 Mac-3）抗体（批号 108501）购自美国
                                                    [2]
         （acute myeloid leukemia，AML）发病人数的 15% 。该             BioLegend 公司；小鼠白细胞介素 2（interleukin-2，IL-
          病发病诱因多而复杂，且目前的治疗药物价格昂贵、副                            2）、IL-3、干扰素 γ（interferon-γ，IFN-γ）、肿瘤坏死因
          作用大，治疗预后不佳 。                                        子 α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）的酶联免疫吸附
                             [3]
              含羞草根为豆科植物含羞草 Mimosa pudica Linn.                测 定（ELISA）试 剂 盒（批 号 分 别 为 RX203061M、
          的根，主要含有黄酮类、生物碱类成分，具有抗肿瘤、保                           RX203056M、RXSWXQ203097M、RXSWSXQ202412M）
          肝、抗菌等药理作用 。相关研究发现，含羞草根提取物                           均购自广州市睿信生物科技有限公司；5-氟尿嘧啶（5-
                           [4]
          及其不同组分对小鼠腹水癌细胞 S180、人结肠癌细胞                          fluorouracil，5-FU）（批号 MB1273-S）购自大连美仑生物
          HCT-116、人卵巢癌腺癌细胞 OVCAR-8、人 XG 恶性胶                   技术有限公司。
          质瘤细胞SF-295均有不同程度的促凋亡作用                 [4―5] 。本课    1.3 实验动物
          题组前期对含羞草根提取物的不同组分进行体外抗肿                                 本研究所用动物为 SPF 级雄性 BALB/C 小鼠，6～8
          瘤活性筛选后发现，含羞草根乙酸乙酯部位（以下简称“乙                          周龄，体质量19～22 g，购自广东省实验动物中心，动物
          酸乙酯部位”）的抗肿瘤效果较优。基于此，本研究首先                           生产许可证号为SCXK（粤）2022-0002。实验前，小鼠适
          以小鼠急性粒-单核细胞白血病细胞 WEHI-3 为研究对                        应环境1周，然后置于饲养笼中，在12 h光照循环下，自
          象，从体外角度考察乙酸乙酯部位对该细胞增殖的影                             由摄食饮水。所有涉及动物的实验程序均经广东省医
          响；再以WEHI-3细胞构建小鼠AML模型，从体内角度考                        学实验动物中心实验动物伦理委员会批准（伦理编号为
          察乙酸乙酯部位对 AML 动物模型的影响及机制，以期                          D202404-5）。
          为含羞草根在白血病治疗领域中的应用提供理论及实                             1.4 细胞
          验参考。                                                    小鼠急性粒-单核细胞白血病细胞 WEHI-3（货号
          1 材料                                                CTCC-003-0222）购于浙江美森细胞科技公司。细胞用
          1.1 主要仪器                                            含有10%胎牛血清和1%青霉素/链霉素双抗的RPMI1640
              本实验所用主要仪器包括N-4000W型旋转蒸发仪、                       培养基，于 37 ℃、5%CO2无菌恒温培养箱中培养，隔天
          FDU-2110 型真空冷冻干燥机（东京理化器械株式会                         传代1次备用。
          社），INC015 型 CO2恒温细胞培养箱（德国 Memmert 公                 2 方法
          司），Epoch2 型全波长酶标仪（美国 Bio-Tek 公司），KA-                2.1 含羞草根提取物的制备
          100型低速离心机（上海安亭科学仪器有限公司），Cyto‐                           取干燥的含羞草根3 kg，除去杂质，洗净，使用中药
          FLEX型流式细胞仪（美国Beckman Coulter公司），IX73                粉碎机粉碎；以 80% 乙醇（料液比为 1∶10，kg/L）连续加
          型倒置显微镜（日本 Olympus 公司），DYY-6C 型恒压电                   热提取 2 h×3 次，收集并合并提取液；将提取液置于旋
          泳仪（北京六一生物科技有限公司），Chem Studio PLUS                   转蒸发仪中干燥，得浸膏后以纯净水复溶，再以乙酸乙
          型超敏多功能成像仪（德国AJ公司）。                                  酯萃取；将萃取部分置于冷冻干燥机中干燥，得乙酸乙
          1.2 主要药品与试剂                                         酯部位20.96 g，备用。
              含羞草根购自四川瑞芝堂生物科技有限公司，经广                          2.2 细胞增殖活力测定
          东药科大学中药学院中药资源教研室刘基柱副教授鉴                                 将处于对数生长期的 WEHI-3 细胞以 2×10 个/孔
                                                                                                        4
          定为豆科植物含羞草 M. pudica Linn. 的根。RPMI1640               接种于 96 孔板中，于 37 ℃、5%CO2条件下培养 24 h 后，
          培养基、胎牛血清（批号分别为11875093、10099141C）均                  使用不同质量浓度（0.062 5、0.125、0.25、0.5 mg/mL，给
          购自美国Gibco公司；青霉素/链霉素溶液、0.25%胰蛋白                      药浓度根据前期预实验结果设置）的乙酸乙酯部位（另
          酶消化液、磷酸盐缓冲液（PBS）、CCK-8 试剂（批号分别                      设置不加药物只加细胞的空白组）处理细胞 24、48、72
          为PWL062、PWL060、MA0015、MA0218）均购自大连美                 h，每个时间点各组均设置7个复孔。培养结束后，每孔


          · 1316 ·    China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 11                            中国药房  2024年第35卷第11期
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