Page 28 - 《中国药房》2024年7期
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1 材料                                                    70                 盐酸小檗碱
                                                                  60
          1.1 主要仪器                                                50
              1260 Infinity Ⅱ型高效液相色谱（HPLC）仪购自美                   mAU  40
                                                                  30
                                                                  20
          国Agilent公司；BT25S型分析天平购自德国Sartorius公                     10
                                                                   0
          司；KQ-500VDE 型双频数控超声波清洗仪购自昆山市                                1         2          3        4       5       6          7        8           9        10        11      12       13       14       15
                                                                                       t/min
          超声仪器有限公司；T6型紫外可见分光光度计购自北京                                             A.盐酸小檗碱对照品贮备液
          普析通用仪器有限责任公司；SPX-150F 型生化培养箱                            40                 盐酸小檗碱
                                                                  35
          购自上海龙跃仪器设备有限公司；Direct-Q 5 型超纯水                          30
                                                                  25
          机购自美国Millipore公司。                                      mAU  20
                                                                  15
                                                                  10
          1.2 主要药物与试剂                                             5
                                                                  0
              苦参饮片（批号220901）、黄柏饮片（批号221025）均                          1         2          3        4       5       6          7        8           9        10        11      12       13       14       15
                                                                                       t/min
          由江西江中中药饮片有限公司提供；盐酸小檗碱（批号                                                  B.供试品溶液
          110713-202015，纯 度 86.7%）、苦 参 碱（批 号 110805-            图1 盐酸小檗碱对照品和供试品溶液的HPLC图
          201808，纯度99.8%）、氧化苦参碱（批号110806-202212，              得回归方程为Y＝18.365X－46.923（R ＝0.999 9）。结果
                                                                                              2
          纯度98.8%）对照品均购自中国食品药品检定研究院；芦                         表 明 ，盐 酸 小 檗 碱 的 检 测 质 量 浓 度 在 7.06～226.00
          丁对照品（批号 23011002，纯度 99.98%）购自成都普菲                   μg/mL范围内与峰面积成良好的线性关系。
          德生物技术有限公司。                                          2.1.6 精密度试验
          2 方法与结果                                                 取盐酸小檗碱对照品贮备液，按“2.1.1”项下色谱条
          2.1 苦参-黄柏提取液中盐酸小檗碱含量测定方法的                           件连续进样测定6次，计算峰面积。结果显示，盐酸小檗
          建立                                                  碱峰面积的RSD为0.38%（n＝6），表明仪器精密度良好。
          2.1.1 色谱条件                                          2.1.7 重复性试验
              采用 Waters XBridge C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，             按“2.1.3”项下方法平行制备 6 份供试品溶液，按
          5 μm）；流动相为乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液（用三                  “2.1.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积，以外标法
          乙胺调 pH 至 6.2 左右）（30∶70，V/V）；流速为 1 mL/min；           计算盐酸小檗碱的含量。结果显示，盐酸小檗碱的平均
          柱温为30 ℃；检测波长为265 nm；进样量为5 μL。                       含量为48.56 mg/g，RSD为0.78%（n＝6），表明该方法重
          2.1.2 盐酸小檗碱对照品贮备液的制备                                复性良好。
              精密称取盐酸小檗碱对照品 0.002 26 g 至容量瓶                    2.1.8 稳定性试验
          中，加流动相溶解并稀释，制成质量浓度为226.00 μg/mL                         取同一供试品溶液，分别于制备后 0、4、8、12、24、
          的盐酸小檗碱对照品贮备液。                                       48 h按“2.1.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。结
          2.1.3 供试品溶液的制备                                      果显示，盐酸小檗碱峰面积的 RSD 为 1.17%（n＝6），表
              按1∶1（m/m）处方配比称取苦参、黄柏饮片（两药质                      明供试品溶液在制备后48 h内稳定性良好。
          量比参照“诸疮一扫光”方），加入10倍量60%乙醇浸泡                         2.1.9 加样回收率试验
          30 min后提取2次，每次90 min，得苦参-黄柏提取液；精                        取已知盐酸小檗碱含量的苦参-黄柏提取液6份，每
          密吸取苦参-黄柏提取液 200 μL 至 10 mL 量瓶中，加流                   份1 mL，按1∶1（m/m）精密加入盐酸小檗碱对照品溶液，
          动相稀释至刻度，即得供试品溶液。                                    按“2.1.3”项下方法制备加样回收的供试品溶液，再按
          2.1.4 系统适用性考察                                      “2.1.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积，计算加样
              分别取盐酸小檗碱对照品贮备液和“2.1.3”项下供                       回收率。结果显示，盐酸小檗碱的平均加样回收率为
          试品溶液，按“2.1.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱                        99.77%，RSD为2.63%（n＝6），表明该方法准确度良好。
          图（图1）。结果显示，盐酸小檗碱的分离度、灵敏度及理                          2.2 苦参-黄柏提取液中苦参碱和氧化苦参碱含量测定
          论板数均符合要求。                                           方法的建立
          2.1.5 线性关系考察                                        2.2.1 色谱条件
              精密吸取盐酸小檗碱对照品贮备液（质量浓度为                               采用 Waters XBridge C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，
          226.00 μg/mL），加流动相稀释制成质量浓度分别为                       5 μm）；流动相为乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液（用三
          113.00、56.50、28.25、14.13、7.06 μg/mL 的系列对照品溶         乙胺调 pH 至 6.2 左右）（10∶90，V/V）；流速为 1 mL/min；
          液，按“2.1.1”项下色谱条件进样测定并进行线性回归，                        柱温为30 ℃；检测波长为220 nm；进样量为10 μL。


          · 794 ·    China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 7                               中国药房  2024年第35卷第7期
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