Page 55 - 《中国药房》2024年5期

difference between QAMS method and ESM （RSD＜3.00%）. CONCLUSIONS Emodin， frangulin A， pleuropyrone A and emodin-
8-O-β-D-glucoside are isolated from V. leiocarpa； among them， the last three components are all isolated from for the first time.
The established HPLC-QAMS method is accurate and reliable for the determination of 4 components in V. leiocarpa， and can used for
quality control of V. leiocarpa.
KEYWORDS Ventilago leiocarpa； chemical component； quantitative analysis of multi-components by single-marker； emodin-8-
O-β-D-glucoside； frangulin A； pleuropyrone A； emodin； quality control

紫九牛是中国传统的瑶药之一，来源于鼠李科植物 1.2 主要药品与试剂

翼核果Ventilago leiocarpa Benth.的干燥根和根茎，主要 实验用 10 批紫九牛药材分别购自广西玉林（编
分布于中国广东、广西和云南等地区。其别名为血风 号 S1～S6，批 号 依 次 为 20221025131、20221025081、
藤、红穿破石、铁牛入石等，始载于《广西中草药》，是一 20221025101、20221025132、20221025133、20221025102）
味性温、味甘的药材，属瑶医所谓的“风药”，具有补气 和安徽亳州（编号 S7～S10，批号依次为 20221025082、
[1]
血、强筋骨、舒筋络等功效 ，主要用于治疗气血虚弱、月 20221024231、20221024232、20220510111），经广西壮族
经不调、血虚经闭、风湿疼痛、跌打损伤、腰肌劳损、四肢 自治区中医药研究院陆国寿主任药师鉴定均为鼠李科
麻木等症状。其主要活性成分有蒽醌、萘醌、黄酮及其 植物翼核果V. leiocarpa Benth.的干燥根茎。
相应的糖苷类化合物。 大黄素对照品（批号110756-201913，纯度≥98%）购
目前已发表的关于紫九牛的质量控制研究大多是 自中国食品药品检定研究院；大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷
[4]
单个成分的含量测定 [2―3] 和指纹图谱研究 ，对紫九牛药 对照品（批号220428，纯度≥98%）购自成都植标化纯生
材的化学成分及质量控制研究相对薄弱。有研究证明， 物技术有限公司；HPLC 用甲醇、乙腈均为色谱纯，水为
[5]
pleuropyrone A具有保肝等作用 ，大黄素及其衍生物欧 娃哈哈纯净水，其余试剂均为分析纯。
鼠李苷A、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷等蒽醌类成分也具 2 方法与结果
有一定的抗炎、抗氧化和抗肿瘤等药效作用 [6―9] ，这可能 2.1 紫九牛中4种化学成分的提取分离与结构鉴定
与紫九牛的药理作用 [1，10] 存在一定的相关性。因此，本 2.1.1 提取分离

研究拟采用溶剂萃取法、色谱技术对上述4种成分进行 取紫九牛药材粗粉5 kg，加50%乙醇回流提取3次，
分离、纯化，并测定其含量。但pleuropyrone A和欧鼠李 每次1.5 h，浓缩，得浸膏。取浸膏过聚酰胺柱，依次用水
苷 A 2 种成分的对照品成本较高，不易购买。一测多评 和 20%、40%、60% 乙醇洗脱，分别浓缩，得 20% 乙醇洗
（quantitative analysis of multi-components by single- 脱物 82.6 g、40% 乙醇洗脱物 285.4 g、60% 乙醇洗脱物
marker，QAMS）法使用单一的对照品就可以同时进行多 42.7 g。取 40% 乙醇洗脱物加水适量使分散混悬均匀，
[11]
种成分的含量测定 。因此，本研究以大黄素为内参 依次用乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取，分别得乙酸乙酯、
物，建立该成分与其他 3 种化学成分的相对校正因子 水饱和正丁醇萃取部分15.6、1.87 g；取乙酸乙酯萃取部
（fi/s ），采用 QAMS 法对紫九牛进行含量测定研究，以期 分，经硅胶层析柱分离，依次用氯仿-甲醇（100∶0→95∶5→
达到降低实验成本、节约实验时间的目的，同时为该药 90∶10→80∶20，V/V）洗脱，经薄层色谱检测，合并相同组
材的质量控制提供参考依据。 分，再经反复硅胶层析柱色谱分离，得到化合物 11。取
1 材料 40%乙醇洗脱物经水饱和正丁醇萃取后的水层部分，经
1.1 主要仪器 硅胶层析柱分离，依次用乙酸乙酯-乙酸甲酯（80∶20→

本研究所用的主要仪器有 e2695 型高效液相色谱 16∶5→127∶48→29∶13→69∶56→10∶10，V/V）洗脱，经薄
（HPLC）仪、2489 制备型 HPLC 仪（美国 Waters 公司）， 层色谱检测，合并相同组分，再经反复硅胶层析柱色谱
1260 Infinity Ⅱ型 HPLC 仪（美国 Agilent 公司），XS-205 分离，得到化合物22、33；取水饱和正丁醇萃取后的水层部
型十万分之一电子天平（瑞士 Mettler Toledo 公司），KS- 分，经硅胶柱层析分离得到的部分馏分再经制备型
3200DE 型液晶超声波清洗器（昆山洁力美超声仪器有 HPLC分离，得到化合物44。
限公司），ZF-2 型三用紫外仪（上海安亭电子仪器厂）， 2.1.2 结构鉴定
HH-S2 型数显恒温水浴锅（江苏金怡仪器科技有限 根据化合物的波谱数据及薄层色谱技术，鉴定得出
公司）。 化合物 11、22、33、44 分别为大黄素、欧鼠李苷 A、pleuropy‐

中国药房 2024年第35卷第5期 China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 5 · 561 ·