Page 75 - 《中国药房》2023年23期

set up. HepG2 cells in drug groups were treated with eriodictyol for 24 h at the time of modeling. The lipid deposition was observed
in cells， and the levels of TG， malondialdehyde （MDA） and reactive oxygen species （ROS） as well as the phosphorylation levels
of the mitogen-activated protein kinase （MAPK） signal pathway related proteins [extracellular signal-regulated kinase （ERK）， c-
Jun N-terminal kinase （JNK）] and the protein expressions of Nrf2 and HO-1 were all determined. RESULTS In the in vivo
experiment， compared with the NAFLD model group， the body weight， liver weight， the serum levels of AST， ALT and TG were
all decreased significantly in eriodictyol low- and high-dose groups （except for serum level of AST in eriodictyol low-dose group）
（P＜0.01）； liver lipid deposition was reduced significantly and the protein expressions of Nrf2 and HO-1 in liver tissues were
further up-regulated （P＜0.01）. In the in vitro experiment， compared with the NAFLD model group， the lipid deposition in
hepatocytes was reduced in eriodictyol low-， medium- and high-concentration groups （P＜0.01）， and the levels of ROS， MDA and
TG were down-regulated （P＜0.05 or P＜0.01）； the phosphorylation levels of ERK and JNK were significantly down-regulated
（P＜0.01）， while the protein expressions of Nrf2 and HO-1 were up-regulated significantly （P＜0.01）. CONCLUSIONS
Eriodictyol can inhibit MAPK signaling pathway and activate Nrf2/HO-1 signaling pathway to alleviate NAFLD.
KEYWORDS eriodictyol； non-alcoholic fatty liver disease； mitogen-activated protein kinase； factor-erythroid 2-related factor 2；
heme oxygenase-1

[10]
[9]
非酒精性脂肪肝（non-alcoholic fatty liver disease， 够缓解胰岛素抵抗 ，对抗糖尿病引发的肝损伤 。本
NAFLD）是一种较为常见的慢性肝脏疾病。当肝脏中 研 究 拟 用 C57BL/6J 小 鼠 构 建 NAFLD 体 内 模 型 ，用
脂质沉积超过肝脏质量的 5%，同时排除过量饮酒或其 HepG2 细胞构建 NAFLD 体外模型，探究圣草酚缓解
[1]
他已知的肝脏疾病诱因时，即可判定为NAFLD 。目前 NAFLD的作用，并从MAPK和Nrf2/HO-1信号通路角度
统计的数据表明，世界范围内 NAFLD 的发病率约为 初步探究其可能的作用机制，为圣草酚的进一步开发利
[2]
25% 。 而 我 国 随 着 经 济 社 会 的 发 展 ，不 同 地 区 的 用提供参考。
[3]
NAFLD发病率自1990年以来也逐渐升高 。NAFLD最 1 材料
典型的特征是脂质的积累和沉积。脂质在肝脏中不断 1.1 主要仪器
积累，会引起肝脏炎症；同时，随着脂质沉积的进一步增 本研究所用的主要仪器有：AE163型电子分析天平
加，脂滴逐渐在肝脏中形成，导致肝纤维化甚至肝硬化 （瑞士Mettler Toledo公司）、IX51型荧光倒置显微镜（日
的发生 。NAFLD 已成为威胁人类健康的危险因素之 本 Olympus 公司）、TDL-5A 型离心机（上海菲恰尔分析
[4]
一，而目前尚无有效的治疗方法，因此寻找有效的治疗 仪 器 有 限 公 司）、Multiskan 型 全 波 长 酶 标 仪（美 国
药物迫在眉睫。 Thermo Fisher Scientific 公司）、Mini-PROTEAN 型垂直
丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein ki‐ 电泳设备电泳仪（美国Bio-Rad公司）。
nase，MAPK）相关信号通路是一类高度保守的信号通 1.2 主要药品与试剂
路，由3个亚群组成，包括细胞外信号调节激酶（extracel‐ 圣草酚对照品（批号20201011，纯度≥98%）为重庆
lular signal-regulated kinase，ERK）、c-Jun 氨基末端激酶 医科大学附属第三医院药剂科刘松青教授课题组惠赠；
（c-Jun N-terminal kinase，JNK）和p38丝裂原活化蛋白激 丙氨酸转氨酶（alanine aminotransferase，ALT）、天冬氨
酶（p38 MAPK），在细胞增殖、应激、炎症和凋亡中发挥 酸转氨酶（aspartate aminotransferase，AST）、甘油三酯
[5]
着核心作用 。当NAFLD发生后，由于肝脂质沉积诱发 （triglyceride，TG）和丙二醛（malondialdehyde，MDA）检
[6]
了肝脏炎症，MAPK 信号通路可能会被激活 。MAPK 测试剂盒（批号分别为 20220506、20220504、20220506、
通 路 的 活 化 可 以 使 核 转 录 因 子 红 系 2 相 关 因 子 2 20220508）均购自南京建成生物工程研究所；兔源过氧
（nuclear factor-erythroid 2-related factor 2，Nrf2）磷酸化， 化物ERK、兔源磷酸化ERK（p-ERK）、兔源JNK、兔源磷
促进 Nrf2 的核转位或增加 Nrf2 的表达，继而促进 Nrf2 酸化JNK（p-JNK）、兔源Nrf2、兔源HO-1、兔源β-肌动蛋
的下游基因血红素加氧酶 1（heme oxygenase-1，HO-1） 白（β-actin）一抗均购自美国 Cell Signaling 公司；辣根过
的转录表达。抑制MAPK相关信号通路表达，可使机体 氧化物酶标记的山羊抗兔IgG二抗购自北京中杉金桥生
氧化应激水平或炎症水平降低，从而延缓 NAFLD 的发 物技术有限公司；活性氧（reactive oxygen species，ROS）
生发展 [6―7] 。 检测试剂盒（批号 BB22041）购自上海贝博生物科技有
圣草酚化学名为3′，4′，5，7-四羟二氢黄酮，是一种 限公司；BCA 定量试剂盒（批号 020123230510）购自上
天然二氢黄酮类化合物，广泛存在于蔬菜、水果和中药 海碧云天生物科技有限公司；尼罗红染色试剂购自美国
中，特别是在柑橘类水果中的含量最为丰富。在北美， Sigma公司。
印第安人常使用富含圣草酚的植物作为药物治疗气喘、 1.3 动物
过敏性鼻炎、风湿等疾病 。随着对圣草酚研究的进一 本研究所用动物为 SPF 级健康 C57BL/6J 小鼠，共
[8]
步深入，其被发现具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、保护神经 16 只，雄性，6～8 周龄，体重 18～22 g，购自重庆医科大
[8]
系统等多种药理活性 。同时，也有研究表明圣草酚能 学实验动物中心，动物生产许可证号为SCXK（渝）2018-

中国药房 2023年第34卷第23期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 23 · 2881 ·