Page 20 - 《中国药房》2024年11期

基间苯二酚对照品适量，精密称定，置于同一容量瓶中， 峰，其相似度为 0.928～0.996，表明 20 批浮小麦样品相
加入甲醇溶解并定容，制成质量浓度分别为50.0、500.0、 似度良好，化学成分具有一致性。
10.0、26.5、63.0、20.0 μg/mL的混合对照品溶液。
180
2.2.2 定性分析供试品溶液的制备 160 R S20
精密称取浮小麦或小麦粉末（过 80 目筛）约 1.0 g， 140
置于具塞锥形瓶中，精密加入10 mL甲醇，振荡混匀，超 120
声（功率250 W，频率40 kHz）15 min，放冷，称定质量，用 U/mV 100
80
甲醇补足减失的质量，振荡 1 min 混匀，采用 0.45 μm 微 60
孔滤膜滤过，续取滤液，即得。 40
2.2.3 含量测定供试品溶液的制备 20
0 S1
精密称取浮小麦或小麦粉末（过 80 目筛）约 1.0 g， 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
t/min
置于具塞锥形瓶中，精密加入乙酸乙酯 10 mL，振荡摇
图1 20批浮小麦的HPLC指纹图谱和对照指纹图谱R
匀，超声（功率250 W，频率40 kHz）15 min，滤过；滤液用
2.3.3 浮小麦与小麦的共有成分分析
40 ℃氮气吹干，加入4 mL（浮小麦供试品溶液）或2 mL
取 3 批小麦粉末，分别按“2.2.2”项下方法制备定性
（小麦供试品溶液）甲醇复溶，振荡 1 min 混匀，超声（功
分析供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件进样，记录色谱
率 250 W，频率 40 kHz）15 min，采用 0.45 μm 微孔滤膜
图。将所得3批小麦药材的色谱图导入《中药色谱指纹
滤过，续取滤液，即得。
图谱相似度评价系统》（2012 版），以浮小麦对照指纹图
2.3 浮小麦和小麦的HPLC定性分析
谱 R 为参照，生成叠加图谱（图 2）并计算相似度。结果
2.3.1 浮小麦指纹图谱建立的方法学考察
显示，20批浮小麦中的19个共有峰也为小麦所共有，小
（1）精密度试验：取浮小麦药材粉末（S19）约 1.0 g，
麦与浮小麦的相似度为 0.761～0.773，提示小麦与浮小
精密称定，按“2.2.2”项下方法制备定性分析供试品溶
麦样品存在一定差异。
液，按“2.1”项下色谱条件连续进样 6 次，记录色谱图。
以亚油酸峰（峰 3）为参照峰，计算得各共有峰相对保留 180
160
时间的 RSD 均小于 0.15%、相对峰面积的 RSD 均小于 140
2.64%（n＝6），表明该方法精密度良好。 120
（2）稳定性试验：取浮小麦药材粉末（S19）约 1.0 g， U/mV 100
80
精密称定，按“2.2.2”项下方法制备定性分析供试品溶 60 R
40 X3
液，分别于溶液制备后的 0、3、6、9、12、24 h 按“2.1”项下 20 X2
色谱条件进样测定，记录色谱图。以亚油酸峰（峰 3）为 0 X1
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
参照峰，计算得各共有峰相对保留时间的 RSD 均小于 t/min
图2 3 批小麦样品的 HPLC 叠加图谱和浮小麦的对照
0.36%、相对峰面积的 RSD 均小于 3.48%（n＝6），表明
指纹图谱R
24 h内该供试品溶液的稳定性良好。
（3）重复性试验：取浮小麦药材粉末（S19）约 1.0 g， 2.3.4 浮小麦与小麦共有峰的指认
精密称定，按“2.2.2”项下方法平行制备 6 份定性分析供 经与混合对照品溶液图谱（取“2.2.1”项下混合对照
试品溶液，按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图。 品溶液按“2.1”项下色谱条件进样测定所得）进行比对，
以亚油酸峰（峰 3）为参照峰，计算得各共有峰相对保留 从浮小麦与小麦的 19 个共有峰中共指认出了 6 个色谱
时间的 RSD 均小于 0.99%、相对峰面积的 RSD 均小于 峰，分别为亚麻酸（峰2）、亚油酸（峰3）、5-十七烷基间苯
2.96%（n＝6），表明该方法重复性良好。 二酚（峰6）、5-十九烷基间苯二酚（峰11）、5-二十一烷基
2.3.2 浮小麦指纹图谱的建立及相似度评价 间苯二酚（峰14）、5-二十三烷基间苯二酚（峰16）。结果
取20批浮小麦粉末，按“2.2.2”项下方法制备定性分 见图3。
析供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录色 2.3.5 化学模式识别分析
谱图。将所得20批浮小麦药材的色谱图导入《中药色谱 （1）聚类分析（cluster analysis，CA）：以 20 批浮小麦
指纹图谱相似度评价系统》（2012 版），以样品 S19 的图 和3批小麦样品的共有峰峰面积为变量，使用SPSS 26.0
谱为参照图谱，采用中位数法生成对照指纹图谱R，经多 软件进行分析，利用“Z得分”进行数据标准化处理，采用
点校正后进行自动匹配生成指纹图谱（图 1），并计算相 系统聚类方法和平方欧氏距离进行CA，结果见图4。结
似度。结果显示，20 批浮小麦样品共确定了 19 个共有 果显示，当分类距离为15时，23批药材可分为2类：小麦

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