Page 68 - 《中国药房》2024年2期

3.5 GBE 对 DN 模型小鼠肾皮质中巨噬细胞标志蛋白 1 000 0.4 a
表达的影响 （ ng/mL ） 800 a 0.3 b b

与对照组比较，模型组小鼠肾皮质中 iNOS 蛋白的 600 b b b RAGE/β-actin 0.2 b
血清AGEs/ 400
表达显著上调，而 Arg-1 蛋白的表达显著下调（P＜ 200 0.1
0.01）；与模型组比较，各药物组小鼠肾皮质中iNOS蛋白
0 0
的表达均显著下调，而 Arg-1 蛋白的表达均显著上调 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ
A.血清AGEs水平柱形图 B. RAGE蛋白表达柱形图
（P＜0.01）。结果见图4A、图5。 1.0 a 3
b a
b
0.8
iNOS 131 kDa 2
RhoA/β-actin 0.6 b ROCK1/β-actin b
Arg-1 38 kDa 0.4 b
β-actin 43 kDa 0.2 1
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 0 0
A.巨噬细胞标志蛋白 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ
C. RhoA蛋白表达柱形图 D. ROCK1蛋白表达柱形图
RAGE 46 kDa Ⅰ：对照组；Ⅱ：模型组；Ⅲ：阳性对照组；Ⅳ：GBE低剂量组；Ⅴ：
GBE高剂量组；a：与对照组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.01。
RhoA 22 kDa
图6 GBE 对 DN 模型小鼠血清中 AGEs 水平和肾皮质
ROCK1 158 kDa
中RAGE、RhoA、ROCK1蛋白表达的影响（x±s，
β-actin 43 kDa n＝6）
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 4 讨论
B. AGEs-RAGE/RhoA/ROCK信号通路相关蛋白
Ⅰ：对照组；Ⅱ：模型组；Ⅲ：阳性对照组；Ⅳ：GBE低剂量组；Ⅴ： 巨噬细胞主要通过极化来参与炎症反应，包括 2 种
GBE高剂量组。 作用相反的表型，分别为M1和M2型：M1型巨噬细胞主
图4 各组小鼠肾皮质中巨噬细胞标志蛋白和 AGEs- 要在抗原呈递和免疫炎症方面发挥作用，而 M2 型巨噬
RAGE/RhoA/ROCK信号通路相关蛋白表达的电 细胞则是通过分泌抗炎因子而发挥促进损伤修复和抗
[4]
泳图 炎的作用 。有学者在DN动物模型中发现，2种表型巨
[6]
噬细胞的失衡会加重炎症反应及纤维化改变 。基于
1.0 1.0
b
此，本研究通过干预巨噬细胞极化来抑制炎症反应，从
0.8 a 0.8
b b 而延缓DN的发生发展。
iNOS/β-actin 0.6 b b b Arg-1/β-actin 0.6 a AGEs 可作用于肾脏的 RAGE，激活细胞内信号转
0.4
0.4
0.2 0.2 导途径，介导肾脏系膜细胞激活以及巨噬细胞等炎症细
胞向肾组织浸润。AGEs 和 RAGE 相互作用，可通过释
0 0
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 放MCP、细胞黏附分子、生长因子等多种细胞因子，进一
A. iNOS蛋白表达柱形图 B. Arg-1蛋白表达柱形图
步促进巨噬细胞极化和炎症因子分泌，在肾脏固有细
Ⅰ：对照组；Ⅱ：模型组；Ⅲ：阳性对照组；Ⅳ：GBE低剂量组；Ⅴ：
胞、炎症细胞及各种细胞因子间形成复杂的相互作用网
GBE高剂量组；a：与对照组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.01。
络，最终引发“瀑布效应”，加快 DN 的进程 。RhoA/
[16]
图5 GBE 对 DN 模型小鼠肾皮质中 iNOS、Arg-1 蛋白
ROCK信号通路可调节细胞形态、运动、分泌、增殖和基
表达的影响（x±s，n＝6）
因表达等生物学过程，在 DN 的发生发展中具有重要作
3.6 GBE 对 DN 模型小鼠 AGEs-RAGE/RhoA/ROCK 用。Rao 等 报道，该通路可介导巨噬细胞向肾组织迁
[17]
信号通路相关蛋白表达的影响 移，而阻断肾小球内皮细胞的 RhoA/ROCK 信号通路可
与对照组比较，模型组小鼠血清中 AGEs 水平和肾 显著抑制 AGEs 诱导的内皮细胞 MCP-1、细胞间黏附分
子1（intercellular cell adhesion molecule-1，ICAM-1）的分
皮质中RAGE、RhoA、ROCK1蛋白的表达水平均显著升
泌，进而减少 db/db 自发性 DM 小鼠肾小球中 MCP-1、
高（P＜0.01）；与模型组比较，各药物组小鼠血清中
ICAM-1的表达和巨噬细胞的浸润。
AGEs水平和肾皮质中RAGE、RhoA、ROCK1（GBE低剂
基于现有研究和本课题组前期成果，本研究以KK/
量组除外）蛋白的表达水平均显著降低（P＜0.01）。结 Ay 小鼠为对象，建立了 DN 模型；以正常 C57BL/6J 小鼠
果见图4B、图6。 为对照，以二甲双胍为阳性对照药物，考察了低、高剂量

· 190 · China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 2 中国药房 2024年第35卷第2期