Page 62 - 《中国药房》2024年8期

LVEF in the Model group were significantly reduced （P＜0.05）； LVSD level， myocardial infarction area， collagen volume
fraction， serum levels of BNP and cTn Ⅰ ， the protein expressions of collagen Ⅰ ， collagen Ⅲ ， MMP-2， SphK1 and S1P in
myocardial tissue were significantly increased or enlarged （P＜0.05）. Compared with the Model group， the pathological changes
and degree of fibrosis in the myocardial tissue of rats in each dose group of ALF were improved or relieved， while the quantitative
indicators of rats in the ALF-H group were significantly improved and significantly better than those in ALF-L group （P＜0.05）.
K6PC-5 could significantly reverse the improvement effect of high-dose ALF on the above quantitative indicators in rats （P＜0.05）.
CONCLUSIONS ALF can reduce myocardial fibrosis and improve cardiac function in AMI rats， and the effect may be related to
the inhibition of the SphK1/S1P signaling pathway.
KEYWORDS alfentanil； acute myocardial infarction； myocardial fibrosis； SphK1/S1P signaling pathway

急性心肌梗死（acute myocardial infarction，AMI）是 公司；Vero-2100 型彩色多普勒动物超声诊断仪购自加
由冠状动脉发生急性闭塞而导致相应供血区心肌缺血 拿大Visual Sonics公司；ALC-V8S型小动物呼吸机购自
及坏死的一种临床常见危重型疾病，以起病急、进展迅 上海奥尔科特生物技术有限公司。
速、预后较差为主要特征，是近年来导致患者死亡的主 1.2 主要药品与试剂
要原因之一 [1―2] 。研究指出，AMI 发生后，由心肌缺血、 盐酸阿芬太尼注射液[国药准字 H20203054，批号
供氧不足所导致的心肌细胞坏死和心肌纤维化，是造成 20220105，规格 2 mL∶1 mg（按 C21H32N6O3计）]购自宜昌
患者心功能下降、心力衰竭和死亡的主要原因 [3―4] 。目 人福药业有限责任公司；SphK1 激活剂 K6PC-5 对照品
前，AMI 的临床治疗以经皮冠状动脉介入治疗、药物溶 （批号 205632，纯度≥98%）购自美国 MedChemExpress
栓等为主，但恢复再灌注所引发的心肌缺血/再灌注损伤 公司；苏木精-伊红（HE）染色试剂盒、2，3，5-氯代三苯基
会严重影响患者预后，且AMI所导致的心肌纤维化也会 氯化四氮唑（2，3，5-triphenyl tetrazolium chloride，TTC）
[3]
对心脏功能造成损害，甚至可导致患者死亡 。因此，开 染色试剂盒均购自上海碧云天生物技术有限公司；Mas‐
发AMI新型治疗药物以改善心肌纤维化，对改善AMI患 son 染色试剂盒购自福州迈新生物技术开发有限公司；
者预后、保护患者心脏功能具有重要意义。 心肌肌钙蛋白Ⅰ（cardiac troponin Ⅰ，cTnⅠ）、脑钠肽
阿芬太尼（alfentanil，ALF）是一种短效镇痛药，主要 （brain natriuretic peptide，BNP）酶 联 免 疫 吸 附 测 定
作用于μ阿片受体，可用于手术麻醉和重症监护室患者 （ELISA）试剂盒均购自北京博奥森生物科技有限公
[5]
的镇静、镇痛 。近年来有研究发现，ALF可有效改善缺 司；兔源Ⅰ型胶原蛋白（collagen Ⅰ）、collagen Ⅲ、基质
血/再灌注损伤非糖尿病患者的心脏功能，抑制其心肌细 金 属 蛋 白 酶 2（matrix metalloproteinase-2，MMP-2）、
胞凋亡，缩小心肌梗死面积，减轻氧化应激反应，具有一 SphK1、S1P、甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）单克隆
[6]
定的心脏保护作用 。鞘氨醇激酶 1（sphingosine kinase 抗体和辣根过氧化物酶标记的羊抗兔 IgG 二抗（货号
1，SphK1）/1-磷酸鞘氨醇（sphingosine 1-phosphate，S1P） 分 别 为 72026S、81375S、40994S、12071S、4060S、
信号通路能通过与多种细胞作用来参与纤维化和炎症 2118S、2729S）均 购 自 美 国 Cell Signaling Technology
反应的发生，其主要作用机制包括改变血管通透性、减 公司。

少炎症细胞浸润、抑制成纤维细胞和肌成纤维细胞增殖 1.3 实验动物
和生长等 [7―9] 。可见，该信号通路可能与 AMI 患者的心 SPF级雄性SD大鼠75只，体重200～220 g，购自华
肌纤维化进程有关。基于此，本研究拟通过左冠状动脉 中科技大学动物实验中心[动物生产许可证号 SCXK
前降支结扎法构建 AMI 大鼠模型，探究 ALF 对 AMI 大 （鄂）2021-0009]。所有大鼠均饲养在 SPF 级动物房（温
鼠心肌纤维化的影响和对 SphK1/S1P 信号通路的调节 度21～25 ℃，相对湿度45%～60%，光照/黑暗每12 h循
作用，以期为改善AMI患者心肌纤维化和心脏功能的相 环）内，自由摄食、饮水，适应性饲养 1 周后开始后续实
关药物开发提供参考。 验。本研究方案经本院动物伦理委员会审核批准（批件
1 材料 号20220403512），符合动物实验3R原则。
1.1 主要仪器 2 方法
RT-6100型酶标仪购自深圳雷杜生命科学股份有限 2.1 AMI动物模型的构建
[8]
公司；Gel Doc EZ型凝胶成像仪购自美国Bio-Rad公司； 参考相关文献 方法，采用左冠状动脉前降支结扎
BL-A420 型动物心电图机购自上海精密科学仪器有限 法构建 AMI 大鼠模型：所有大鼠腹腔注射 1% 戊巴比妥

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