Page 31 - 《中国药房》2024年3期

α-SMA 42 kDa 表4 转染 miRNA-21 模拟物/抑制剂后细胞中 PI3K/
Akt 信号通路相关 mRNA 和蛋白表达水平比较
Collagen Ⅰ 130 kDa
（x±s，n＝5）
PI3K 117 kDa PI3K Akt PTEN
组别
Akt 56 kDa mRNA 蛋白 mRNA 蛋白 mRNA 蛋白
miRNA-21模拟物NC组 0.51±0.46 0.99±0.00 0.31±0.03 0.61±0.02 0.34±0.03 0.10±0.01
a
a
a
a
a
PTEN 44 kDa miRNA-21模拟物组 0.80±0.01 2.16±0.12 1.69±0.15 0.84±0.06 0.17±0.01 0.02±0.05 a
miRNA-21抑制剂NC组 0.54±0.03 1.00±0.03 0.29±0.02 0.51±0.06 0.43±0.05 0.10±0.01
GAPDH 36 kDa
a
a
miRNA-21抑制剂组 0.40±0.01 0.84±0.02 0.07±0.06 0.49±0.05 0.53±0.02 0.41±0.02 a
a
a
a
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ
a：与对应的NC组比较，P＜0.01。
Ⅰ：空白组；Ⅱ：模型组；Ⅲ：蓝盆花醇提物低剂量组；Ⅳ：蓝盆花醇
提物中剂量组；Ⅴ：蓝盆花醇提物高剂量组。 PTEN 44 kDa
图3 各组大鼠肝组织中HF指标及PI3K/Akt信号通路
相关蛋白表达的电泳图 PI3K 117 kDa
表3 各组大鼠肝组织中HF指标及PI3K/Akt信号通路 Akt 56 kDa
相关蛋白的表达水平比较（x±s，n＝10）
Collagen Ⅰ/ GAPDH 36 kDa
组别 α-SMA/GAPDH PI3K/GAPDH Akt/GAPDH PTEN/GAPDH
GAPDH Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ
空白组 0.49±0.07 0.19±0.02 0.33±0.05 0.67±0.06 0.06±0.01 Ⅰ：miRNA-21模拟物组；Ⅱ：miRNA-21模拟物NC组；Ⅲ：miRNA-
模型组 0.66±0.05 a 0.40±0.02 a 0.69±0.04 a 1.29±0.05 a 0.02±0.01 a
21抑制剂组；Ⅳ：miRNA-21抑制剂NC组。
蓝盆花醇提物低剂量组 0.43±0.12 b 0.22±0.06 b 0.50±0.04 b 1.03±0.06 b 0.19±0.01 b 图5 转染 miRNA-21 模拟物/抑制剂后细胞中 PI3K/
蓝盆花醇提物中剂量组 0.26±0.05 b 0.20±0.05 b 0.42±0.05 b 0.93±0.02 b 0.17±0.02 b
蓝盆花醇提物高剂量组 0.23±0.04 b 0.23±0.01 b 0.42±0.04 b 0.92±0.07 b 0.20±0.05 b Akt信号通路相关蛋白表达的电泳图
a：与空白组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.01。
4 讨论
3.2 体外细胞实验结果
HF 作为肝脏损伤及修复时发生的病理过程，如不
3.2.1 蓝 盆 花 醇 提 物 含 药 血 清 对 HSC-T6 细 胞 中
及时干预治疗，则有逐渐演变为肝硬化、肝癌等的危险。
miRNA-21表达的影响
传统医药在肝病治疗方面积累了很多好的经验，本课题
与对照组比较，蓝盆花醇提物含药血清低、中、高浓
组基于前期研究结果，通过体内外实验验证蒙药蓝盆花
度组细胞中miRNA-21表达水平均显著降低（P＜0.01）。
醇提物抗HF的作用机制。
结果见图4。
PI3K/Akt 信号通路中的一系列磷酸化过程可以激
1.5
活转录因子，而这些转录因子参与并改变了重要的细胞
[11]
过程，如分化、增殖、凋亡等 。PTEN 作为 PI3K/Akt 信
mRNA-21表达水平 1.0 号通路的负性调控因子，可以抑制PI3K/Akt信号通路的
[12]
激活，进而抑制细胞增殖和肿瘤进展 。有文献报道，
0.5
a a a PI3K/Akt 信号通路可以有效地调节 HF 的进展，如促进
[13]
ECM 重塑、肌成纤维细胞转化和胶原表达 。miRNA
0
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ 作为一种短链非编码 RNA，被证实可以参与 HF 的发生
Ⅰ：对照组；Ⅱ：蓝盆花醇提物含药血清低浓度组；Ⅲ：蓝盆花醇提
和演变过程。PTEN 的 mRNA 是 miRNA-21 的靶标之
物含药血清中浓度组；Ⅳ：蓝盆花醇提物含药血清高浓度组；a：与对照 一，miRNA-21 可以抑制 PTEN 蛋白的表达，从而调控
组比较，P＜0.01。
[14]
图4 蓝盆花醇提物含药血清干预后细胞中 miRNA-21 PI3K/Akt通路 。在HF动物模型中，miRNA-21在血清
[15]
表达水平测定结果（x±s，n＝3） 和肝脏中的表达均明显上调 。且研究发现，转染
3.2.2 转染miRNA-21模拟物/抑制剂后对细胞中PI3K、 miRNA-21 模拟物促进了 HSC-T6 细胞的增殖，而转染
[16]
Akt、PTEN mRNA及其蛋白表达的影响 miRNA-21 抑制物抑制了 HSC-T6 细胞的增殖 。上述
与miRNA-21模拟物NC组比较，miRNA-21模拟物 研究表明，调控 miRNA-21 的表达能影响 HSC-T6 细胞
组细胞中PI3K、Akt的mRNA和蛋白表达水平均显著升 的活化与增殖。
高（P＜0.01），PTEN的mRNA和蛋白表达水平均显著降低 在体内实验中，笔者发现蓝盆花醇提物能明显改善
（P＜0.01）；与miRNA-21抑制剂NC组比较，miRNA-21抑 模型大鼠肝组织中炎症细胞浸润，减少模型大鼠纤维化
制剂组细胞中PI3K、Akt的mRNA和蛋白表达水平均显 增生。此外，笔者还观察到，经蓝盆花醇提物灌胃后模
著降低（P＜0.01），PTEN的mRNA和蛋白表达水平均显 型大鼠肝组织中HF指标（α-SMA、Collagen Ⅰ）及PI3K/
著升高（P＜0.01）。结果见表4、图5。 Akt 信号通路相关指标（PI3K、Akt）的 mRNA 和蛋白表

中国药房 2024年第35卷第3期 China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 3 · 281 ·