Page 50 - 《中国药房》2024年5期

TNF-α and IL-6 and the phosphorylation levels of p38 MAPK and NF-κB p65 protein were all increased significantly （P＜0.05 or
P＜0.01）. Compared with the model group， the pathological symptoms of renal tissue in rats had been improved to varying degrees
in different dose groups of PAP； the contents of uric acid， Cr， BUN and XOD， protein expressions of MCP-1， TNF-α and IL-6，
the phosphorylation levels of p38 MAPK and NF-κB p65 protein in PAP high-dose and PAP medium-dose groups were all decreased
significantly （P＜0.05 or P＜0.01）. CONCLUSIONS PAP exhibits an anti-GN effect， the mechanism of which may be associated
with inhibiting the p38 MAPK/NF-κB/TNF-α signaling pathway.
KEYWORDS Phellodendron amurense polysaccharides； gouty nephropathy； inflammatory factors； p38 mitogen-activated protein

kinase； nuclear factor-κB； tumor necrosis factor-α

痛风性肾病（gouty nephropathy，GN）又称尿酸性肾 高新技术产业开发区湘仪离心机仪器有限公司），
病，是由于血尿酸产生过多或排泄减少形成高尿酸血症 DM750 型生物显微镜（德国 Leica 公司），ABS 型酶标仪
所致的肾损害。GN 的临床表现为尿酸结石、小分子蛋 [美谷分子仪器（上海）有限公司]，DYY-6C型电泳仪（北
白尿、尿酸升高及肾小管功能损害等，给患者带来极大 京六一仪器厂）。
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痛苦 。西医常用别嘌醇（allopurinol，AP）、苯溴马隆、秋 1.2 主要药品与试剂
水仙碱等治疗GN，但这些药物具有很强的副作用，主要 关黄柏药材（批号2111001）购自佳木斯市宜顺康医
表现为发热、肝毒性、脱发等 [2―3] 。因此，研究开发出安 药大药房，性状及外观符合2020年版《中国药典》（一部）
全有效、副作用小的抗GN药物有着重要意义。 规定，经佳木斯大学药学院王丽红教授鉴定为芸香科植
关黄柏为芸香科植物黄檗 Phellodendron amurense 物黄檗P.amurense Rupr.的干燥树皮，标本保存于佳木斯
Rupr. 的干燥树皮，其性寒，味苦，归肾、膀胱经，具有清 大学药学院（标本号为103080201230821）。
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热燥湿、泻火除蒸、解毒疗疮之功效 。关黄柏常用于湿 甘 露 糖（批 号 D0651Z01504）、鼠 李 糖（批 号
热泻痢、黄疸尿赤、热淋涩痛、疮疡肿毒，其药性与中医 O27GS165538）、葡萄糖醛酸（批号 R09J11H115178）、半
清热解毒、祛风除痹、利水除湿的治疗理念相符，是治疗 乳 糖 醛 酸（批 号 K07J12B133073）、葡 萄 糖（批 号
GN的理想药材。关黄柏主要含有生物碱类、内酯类、酚 S22J12H137237）、半乳糖（批号Z22J9H64187）、木糖（批
酸类、萜类、香豆素类、多糖类等化学成分，其中关黄柏 号D17N9S74410）、阿拉伯糖（批号Z23D11H135480）、岩
多糖（P.amurense polysaccharides，PAP）被证实具有抗炎 藻糖（批号 M15HB178211）标准品及木瓜蛋白酶（批号
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作用，可降低大鼠血清炎症细胞因子水平 。而GN的发 N08GS166292）均购自上海源叶生物科技有限公司；氧
展与炎症反应息息相关，其发生机制可能为丝裂原激活 嗪酸钾（批号 P137112）、腺嘌呤（批号 A108804）购自上
蛋白激酶 p38（p38 mitogen-activated protein kinase，p38 海阿拉丁生化科技股份有限公司；别嘌醇片（批号
MAPK）被激活，进而激活核因子 κB（nuclear factor-κB， 1220010，规格 0.1 g）购自广州白云山医药集团有限公
NF-κB），刺激单核细胞趋化蛋白 1（monocyte chemoat‐ 司、苏木精-伊红（HE）染液购自武汉塞维尔生物科技有
tractant protein-1，MCP-1）的形成，促使肿瘤坏死因子 α 限公司；尿酸、肌酐（creatinine，Cr）、血尿素氮（blood
（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素6（interleu‐ urea nitrogen，BUN）、黄嘌呤氧化酶（xanthine oxidase，
kin-6，IL-6）等炎症细胞因子分泌，最终导致肾小管萎 XOD）试剂盒（批号分别为C012-1-1、C011-2-1、C013-2-1、
缩、间质纤维化等 。鉴于此，本研究以 PAP 为研究对 A002-1-1）均购自南京建成生物工程研究所；鼠源 p38
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象，对其抗 GN 作用进行探讨，并围绕 p38 MAPK/NF- MAPK多克隆抗体购自武汉博欧特生物科技有限公司；
κB/TNF-α 信号通路，初步探索其可能的作用机制，为 鼠源磷酸化 p38 MAPK（p-p38 MAPK）多克隆抗体购自
PAP抗GN的深入研究奠定基础。 武汉三鹰生物技术有限公司；兔源 NF-κB p65、磷酸化
1 材料 NF-κB p65（p-NF-κB p65）多克隆抗体均购自深圳市豪
1.1 主要仪器 地华拓生物科技有限公司；兔源 MCP-1、TNF-α、IL-6 多
本研究所用的主要仪器有：FA-2004型电子天平（上 克隆抗体均购自英国Abcam公司；兔源甘油醛-3-磷酸脱
海舜宇恒平科学仪器有限公司），RE-2000A型旋转蒸发 氢酶（GAPDH）单克隆抗体购自碧云天生物技术有限公
仪（上海亚荣生化仪器厂），DL-5-B型高速离心机（上海 司；辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔免疫球蛋白G二抗
安亭科学仪器厂），FDU-1200 型冷冻干燥机、765 型紫 购自美国Jackson公司；三氯甲烷、乙腈、甲醇为色谱纯，
外-可见分光光度计（上海仪电分析仪器有限公司）， 其余试剂均为分析纯，水为实验室自制双蒸水。
VERTEX-70 型红外光谱仪（德国 Bruker 公司），Prox 型 1.3 动物
扫描电镜（荷兰 Phenom 公司），1260Ⅱ型高效液相色谱 本研究所用动物为健康 SPF 级雄性 SD 大鼠，共 60
仪（美国Agilent公司），H1650R型高速冷冻离心机（长沙 只，体重约 200 g，6～8 周龄，购于辽宁长生生物技术股

· 556 · China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 5 中国药房 2024年第35卷第5期