Page 65 - 《中国药房》2024年4期
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心血管疾病是导致全球死亡和疾病负担的最主要                          HRP）标记的山羊抗兔二抗、蛋白激酶 B（又称 Akt）抗
          原因之一。我国心血管病患病率仍处于持续上升阶段，                           体、HRP 标记的驴抗山羊二抗、甘油醛-3-磷酸脱氢酶
                                                  [1]
          其中缺血性心脏病是导致死亡的主要原因之一 。临床                          （glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）抗
          上急性心肌缺血的首选治疗策略为及时采取溶栓或介                            体、HRP标记的山羊抗大鼠二抗、B淋巴细胞瘤2（B-cell

          入等再灌注手段快速恢复冠脉血流，但再灌注也容易造                           lymphoma-2，Bcl-2）相关 X 蛋白（Bcl-2 associated X pro‐
          成心肌的二次损伤，即心肌缺血再灌注损伤（myocardial                     tein，Bax）抗体、HRP标记的山羊抗小鼠二抗、TUNEL检
          ischemia-reperfusion injury，MIRI）。                 测 试 剂 盒 、DAB 显 色 剂 、抗 原 修 复 液（货 号 分 别 为
              蒙医学认为，心肌缺血引起的心肌梗死、心绞痛等                         GB23303、GB11689、GB23404、GB12002、GB23302、
          冠心病均属于蒙医学“心刺痛”范畴，其蒙医病名为“朱                          GB11690、GB23301、GDP1041、G2111、G1202）均购自武
          日很·哈特勒嘎”，通过镇心“赫依”、改善血液“赫依与其                        汉赛维尔生物科技有限公司；Bcl-2 抗体（货号 BF9103）
          苏”运行，可使病情发展得到控制 。匝迪-5味丸是蒙医                         购自江苏亲科生物研究中心有限公司；胱天蛋白酶 3
                                      [2]
          临床常用的经典复方，主治心律失常、心肌梗死、心绞痛                         （caspase-3）抗体（货号66470-2-Ig）购自武汉三鹰生物技
                         [3]
          等病症，疗效显著 。该方出自蒙医经典著作《高氏梅林                          术有限公司。
          方》，由肉豆蔻50 g，木香、土木香各40 g，广枣25 g，荜茇                  1.3 动物
          5 g配伍而成，具有镇心、养心、安神的功效，主治心烦失                            8 周龄 SPF 级 SD 雄性大鼠 72 只，体重（200±20）g，
                                         [4]
          眠、心神不安、心悸、胸闷气喘等病症 。已有研究发现，                         购自北京维通利华实验动物技术有限公司，实验动物生
          匝迪-5 味丸可降低 MIRI 模型大鼠心肌肌钙蛋白 T（car‐                  产许可证号 SCXK（北京）2019-0010。所有大鼠饲养于
          diac troponin T，CTn-T）、肌酸激酶（creatine kinase，CK）、   温度（22±2）℃、相对湿度（50±5）%环境下，适应性饲
          天冬氨酸转氨酶（aspartate aminotransferase，AST）、乳酸         养7 d。本实验经内蒙古医科大学医学伦理委员会审批

          脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）等心肌酶的含量，             通过，伦理批件编号为YKD202001055。
          缩小心肌损伤面积        [5―6] ，但其改善 MIRI 的作用机制尚未           2 方法
          明确。本研究利用网络药理学方法筛选匝迪-5 味丸的                          2.1 网络药理学研究
          活性成分及作用靶点，并预测其改善 MIRI 的潜在作用                            检索中药系统药理学数据库和分析平台（TCMSP，
          靶点及通路，又通过建立 MIRI 大鼠模型验证匝迪-5 味                      http：//tcmspw. com/）和 BATMAN-TCM 数 据 库（http：//
          丸改善 MIRI 的作用机制，旨在为阐明该方的药效机制                        bionet.ncpsb.org/batman-tcm/），并查阅文献，获取匝迪-5
          提供参考。                                              味丸的活性成分。以“肉豆蔻”“广枣”“荜茇”“木香”“土
          1 材料                                               木香”为关键词，在 TCMSP 中设置口服生物利用度≥
          1.1 主要仪器                                           30%、类药性指数≥0.18进行检索，在BATMAN-TCM数
              本研究所用主要仪器包括Synergy H4型酶标仪（美                    据库中设置“药物-靶点参考值”中靶蛋白提取值≥0.90、
          国 Bio-Tek 公司）、RM2016 型病理切片机（德国 Leica 公             P＜0.05 进行检索。利用 UniProt 数据库（https：//www.
          司）、XSP-C204 型显微镜（重庆重光实业有限公司）、                      uniprot.org/）对所得活性成分进行检索，找出匝迪-5味丸
          D1008E型离心机（武汉赛维尔生物科技有限公司）等。                        各活性成分的作用靶点。以“myocardial is-chemia”为关
          1.2 药品与试剂                                          键词，从 GeneCards 数据库（https：//genecards.org/）、Dis‐
              匝迪-5味丸（内药制字M13010062，规格为60丸/袋）                 GeNET 数据库（https：//www.disgenet.org/）和 DrugBank
          由内蒙古国际蒙医医院国家蒙药制剂中心提供；复方丹                           数据库（https：//go.drugbank.com/）中收集心肌缺血的相

          参滴丸（国药准字 Z10950111，规格为每丸重 27 mg）购                  关靶基因。利用 Venn Diagram 软件对匝迪-5 味丸活性
          自天力士制药集团股份有限公司；CTn-T酶联免疫吸附                         成分的作用靶点和心肌缺血相关靶基因取交集，获得共
          试验（ELISA）试剂盒（货号CSB-E16443r）购自华美生物                  同 靶 点 。 将 共 同 靶 点 导 入 STRING 数 据 库（https：//
          工程有限公司；CK、LDH、AST ELISA试剂盒（货号分别                    string-db.org/），选择“multiple proteins”，将物种设置为
          为 C060-b、C018、C072）均购自长春汇力生物技术有限                  “Homo sapiens”，置信度设置为 0.7，进行蛋白相互作用
          公司；磷脂酰肌醇 3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase，      （protein-protein interaction，PPI）网络构建与数据分析。
          PI3K）抗体（货号 bsm-33219M）购自北京博奥森生物技                   将分析结果导入Cytoscape 3.9.0软件，构建PPI 网络图，
          术有限公司；辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase，              分析节点（成分或靶点蛋白）和边（成分、靶点蛋白和疾


          中国药房  2024年第35卷第4期                                                 China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 4    · 443 ·
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