Page 87 - 《中国药房》2024年4期

析法（linear discriminant analysis effect size，LEfSe）分析 数和Shannon指数表征丰度和多样性。X射线照射后第
在丰度上有显著差异的物种。 7天，正常对照组、模型组和氨磷汀组小鼠肠道菌群丰度
2.4 统计学方法 和多样性无显著差异（图 2B、C）。β 多样性能反映不同
采用SPSS 19.0软件对数据进行统计分析。外周血 组间的菌群多样性，主要用于比较样本的组间差异。
象检测数据用单因素方差分析比较组间差异，存在组间 PCoA结果显示，正常对照组和模型组分离良好，PCoA1
差异的时间点采用LSD-t检验进行两两比较。检验水准 轴解释度为 22.4%，PCoA2 轴解释度为 17.0%（图 2D）。
α＝0.05。采用R语言绘制小鼠肠道菌群在门、属分类水 与正常对照组比较，模型组小鼠肠道微生物结构发生了
平的群落结构热图。采用Pearson检验进行相关性分析。 明显变化，说明辐射显著改变了小鼠的肠道微生物结
3 结果 构。氨磷汀组也与模型组产生分离，说明氨磷汀能改变
3.1 氨磷汀对小鼠外周血象的影响 辐射引起的肠道菌群结构改变。
各组小鼠经 4 Gy X 射线全身照射后，14 d 内无死
正常对照组 模型组 600
亡。与正常对照组小鼠比较，模型组和氨磷汀组小鼠外
320 100 283 500
周血中白细胞计数在X射线照射后第1天急剧下降至最
283 Chao1
低，第 4 天时逐渐恢复；氨磷汀组在照射后第 1、4、7、10 99 178 400
天均显著高于模型组（P＜0.05 或 P＜0.01，图 1A）。模 366 300
正常对 模型组 氨磷
型组和氨磷汀组小鼠照射后血小板计数均先下降，并于 氨磷汀组 照组 汀组
第 10 天降至最低，但氨磷汀组显著高于模型组（P＜ A. OTUs分布韦恩图 B. Chao1指数
0.05）；随后两组小鼠血小板数逐渐升高（图 1B）。模型 0.2 正常对照组
模型组
5.0 氨磷汀组
组小鼠红细胞计数从照射后第1天开始逐步下降，而氨 4.5 0.1
磷汀组则在照射后第1天轻微升高，且显著高于模型组 Shannon PCoA2[17.0%] －0.1 0
（P＜0.05），随后逐渐降低；模型组和氨磷汀组小鼠红细 4.0 －0.2
胞计数在14 d观察期内未见恢复（图1C）。
正常对 模型组 氨磷 －0.2 －0.1 0 0.1 0.2
照组 汀组 PCoA1[22.4%]
10 1 600
b 1 400 正常对照组 C. Shannon指数 D. PCoA
模型组
（ ×10 9 L －1 ） 6 b （ ×10 9 L －1 ） 1 200 图2 各组小鼠肠道菌群 OTUs 数量及 α/β 多样性分析
氨磷汀组
8
1 000
结果（n＝3）
800
白细胞/ 4 2 a b 正常对照组 血小板/ 600 a 3.2.2 不同水平的肠道菌群物种组成分析
400
模型组
氨磷汀组 200
0 0 在门水平上，拟杆菌门 Bacteroidetes、厚壁菌门 Fir‐
0 2 4 6 8 10 12 14 16 0 2 4 6 8 10 12 14 16
照射后时间/d 照射后时间/d micutes、放线菌门 Actinobacteria 和变形菌门 Proteobac‐
A.白细胞计数 B.血小板计数
teria是优势菌门。与正常对照组比较，模型组拟杆菌门
12 a
（ ×10 12 L －1 ） 8 6 Bacteroidetes相对丰度降低，厚壁菌门Firmicutes相对丰
10
度增加，拟杆菌门Bacteroidetes与厚壁菌门Firmicutes相
红细胞/ 4 2 正常对照组 对丰度（B/F）比值降低。与模型组比较，氨磷汀组拟杆
模型组
氨磷汀组 菌门Bacteroidetes相对丰度增加，厚壁菌门Firmicutes相
0
0 2 4 6 8 10 12 14 16 对丰度降低，B/F比值增加，且二者相对丰度与正常对照
照射后时间/d
C.红细胞计数 组相对丰度接近（图3A）。
a：与模型组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.01。 在属水平上，正常对照组占比最高的 5 种菌属分别
图1 各组小鼠外周血象变化（n＝10） 为巴恩斯氏菌属Barnesiella（27.74%）、链球菌属Strepto‐
3.2 氨磷汀对小鼠肠道菌群的影响 coccus（12.61%）、普雷沃菌属Prevotella（5.42%）、韦荣氏
3.2.1 各组小鼠高通量测序数据统计及α/β多样性分析 球 菌 属 Veillonella（4.97%）和 乳 杆 菌 属 Lactobacillus
经高通量测序分析，3组样本共获得有效序列25 764～ （2.52%）；模 型 组 分 别 为 巴 恩 斯 氏 菌 属 Barnesiella
379 035 条，采用稀疏方法对每组样本测序数据量进行 （30.41%）、链球菌属 Streptococcus（11.86%）、异芽孢杆
抽平，抽平后数据量为25 735条序列。对所有抽平后数 菌 属 Allobaculum（8.14%）、韦 荣 氏 球 菌 属 Veillonella
据进行 OTUs 聚类，共获得 15 个门、24 个纲、42 个目、97 （3.99%）和普雷沃菌属 Prevotella（1.77%）；氨磷汀组分
个科、209 个属、386 个种的菌群信息。3 组共有 OTUs 别为巴恩斯氏菌属 Barnesiella（40.49%）、乳杆菌属 Lac‐
1 629 个，正常对照组、模型组和氨磷汀组独有的 OTUs tobacillus（7.25%）、链球菌属Streptococcus（4.57%）、异芽
分别为 320、283、366 个（图 2A）。α 多样性可反映样品 孢杆菌属 Allobaculum（3.46%）和韦荣氏球菌属 Veillo-
内微生物菌群的丰度和多样性，本研究分别用Chao1指 nella（1.83%）（图3B）。

中国药房 2024年第35卷第4期 China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 4 · 461 ·