Page 78 - 《中国药房》2023年23期

50 μm 50 μm 50 μm 50 μm 50 μm
A.正常对照组 B. NAFLD模型组 C.圣草酚低浓度组 D.圣草酚中浓度组 E.圣草酚高浓度组
图4 各组细胞的尼罗红染色观察结果（×200）

3.2.2 细胞中MDA、ROS和TG水平测定结果 表5 各组细胞中 MAPK 和 Nrf2/HO-1 信号通路相关
与正常对照组比较，NAFLD 模型组细胞中 MDA、 蛋白表达水平测定结果（x±s，n＝3）
ROS 和 TG 水平显著升高（P＜0.01）；与 NAFLD 模型组 组别 p-ERK/ERK p-JNK/JNK Nrf2/β-actin HO-1/β-actin
比较，各给药组细胞中 MDA、ROS 和 TG 水平均显著降 正常对照组 1.00±0.00 1.00±0.00 1.00±0.00 1.00±0.00
NAFLD模型组 1.98±0.04 a 1.11±0.03 a 0.67±0.01 a 0.81±0.05 a
低（P＜0.05或P＜0.01）。结果见表4。
圣草酚低浓度组 1.27±0.06 b 0.69±0.02 b 1.00±0.02 b 1.26±0.06 b
表4 各组细胞中MDA、ROS和TG水平测定结果（x±s， 圣草酚中浓度组 1.40±0.04 b 0.49±0.05 b 0.73±0.02 b 1.23±0.05 b
n＝3，nmol/mg port） 圣草酚高浓度组 1.15±0.03 b 0.24±0.04 b 0.75±0.01 b 1.17±0.04 b
组别 MDA ROS TG a：与正常对照组比较，P＜0.01；b：与NAFLD模型组比较，P＜0.01。
正常对照组 0.87±0.09 89.90±11.64 0.14±0.01 4 讨论
NAFLD模型组 2.11±0.17 a 236.50±55.30 a 0.32±0.02 a NAFLD 不仅是肝病致残和死亡的重要原因，而且
圣草酚低浓度组 1.56±0.20 b 133.50±32.24 c 0.25±0.01 b
圣草酚中浓度组 1.13±0.08 b 124.30±22.74 b 0.24±0.03 b 与代谢综合征、2型糖尿病、动脉硬化性心脑血管疾病和
圣草酚高浓度组 0.92±0.11 b 110.60±24.45 b 0.17±0.01 b 肝癌的高发密切相关。因此，迫切需要发现其治疗靶点
a：与正常对照组比较，P＜0.01；b：与NAFLD模型组比较，P＜ 并开发有效的治疗药物来防治NAFLD。体内实验结果
0.01；c：与NAFLD模型组比较，P＜0.05。 显示，圣草酚给药后能够缓解高脂饲料诱导的 NAFLD
3.2.3 细胞中 MAPK 和 Nrf2/HO-1 信号通路相关蛋白 模型小鼠肝脏中的脂质堆积，降低其体重、肝脏质量及
表达水平测定结果 血清中AST、ALT水平；体外实验结果也显示，使用圣草
与正常对照组比较，NAFLD 模型组细胞中 ERK、 酚处理后同样能够减少HepG2细胞内脂质沉积，同时降
JNK磷酸化水平显著上调（P＜0.01），Nrf2、HO-1蛋白表 低胞内 ROS、MDA 和 TG 水平。体内外实验结果表明，
达水平显著下调（P＜0.01）。与NAFLD模型组比较，圣 圣草酚能够缓解NAFLD。
草酚低、中、高浓度组细胞中ERK、JNK磷酸化水平均显 研究表明，肝脏内脂质沉积变性会导致 ROS 过表
著下调（P＜0.01），Nrf2、HO-1蛋白表达水平均显著上调 达，进而激活 MAPK 信号通路，诱发氧化应激促进
[14]
（P＜0.01）。结果见图5、表5。 NAFLD 的发展 。另有文献报道，抑制 MAPK 信号通
44 kDa 路后会使Nrf2/HO-1信号通路激活，进而发挥抗炎、抗氧
p-ERK 42 kDa
化等作用 [15―16] 。ERK 和 JNK 信号转导通路是 MAPK 信
44 kDa
ERK [17]
42 kDa 号转导通路中的经典通路 ，抑制 ERK、JNK 的蛋白表
[18]
β-actin 37 kDa 达和磷酸化能够缓解炎症和氧化应激 。Nrf2 是细胞
[19]
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 调节抗氧化应激反应的重要转录因子 。当出现氧化
A. ERK磷酸化水平 应 激 时 ，Kelch 样 环 氧 氯 丙 烷 相 关 蛋 白 1（Kelch-like
54 kDa
p-JNK
46 kDa ECH-associated protein-1，Keap1）构象改变，从而使 Nrf2
JNK 54 kDa 从Keap1-Nrf2复合物中解离出来，由细胞质转位到胞核，
46 kDa
启动下游的抗氧化应答元件，从而上调细胞的抗氧化因
β-actin 37 kDa
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 子 HO-1 等细胞保护蛋白的活性，以避免氧化应激对肝
B. JNK磷酸化水平 [19―20]
的损伤 。在体内外研究中，笔者通过相关实验验证
Nrf2 68 kDa 了圣草酚给药后能够有效抑制细胞中ERK、JNK的活性，
HO-1 32 kDa 上调模型动物/细胞中Nrf2、HO-1的表达。该结果表明，
β-actin 37 kDa 圣草酚能够抑制 MAPK 信号通路，进而激活 Nrf2/HO-1
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ 信号通路发挥抗氧化应激的作用，从而缓解NAFLD。
C. Nrf2和HO-1蛋白表达水平
Ⅰ：正常对照组；Ⅱ：NAFLD模型组；Ⅲ：圣草酚低浓度组；Ⅳ：圣 综上所述，笔者通过体内外 NAFLD 模型初步验证
草酚中浓度组；Ⅴ：圣草酚高浓度组。 了圣草酚缓解 NAFLD 的效果，且其作用可能与抑制
图5 各组细胞中 MAPK 和 Nrf2/HO-1 信号通路相关 MAPK 信号通路，进而激活 Nrf2/HO-1 信号通路发挥抗
蛋白表达检测的电泳图 氧化应激有关。但本研究尚未通过加入抑制剂等方式

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