Page 60 - 《中国药房》2023年24期

MIP-1β 含量，以及各药物组细胞上清液中 MCP-1 含量 过激活 MRGPRX2 而引起细胞内钙离子浓度升高。结
均显著升高（P＜0.05），其中 IL-8、MIP-1β、MCP-1 含量 果见图4（图中，每条钙成像曲线反映的是单个细胞的钙
的变化有一定的浓度依赖趋势。结果见图2。 离子浓度变化情况）。
300 15 15
TNF-α
a 12 12
IL-8 a 9 9
（ pg/mL ） 200 a 荧光强度 6 荧光强度 6

释放量/ 100 a 3 0 3 0
0 20 40 60 80 100 120 0 20 40 60 80 100 120
时间/s 时间/s
A. 25 μmol/L IVQKIKHCF组 B. 50 μmol/L IVQKIKHCF组
0 （MRGPRX2/HEK293细胞） （MRGPRX2/HEK293细胞）
阴性对照组 25 50 100 阳性对照组
15 15
IVQKIKHCF浓度/（μmol/L）
12 12
A. TNF-α和IL-8
1 200 a 9 9
MIP-1β 荧光强度 荧光强度
a 6 6
MCP-1
a a a 3 3
（ pg/mL ） 800 0 0 20 40 60 80 100 120 0 0 20 40 60 80 100 120
a
释放量/ 400 C. 100 μmol/L IVQKIKHCF组 D.空白对照组（MRGPRX2/
时间/s
时间/s
a
（MRGPRX2/HEK293细胞） HEK293细胞）
15 15
0 12 12
阴性对照组 25 50 100 阳性对照组 9 9
IVQKIKHCF浓度/（μmol/L） 荧光强度 荧光强度
B. MIP-1β和MCP-1 6 6
3 3
a：与阴性对照组比较，P＜0.05。
0 0
图2 各组LAD2细胞的炎症因子释放情况（n＝3） 0 20 40 60 80 100 120 0 20 40 60 80 100 120
时间/s 时间/s
3.3 IVQKIKHCF 对 MrgprX2 敲低 LAD2 细胞的激活 E. 阳性对照组（MRGPRX2/ F. 阴性对照组（HEK293细胞）
HEK293细胞）
作用减弱
图4 各组 MRGPRX2/HEK293 细胞和 HEK293 细胞
与 NC-LAD2 细胞比较，IVQKIKHCF 对 KD-LAD2
的钙成像曲线
细胞的激活作用明显减弱，其β-氨基己糖苷酶释放率显
著降低（P＜0.05），提示IVQKIKHCF可能通过MRGPRX2 4 讨论
激活LAD2细胞而引发脱颗粒反应。结果见图3。 研究指出，MRGPRX2 介导的药物过敏反应广泛存
100 在于各类临床药物中，包括抗生素、阿片类镇痛药、肌肉
KD-LAD2细胞 松 弛 剂 等 。 研 究 显 示 ，多 肽 类 药 物 也 可 激 活
β-氨基己糖苷酶释放率/% 60 a a MRGPRX2，引发类过敏反应，严重者可导致患者休克或
NC-LAD2细胞
80
死亡
。因此，研究多肽激活 MRGPRX2 的潜在机制，
[4―6]
40
可有效促进多肽药物的开发，对提高其临床安全性具有
20
β-氨基己糖苷酶是肥大细胞内预合成的代表性颗
0 a a 重要意义。
阴性对照组 25 50 100 阳性对照组 粒物质 ，组胺、TNF-α、MIP-1β、MCP-1 则是肥大细胞
[17]
IVQKIKHCF浓度/（μmol/L）
a：与同浓度NC-LAD2细胞比较，P＜0.05。 释放的重要过敏介质 [8―9] ，上述指标在过敏性疾病的发
图3 各组 NC-LAD2 细胞和 KD-LAD2 细胞的 β-氨基 生发展过程中均具有重要作用。研究指出，药物作用于
己糖苷酶释放情况（n＝3） MRGPRX2后可激活肥大细胞，肥大细胞可释放上述颗

3.4 IVQKIKHCF 引起 MRGPRX2/HEK293 细胞内钙 粒物质和过敏介质，从而诱发类过敏反应，且上述指标
离子浓度升高 的释放量与肥大细胞的激活程度呈正相关，故研究者常
与SP类似，在25～100 μmol/L的IVQKIKHCF作用 通 过 上 述 指 标 的 高 低 来 评 价 药 物 对 肥 大 细 胞 及
下，MRGPRX2/HEK293细胞内钙离子的浓度逐渐升高， MRGPRX2 激活效应的强弱 [8―9，17] 。本研究结果显示，
且有一定的浓度依赖趋势；但CIB无法升高细胞内的钙 25～100 μmol/L的IVQKIKHCF可显著促进LAD2细胞
离子浓度，同时 100 μmol/L 的 IVQKIKHCF 亦无法激活 释放β-氨基己糖苷酶和组胺，且上述作用有一定的浓度
HEK293 细胞的钙动员，进一步表明 IVQKIKHCF 可通 依赖趋势；同时，IVQKIKHCF 可不同程度地增加 LAD2

· 2998 · China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 24 中国药房 2023年第34卷第24期