Page 29 - 《中国药房》2024年7期

2.2.2 苦参碱、氧化苦参碱对照品贮备液的制备 氧化苦参碱的回归方程为 Y＝7.008 1X+8.620 0（R ＝
2
精密称取苦参碱对照品 0.010 02 g、氧化苦参碱对 0.999 9）。结果表明，苦参碱、氧化苦参碱的检测质量浓
照品 0.010 13 g，分别置于 10 mL 量瓶中，加流动相超声 度分别在 3.91～501.00、7.91～506.50 μg/mL 范围内与
（功率 500 W，频率 45 kHz）溶解并定容，即得质量浓度 各自峰面积成良好的线性关系。
分别为 1.002 mg/mL 的苦参碱对照品贮备液和 1.013 2.2.6 精密度试验
mg/mL的氧化苦参碱对照品贮备液。 取苦参碱、氧化苦参碱对照品贮备液，分别按“2.2.1”
2.2.3 供试品溶液的制备 项下色谱条件连续进样测定6次，计算峰面积。结果显

精密吸取“2.1.3”项下苦参-黄柏提取液2 mL至蒸发 示，氧化苦参碱峰面积的 RSD 为 0.63%（n＝6），苦参碱
皿中，水浴蒸干后，残渣加10 mL水洗至分液漏斗中，用 峰面积的RSD为0.81%（n＝6），表明仪器精密度良好。
三氯甲烷萃取3次，每次15 mL；分取下层液，蒸干，残渣 2.2.7 重复性试验
加流动相溶解并定容至10 mL，即得供试品溶液。 按“2.2.3”项下方法平行制备 6 份供试品溶液，按
2.2.4 系统适用性考察 “2.2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积，以外标法
取“2.2.2”项下 2 种对照品贮备液、“2.2.3”项下供试 计算氧化苦参碱、苦参碱的含量。结果显示，氧化苦参
品溶液，按“2.2.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图 碱的平均含量为 8.28 mg/g，RSD 为 1.93%（n＝6）；苦参
（图 2）。结果显示，苦参碱、氧化苦参碱的分离度、灵敏 碱的平均含量为 2.22 mg/g，RSD 为 2.32%（n＝6），表明
度及理论板数均符合要求。 该方法重复性良好。
550 氧化苦参碱 2.2.8 稳定性试验
500
450
400 取同一供试品溶液，分别于制备后 0、4、8、12、24、
350
mAU 300 48 h按“2.2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。结
250
200
150
100
50 果显示，氧化苦参碱峰面积的 RSD 为 1.13%（n＝6），苦
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 参碱峰面积的RSD为0.64%（n＝6），表明供试品溶液在
t/min
A.氧化苦参碱对照品贮备液 制备后48 h内稳定性良好。
80 苦参碱 2.2.9 加样回收率试验
70
60
50 取氧化苦参碱、苦参碱含量已知的苦参-黄柏提取
mAU 40
30 液6份，每份1 mL，按1∶1（m/m）分别精密加入氧化苦参
20
10 碱和苦参碱对照品溶液，再按“2.2.1”项下色谱条件进样
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 测定，记录峰面积并计算加样回收率。结果显示，氧化
t/min
B.苦参碱对照品贮备液 苦参碱的平均加样回收率为97.71%，RSD为1.33%（n＝
200 氧化苦参碱 6）；苦参碱的平均加样回收率为 98.63%，RSD 为 1.91%
180
160
140 （n＝6），表明该方法准确度良好。
mAU 120
100
80
60 2.3 苦参-黄柏提取液中总黄酮含量测定方法的建立
40 苦参碱
20 2.3.1 芦丁对照品贮备液的制备
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
t/min 精密称取芦丁对照品 0.003 67 g，加 70% 乙醇溶解
C.供试品溶液 并定容至 10 mL，即得质量浓度为 0.367 mg/mL 的芦丁
图2 氧化苦参碱、苦参碱对照品和供试品溶液的 对照品贮备液。
HPLC图 2.3.2 供试品溶液的制备
2.2.5 线性关系考察 精密吸取“2.1.3”项下苦参-黄柏提取液0.5 mL至10
精密吸取“2.2.2”项下 2 种对照品贮备液，分别加流 mL 量瓶中，加入 5%NaNO2 溶液 0.4 mL，摇匀，静置 6
动相逐级稀释至苦参碱质量浓度为 501.00、250.50、 min 后加入 10%Al（NO3 ） 3溶液 0.4 mL，摇匀，静置 6 min
125.25、62.63、31.31、15.66、7.83、3.91 μg/mL，氧化苦参 后再加入 4%NaOH 溶液 4 mL，用 70% 乙醇定容，摇匀，
碱 质 量 浓 度 为 506.50、253.25、126.63、63.31、31.66、 静置15 min待反应显色后作为供试品溶液，待用。
15.83、7.91 μg/mL 的系列对照品溶液，分别按“2.2.1”项 2.3.3 线性关系考察
下色谱条件进样测定，记录峰面积并进行线性回归，得 精密吸取芦丁对照品贮备液 0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、
2
苦参碱的回归方程为Y＝5.614 7X+2.715 6（R ＝0.999 9）、 1.6、1.8 mL，分别置于10 mL量瓶中，按“2.3.2”项下方法

中国药房 2024年第35卷第7期 China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 7 · 795 ·