Page 56 - 《中国药房》2024年4期

表3 各 组 A549 细 胞 中 PCNA、MMP-2、MMP-9、 表4 各组裸鼠体内肿瘤质量与体积变化比较（x±s，
SPHK1、S1PR3、ERK1/2 蛋白相对表达量比较 n＝5）
（x±s，n＝6） 组别 瘤体质量/g 肿瘤体积/mm 3
组别 PCNA MMP-2 MMP-9 SPHK1 S1PR3 ERK1/2 裸鼠-对照组 0.76±0.06 158.33±6.14
对照组 1.52±0.14 1.36±0.12 1.14±0.11 0.93±0.08 0.72±0.06 0.61±0.05 裸鼠-胡黄连苷Ⅱ低剂量组 0.65±0.05 a 135.42±5.84 a
胡黄连苷Ⅱ低浓度组 1.27±0.11 1.03±0.10 0.85±0.07 0.81±0.08 0.65±0.05 0.43±0.04 a 裸鼠-胡黄连苷Ⅱ中剂量组 0.54±0.04 ab 112.52±5.25 ab
a
a
a
a
a
ab
ab
ab
ab
胡黄连苷Ⅱ中浓度组 1.01±0.08 0.81±0.08 0.62±0.05 0.64±0.06 0.51±0.04 0.34±0.03 ab 裸鼠-胡黄连苷Ⅱ高剂量组 0.23±0.02 abc 47.92±2.13 abc
ab
abc
abc
abc
abc
abc
胡黄连苷Ⅱ高浓度组 0.63±0.05 0.52±0.05 0.31±0.03 0.27±0.03 0.30±0.03 0.14±0.01 abc 裸鼠-K6PC-5组 0.89±0.07 a 185.42±6.53 a
a
a
a
K6PC-5组 1.87±0.16 1.69±0.14 1.33±0.12 1.21±0.13 0.89±0.08 0.94±0.08 a 裸鼠-胡黄连苷Ⅱ高剂量+K6PC-5组 0.57±0.04 d 118.75±5.03 d
a
a
d
d
胡黄连苷Ⅱ高浓度+K6PC-5组 1.12±0.13 0.94±0.08 0.73±0.06 0.70±0.06 0.57±0.05 0.38±0.03 d a：与裸鼠-对照组比较，P＜0.05；b：与裸鼠-胡黄连苷Ⅱ低剂量组
d
d
d
比较，P＜0.05；c：与裸鼠-胡黄连苷Ⅱ中剂量组比较，P＜0.05；d：与裸
a：与对照组比较，P＜0.05；b：与胡黄连苷Ⅱ低浓度组比较，P＜
鼠-胡黄连苷Ⅱ高剂量组比较，P＜0.05。
0.05；c：与胡黄连苷Ⅱ中浓度组比较，P＜0.05；d：与胡黄连苷Ⅱ高浓度
组比较，P＜0.05。 4 讨论
胡黄连苷Ⅱ是一种糖苷类衍生物，可抑制人食管癌
Eca109 细胞和人结直肠癌 SW480、SW620 细胞的增殖、
PCNA 29 kDa
侵袭与转移 [14―15] ，提示该成分具有一定的抗肿瘤活性。
MMP-2 74 kDa 本研究结果显示，胡黄连苷Ⅱ可浓度/剂量依赖性地抑制
A549细胞的增殖、迁移、侵袭以及裸鼠体内移植瘤的生
MMP-9 92 kDa
长，表明该成分能够抑制NSCLC的恶性进展。
作为细胞增殖的标志蛋白，PCNA 对于肿瘤细胞的
SPHK1 52 kDa
[16]
DNA 复制至关重要 ；MMP-2 和 MMP-9 可降解细胞外
S1PR3 42 kDa 基质并参与肿瘤细胞的侵袭和转移，其表达水平与肿瘤
[17]
细胞的侵袭、迁移能力成正比 。本研究检测了A549细
43 kDa
ERK1/2
41 kDa 胞中 PCNA、MMP-2、MMP-9 蛋白的表达情况，结果显
示，胡黄连苷Ⅱ可浓度依赖性地抑制细胞中 PCNA、
GAPDH 36 kDa
MMP-2、MMP-9蛋白的表达，从蛋白水平上初步证实了
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ
胡黄连苷Ⅱ对 A549 细胞增殖、侵袭、迁移的抑制作用。
Ⅰ：对照组；Ⅱ：胡黄连苷Ⅱ低浓度组；Ⅲ：胡黄连苷Ⅱ中浓度组；
与此同时，本研究结果还显示，胡黄连苷Ⅱ可剂量依赖
Ⅳ：胡黄连苷Ⅱ高浓度组；Ⅴ：K6PC-5组；Ⅵ：胡黄连苷Ⅱ高浓度+
性地抑制移植瘤裸鼠体内的肿瘤生长，从动物水平上初
K6PC-5组。
步证实了该成分对恶性肿瘤的体内抑制作用。由此可
图4 各 组 A549 细 胞 中 PCNA、MMP-2、MMP-9、
SPHK1、S1PR3、ERK1/2蛋白表达的电泳图 见，胡黄连苷Ⅱ有望成为NSCLC的潜在治疗药物之一。
由 SPHK1 产生的 S1P 是鞘脂代谢的中心分子，S1P
可与 S1PR3 结合，进而激活 S1P 下游分子 ERK1/2 的表
达，从而调节肿瘤细胞存活、迁移等生物学过程 [10，18] ；另
Ⅰ
有研究证实，SPHK1/S1P/S1PR3信号通路可参与卵巢癌
[19]
细胞的血管生成 。以上研究表明，SPHK1/S1P/S1PR3
信号通路在肿瘤的恶性进展中具有重要作用。此外，
Ⅱ
SPHK1/S1P/S1PR3 信号通路中 S1P 的活化包括其受体
[20]
（S1PR）及受体活化所引起的一系列细胞反应 ，故可通
Ⅲ
过检测 SIPR3 的表达来反映 S1P 的活性。鉴于此，本研
究检测了 SPHK1、S1PR3、ERK1/2 蛋白的表达情况。结
Ⅳ
果 显 示 ，胡 黄 连 苷 Ⅱ 可 浓 度 依 赖 性 地 下 调 细 胞 中
SPHK1、S1PR3、ERK1/2 蛋白的表达，推测该成分对
NSCLC 恶性进展的抑制作用可能与抑制 SPHK1/S1P/
Ⅴ
S1PR3 信号通路有关。同时，本研究结果还显示，经
SPHK1 激 活 剂 K6PC-5 干 预 后 ，细 胞 中 SPHK1/S1P/
Ⅵ
S1PR3 信号通路相关蛋白 SPHK1、S1PR3、ERK1/2 的表
Ⅰ：裸鼠-对照组；Ⅱ：裸鼠-胡黄连苷Ⅱ低剂量组；Ⅲ：裸鼠-胡黄连 达均较对照组显著升高，细胞的增殖、迁移、侵袭能力亦
苷Ⅱ中剂量组；Ⅳ：裸鼠-胡黄连苷Ⅱ高剂量组；Ⅴ：裸鼠-K6PC-5组； 显著增强，裸鼠体内移植瘤的生长明显加快，表明
Ⅵ：裸鼠-胡黄连苷Ⅱ高剂量+K6PC-5组。 SPHK1/S1P/S1PR3信号通路确实参与了NSCLC的恶性
图5 各组裸鼠体内移植瘤生长情况 进展。为验证上述推测，本研究在高剂量胡黄连苷Ⅱ的
· 434 · China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 4 中国药房 2024年第35卷第4期