Page 21 - 《中国药房》2024年11期

1.80 有峰峰面积进行标准化处理，再将标准化处理后的数据
导入 SIMCA 14.1 软件，建立 OPLS-DA 模型。结果显
1.50
2
示，模型的验证参数为R X＝0.823，Y矩阵累计解释能力
2
2
AU 1.00 浮小麦S19 参数（R Y）为 0.905，Q ＝0.669，说明所建模型可靠。提
取 OPLS-DA 模型中 19 个共有峰的变量重要性投影
小麦X3
0.50
（variable importance in the projection，VIP）值，见图 6。
混合对照品
0 以 VIP＞1.0 为筛选标准，筛选出 8 个差异成分，依次为
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
t/min 19、1、5、2（亚麻酸）、7、3（亚油酸）、8、18号色谱峰。使用
2：亚麻酸；3：亚油酸；6：5-十七烷基间苯二酚；11：5-十九烷基间苯 GraphPad Prism 9 软件对 2 种样品中 VIP 值排前 3 名的
二酚；14：5-二十一烷基间苯二酚；16：5-二十三烷基间苯二酚。
图3 浮小麦、小麦和混合对照品溶液的HPLC叠加图 差异色谱峰（19、1、5 号色谱峰）的峰面积进行 LSD-t 检
验分析，检验水准α＝0.05。结果显示，浮小麦中19、1、5
聚成一类，浮小麦聚成另一类，说明小麦、浮小麦确实存
号色谱峰的平均峰面积分别为272 933、110 465、72 082，
在差异。当分类距离为 12 时，浮小麦又可以被分为 2
均显著大于小麦样品中对应峰的峰面积（分别为105 617、
类：来自安徽的S3、S6、S7、S11、S12、S17均聚为Ⅱ-b类，
55 048、47 420）（P＜0.05），进一步表明这些色谱峰可能
大部分河北产的浮小麦被聚为Ⅱ-a类，提示安徽的浮小
是浮小麦和小麦的差异成分。
麦质量更加均一、稳定。
聚类距离
0 5 10 15 20 25 1.5
X1
X3
X2 Ⅰ 1.0
S5
S8 VIP值
S14 0.5
S4
S19
S2
S9 Ⅱ-a 0
S7 19 1 5 2 7 3 8 18 14 6 9 4 16 11 13 17 12 10 15
S20 Ⅱ
S15 Ⅱ-b 峰号
S18
S6 图6 浮小麦与小麦19个共有峰的VIP值
S1
S3
S17 2.4 浮小麦和小麦中6种指认成分的含量测定
S11
S12
S13 2.4.1 方法学考察
S10
S16 （1）线性关系考察：分别称取亚麻酸、亚油酸、5-十
图4 20批浮小麦和3批小麦的聚类树状图
七烷基间苯二酚、5-十九烷基间苯二酚、5-二十一烷基间
（2）主成分分析（principal component analysis，PCA）： 苯二酚和 5-二十三烷基间苯二酚对照品 10.03、100.06、
将 20 批浮小麦和 3 批小麦样品的共有峰峰面积导入 1.02、5.30、12.62、4.04 mg，分别置于10 mL容量瓶中，用
SIMCA 14.1 软件，进行 PCA。将数据归一化处理后拟 甲醇溶解并稀释至刻度，制成质量浓度分别为 1.003、
合得到 PCA 模型，结果显示，模型的 X 矩阵累计解释能 10.006、0.102、0.530、1.262、0.404 mg/mL 的单一对照品
2
2
力参数（R X）为 0.818，预测能力参数（Q）为 0.574，说明 溶液。分别精密吸取以上6种单一对照品溶液适量，置
该模型的预测能力良好。图5的PCA得分图结果显示， 于同一 10 mL 容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，配成亚麻
3 批小麦样品的分布较为集中，产地为安徽的浮小麦的 酸、亚油酸、5-十七烷基间苯二酚、5-十九烷基间苯二酚、
分布较为集中，与CA结果基本一致。 5-二十一烷基间苯二酚和5-二十三烷基间苯二酚质量浓
江苏 度分别为 100、1 000、10、53、126、40 μg/mL 的混合对照
河北
4 安徽 品溶液；再用甲醇逐级倍比稀释成系列质量浓度的混合
四川
2
河南 对照品溶液（如亚麻酸的质量浓度分别为 100、50、25、
t[2] 0 山东
山西
－2 小麦 12.5、6.25、3.125 μg/mL），按“2.1”项下色谱条件进行测
－4 定。以对照品的质量浓度（X）为横坐标、峰面积（Y）为纵
－6 坐标进行线性回归，得到各成分的回归方程和线性范
－8 －6 －4 －2 0 2 4 6
t[1] 围，见表2。结果表明，各成分在相应的质量浓度范围内
图5 20批浮小麦和3批小麦的PCA得分图 与其峰面积的线性关系均良好。
（3）正交偏最小二乘法判别分析（orthogonal partial （2）精密度试验：取浮小麦药材粉末（S19）约 1.0 g，
least squares-discriminant analysis，OPLS-DA）：为进一步 精密称定，按“2.2.3”项下方法制备含量测定供试品溶
探究差异性成分，本研究将20批浮小麦和3批小麦的共 液，按“2.1”项下色谱条件连续进样 6 次，记录峰面积。

中国药房 2024年第35卷第11期 China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 11 · 1299 ·