Page 59 - 《中国药房》2024年4期

fibers and disorder of arrangement， and a large number of inflammatory cell infiltration in the gingival sulcus wall. The gingival
index， the levels of IL-18， iNOS， ALP in gingival crevicular fluid， the level of ROS in gingival tissues， the phosphorylations of
PI3K and Akt， as well as the protein expression of VEGF in gingival tissues were significantly increased； the levels of SOD and
CAT in gingival tissues of rats in model group were significantly decreased （P＜0.05）. Compared with model group， the
pathological damage to the gingival tissues of rats in procyanidin group was reduced， and all quantitative indicators were
significantly improved （P＜0.05）； 740Y-P could reverse the improvement effect of procyanidin on various indicators （P＜0.05）.
CONCLUSIONS Procyanidin may alleviate gingival tissue damage， and improve gingival inflammation and oxidative stress in rats
with gingivitis by inhibiting PI3K/Akt/VEGF signaling pathway.
KEYWORDS procyanidin； gingivitis； gingival tissue； phosphoinositide 3-kinase/protein kinase B/vascular endothelial growth
factor signaling pathway

牙龈炎是一种慢性炎症性口腔疾病，主要累及牙龈 1.2 主要药品与试剂
组织，若治疗不及时，会深度破坏牙周结构，引发严重牙 原花青素原料药（批号SY28349，纯度≥99.65%）购
周炎，损害牙实质，导致牙齿松动脱落，极大地影响患者 自甘肃顺意生物科技有限公司；麦芽糖、蔗糖（批号分别
[1]
的咀嚼功能 。研究指出，牙龈炎的致病因素以口腔牙 为 JX108、JX117）均购自西安晋湘药用辅料有限公司；
龈卟啉单胞菌感染为主，其病理改变包括牙龈组织的炎 白细胞介素 18（interleukin-18，IL-18）、诱导型一氧化氮
合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS）、碱性磷酸酶
症细胞浸润和病理性血管生成激活，因此减轻炎症是防
（alkaline phosphatase，ALP）酶联免疫吸附测定（ELISA）
[2]
治牙龈炎、维持口腔健康的有效手段 。磷脂酰肌醇 3-
检测试剂盒和 ECL 增强化学发光试剂（批号分别为
激酶（phosphoinositide 3-kinase，PI3K）/蛋白激酶 B（pro‐
NB29840、NB46227、NB55258、NB44268）均购自深圳市
tein kinase B，Akt）是调控炎症因子表达及炎症反应发生
纽邦生物技术有限公司；740Y-P 原料药（PI3K/Akt 信号
的重要信号通路，可参与介导牙龈炎等炎症性疾病的发
通路激活剂，纯度≥98.95%），超氧化物歧化酶（supero-
病过程，抑制该信号通路激活可降低炎症因子的表达水
xide dismutase，SOD）、过氧化氢酶（catalase，CAT）、活性
平，并可下调血管内皮生长因子（vascular endothelial 氧（reactive oxygen species，ROS）ELISA 检测试剂盒，苏
growth factor，VEGF）的表达，抑制血管新生，减轻脂多 木精-伊红（hematoxylin and eosin，HE）染色试剂盒，高效
糖诱导的人牙龈成纤维细胞的炎症反应和过氧化损 RIPA 裂 解 液 ，BCA 蛋 白 检 测 试 剂 盒（批 号 分 别 为
伤 [3―4] 。由此可见，PI3K/Akt/VEGF信号通路是牙龈炎的 WC29845、WC47811、WC55278、WC50755、WC25632、

潜在治疗靶点。 WC46147、WC77280）均购自南京微测生物科技有限公
原花青素是一种黄酮类活性物质，富含于葡萄籽 司；兔源磷酸化 PI3K（phosphorylated PI3K，p-PI3K）、
中，具有较强的抗氧化及抗炎能力。已有研究证实，原 PI3K、磷 酸 化 Akt（phosphorylated Akt，p-Akt）、Akt、
花青素可抑制人牙周膜成纤维细胞损伤和人牙龈上皮 VEGF、甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）一抗和辣根过氧
细胞炎症因子的表达 [5―6] 。但上述研究仅从细胞角度探 化物酶标记的羊抗兔 IgG 二抗（批号分别为 JD29490、
究了原花青素的抗炎效果，未能深入研究其对牙龈炎的 JD53814、JD32561、JD44783、JD45611、JD63326、JD42886）
均购自南京基蛋生物科技股份有限公司。
改善作用及潜在机制。基于此，本研究通过构建牙龈炎
1.3 实验动物
大鼠模型，初步探究原花青素对模型大鼠牙龈组织损伤
SPF 级雄性 SD 大鼠，8～9 周龄，体重 322～351 g，
及PI3K/Akt/VEGF信号通路的影响，以期为牙龈炎的临
购自广东莱迪生物医药研究院有限公司，生产许可证号
床治疗提供参考。
为 SCXK（粤）2022-0064。 所 有 大 鼠 均 在 室 温 22～
1 材料
25 ℃、相对湿度 55%～65%、每 12 h 昼夜循环的环境中
1.1 主要仪器 饲养，自由饮水、摄食。本研究方案经张家口学院伦理

JJ-Z029-2型牙周钝头探针仪购自觐嘉科学仪器（上 委员会审核批准，批准编号为L2022第92号。
海）有限公司；PT-3502B 型酶标仪购自北京普天新桥技 2 方法
术有限公司；Axiovert 200 型显微镜购自德国 Carl Zeiss 2.1 造模、分组与给药
公司；Omega Fluor Plus型凝胶成像仪购自美国Aplegen 参照相关文献方法 [7―8] 建立牙龈炎大鼠模型：大鼠
公司。 经乙醚麻醉后以仰卧位固定，用丝线缝扎其上颌双侧第

中国药房 2024年第35卷第4期 China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 4 · 437 ·