Page 83 - 《中国药房》2023年23期
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表2 各组共培养体系的TEER以及PC12细胞中LDH                         调节轴突的延伸作用，增强与G蛋白偶联的受体的转运
               活性和BDNF水平的检测结果（x±s，n＝4）                       作用 。促进 Plc-γ、Map-2、GAP-43 的表达可维持神经
                                                                 [17]
          组别            TEER/（Ω·cm）  LDH活性/（U/g）  BDNF水平/（ng/L）  元轴突和树突的生长，恢复神经元间信号的传导，减轻
                              2
          对照组           364.8±29.68  3.00±0.30   4.29±0.43               [18]
          模型组           235.3±26.27 a  2.20±0.22 a  2.52±0.47 a  神经元的损伤 。本研究结果显示，BMECs-PC12 共培
          NBP组          289.3±11.44 b  2.73±0.17 b  4.38±0.49 c  养体系经 OGD/R 后，PC12 细胞中 TrkB、Plc-γ、Map-2、
          3，4-DD组       349.8±18.79 c  3.18±0.22 c  3.97±0.55 c
                                                             GAP-43 mRNA 表达水平升高，提示共培养体系在受到
             a：与对照组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与模型组
         比较，P＜0.01。                                          OGD/R 刺激后，细胞自身触发内源性修复作用；经 3，4-
          3.3 3，4-DD对共培养体系OGD/R损伤模型PC12细胞                    DD干预后，PC12细胞中上述指标表达水平均进一步升
          中TrkB、Plc-γ、Map-2、GAP-43 mRNA表达的影响                 高 ，提 示 3，4-DD 可 通 过 作 用 于 Transwell 小 室 上 层
              与对照组比较，模型组 PC12 细胞中 TrkB、Plc-γ、                BMECs，促进 BDNF 分泌，启动 BDNF/TrkB 信号通路，
          Map-2、GAP-43 mRNA表达水平均显著升高（P＜0.01）；                调节PC12的突触可塑性，增强BMECs与神经元之间的
          与模型组比较，NBP 组、3，4-DD 组 PC12 细胞中上述指                  信号联系以促进内源性修复，进而保护神经元。
          标表达水平均进一步显著升高（P＜0.05 或 P＜0.01）。                        综上所述，3，4-DD 可通过作用于 BMECs 减轻神经
          结果见表3。                                             元 OGD/R 损伤，其作用机制可能与激活 BDNF/TrkB 信
         表3 PC12细胞中TrkB、Plc-γ、Map-2、GAP-43 mRNA              号通路有关。由于本实验无法充分反映细胞间和细胞
               表达水平的检测结果（x±s，n＝4）                            外基质的相互作用，后续还需要观察多个细胞之间的相
          组别         TrkB mRNA  Plc-γ mRNA  Map-2 mRNA  GAP-43 mRNA  互作用，进一步探讨3，4-DD保护神经元的作用机制。
          对照组         1.00±0.00  1.00±0.00  1.00±0.00  1.00±0.00  参考文献
          模型组         8.18±1.23 a  8.16±1.21 a  8.83±0.28 a  21.19±1.29 a
          NBP组       13.63±1.60 b  14.73±0.88 b  12.38±1.23 b  26.83±1.45 b  [ 1 ]  刘抒雯，杨丽华，马春，等. 中医药保护脑缺血再灌注损
          3，4-DD组    11.55±1.85 c  12.61±2.17 b  10.35±0.82 c  26.05±1.68 b
                                                                  伤后神经血管单元的作用[J]. 中国实验方剂学杂志，
             a：与对照组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.01；c：与模型组               2018，24（23）：225-234.
         比较，P＜0.05。
                                                                  LIU S W，YANG L H，MA C，et al. Effect of neurovascu‐
          4 讨论
                                                                  lar  unit  after  cerebral  ischemia-reperfusion  injury  treated
              CIRI的发生是由NVU中多种细胞相互作用导致的
                                                                  by traditional Chinese medicine[J]. Chin J Exp Tradit Med
          级联反应，可引起神经炎症的发生、BMECs间紧密连接
                                                                  Formulae，2018，24（23）：225-234.
          破坏、脑微环境稳态失调、神经功能受损。BMECs是血                         [ 2 ]  LE R，ESQUENAZI S. Astrocytes mediate cerebral corti‐
          脑屏障的结构基础，其产生的 BDNF 可作用于轴突，为                             cal neuronal axon and dendrite growth，in part，by release
                        [12]
          神经元提供营养 。TEER是评价紧密连接功能和血脑                               of fibroblast growth factor[J]. Neurol Res，2002，24（1）：
                              [13]
          屏障细胞旁转运的方法 ；LDH 存在于所有细胞中，当                              81-92.
          细胞膜损伤时可快速释放至细胞培养液中，因此常作为                           [ 3 ]  夏霜莉，杨媛，廖陈，等 . 3，4-二羟基苯甲醛作用星形胶
                                     [14]
          衡量细胞是否完整的重要指标 。本研究结果显示，                                 质细胞减轻脑微血管内皮细胞和神经元氧糖剥夺/再灌
          BMECs-PC12 共培养体系经 OGD/R 后，TEER、PC12 细                   注 损 伤 [J].  上 海 中 医 药 大 学 学 报 ，2021，35（4）：67-
          胞中LDH活性和BDNF水平均降低，提示BMECs-PC12                          72，100.
          共培养体系的屏障功能被破坏，PC12细胞受损；经3，4-                            XIA S L，YANG Y，LIAO C，et al. 3，4-Dihydroxybenzal‐
                                                                  dehyde attenuates oxygen-glucose deprivation/reperfusion
          DD干预后，共培养体系的TEER以及PC12细胞中LDH
                                                                  injury  in  brain  microvascular  endothelial  cells  and  neu‐
          活性和BDNF水平均升高，表明3，4-DD可减轻BMECs-
                                                                  rons by acting on astrocytes[J]. Acad J Shanghai Univ Tra‐
          PC12 共培养体系的 OGD/R 损伤，并促进 BMECs、PC12
                                                                  dit Chin Med，2021，35（4）：67-72，100.
          细胞生成并释放BDNF。
                                                             [ 4 ]  吴雄枫，袁绘，沈红健，等. 静脉溶栓治疗反复短暂性脑
              BMECs的旁分泌功能可通过调控BDNF/TrkB信号
                                                                  缺血发作的疗效分析[J]. 第二军医大学学报，2022，43
          通路，增加神经元细胞膜上 Plc-γ、Map-2、GAP-43 蛋白                     （1）：55-59.
          的表达，其中 Plc-γ 可介导蛋白激酶 C 调节突触可塑                           WU X F，YUAN H，SHEN H J，et al. Efficacy of intrave‐
            [15]
          性 ；Map-2是组成神经元细胞骨架的重要组成部分，其                             nous  thrombolysis  for  treatment  of  repeated  transient  is-
                                            [16]
          表达水平能反映神经元树突的破坏情况 ；GAP-43可参                             chemic attack[J]. Acad J Second Mil Med Univ，2022，43
          与神经细胞外生长及突触发育形成和神经细胞再生，能                               （1）：55-59.


          中国药房  2023年第34卷第23期                                              China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 23    · 2889 ·
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