Page 46 - 《中国药房》2023年22期

4）， hypericin （peak 7） and isoquercetin （peak 8）； their similarities ranged from 0.871 to 0.998. Average relative correlations of
samples from Chengde of Hebei Province， Huludao of Liaoning Province， Yuncheng of Shanxi Province and Linyi of Shandong
Province were 0.538， 0.528， 0.462 and 0.435， respectively. CA and PCA showed that the samples from Chengde of Hebei Province
and Huludao of Liaoning Province were roughly classified into one category， while the samples from Linyi of Shandong Province
and Yuncheng of Shanxi Province were roughly classified into one category； VIP values of peak 1， 2， 3 and 5 were all greater than
1. By QAMS， the relative correction factors of chlorogenic acid， glucosylvitexin， hypericin and isoquercetin were 0.401， 0.993，
1.670 and 1.615 （RSD＜2%）. Compared with external standard method， except for isoquercetin in the two batches of samples （S39
and S41）， there was no significant difference in the content of each component in other batches of samples （the relative deviations≤
5%）. CONCLUSIONS The established fingerprint and QAMS method are simple to operate and can be used to evaluate the quality
of C. pinnatifida leaves. The sample from Chengde of Hebei Province is relatively good in quality. Chlorogenic acid （peak 1），
glucosylvitexin （peak 3）， and the corresponding components of peaks 2 and 5 may be differential markers affecting the quality of
C. pinnatifida leaves.
KEYWORDS Crataegus pinnatifida leaves； fingerprints； quantitative analysis of multi-components by single-marker； chemical
pattern recognition； differential marker

山楂叶是蔷薇科植物山里红 Crataegus pinnatifida 器（昆山市超声仪器有限公司）、AG-254 型十万分之一
Bge. var. major N. E. Br. 或 山 楂 Crataegus pinnatifida 电子分析天平（瑞士Mettler Toledo公司）、HC-2062型高
Bge.的干燥叶，具有活血化瘀、理气通脉、化浊降脂之功 速离心机（科大创新股份有限公司中佳分公司）等。
[1]
效 。现代研究表明，山楂叶主要含有黄酮类、萜类和有 1.2 主要药品与试剂
机酸类等化合物 [2―3] ，具有抗动脉粥样硬化、降压降脂、 绿原酸对照品（批号18071907）、牡荆素葡萄糖苷对
增加冠状动脉血流量等药理活性 [4―5] ，在心脑血管疾病 照品（批号 20042305）、牡荆素鼠李糖苷对照品（批号
[6]
治疗领域效果突出 。2020年版《中国药典》（一部）以金 20042304）、金丝桃苷对照品（批号19103001）、异槲皮素
[1]
丝桃苷含量作为山楂叶药材的定量指标 。由于中药大 对照品（批号 18062702）均购自成都普菲德生物技术有
多具有化学成分多、作用机制复杂、治疗效果多样等特
限公司，纯度均不低于98.0%；乙腈、四氢呋喃、甲酸均为
点，因此单一成分难以全面反映药材质量，需要对药材
[7]
质量进行整体控制 。指纹图谱是符合中药特点的质量 色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为纯净水。
78 批山楂叶药材（编号 S1～S78）分别来自河北省
控制模式之一，能够较全面地反映中药所含化学成分的
种类和数量，从而体现中药的整体性和复杂性 。但指 承德市、山东省临沂市、辽宁省葫芦岛市、山西省运城市
[8]
[9]
纹图谱无法表征已知成分的含量 ，故在其基础上进行 4 个主产地，经全国老中医药专家（传统鉴定）学术经验
多组分含量测定可以弥补上述不足。多组分含量测定 继承人孙宝惠主任药师鉴定，均为山里红 C. pinnatifida
多用外标法，但由于对照品价格昂贵、难以获得，使得检 Bge. var. major N. E. Br. 的干燥叶。78 批药材采自 2020
测成本较高。一测多评（quantitative analysis of multi- 年 10－11 月和 2021 年 10－11 月，分别产自河北省承德
components by single-marker，QAMS）法只需定量分析 1 市隆化县（编号S1、S4、S8、S10、S19、S22、S26、S28、S37、
个成分（内参物）即可实现多成分含量的同时测定 ，可 S39、S42、S44、S63～S67、S76～S78）、河北省承德市承
[10]
有效解决对照品紧缺和检测成本高的问题。基于此，本 德县（编号 S2、S3、S6、S7、S20、S21、S24、S25、S38、S41、
研究对河北省承德市、辽宁省葫芦岛市、山西省运城市、 S60～S62）、河北省承德市滦平县（编号 S9、S27、S43）、
山东省临沂市 4 个主产地的 78 批山楂叶药材进行指纹 河北省承德市兴隆县（S5、S23、S40）、河北省承德市鹰手
图 谱 研 究 和 灰 色 关 联 分 析（grey correlation analysis， 营子镇（编号S45）、辽宁省葫芦岛市建昌县（编号S12～
GCA）、聚 类 分 析（cluster analysis，CA）、主 成 分 分 析
S14、S29～S31、S50～S54、S68～S70）、山东省临沂市费
（principal component analysis，PCA）、正交偏最小二乘判 县（编号 S11、S46～S49）、山西省运城市夏县（编号
别 分 析（orthogonal partial least squares-discriminant
S15～S18、S32～S36、S55～S59、S71～S75）。
analysis，OPLS-DA），采用 QAMS 法检测药材中 5 种主
要有效成分（绿原酸、牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖 2 方法与结果
2.1 色谱条件
苷、金丝桃苷和异槲皮素 [4―5] ）的含量，评价不同产地山
楂叶的质量并筛选影响其质量的差异标志物，以期为全 以 Agilent ZORBAX SB-C18（250 mm×4.6 mm，5
面评价山楂叶药材质量提供依据。 μm）为色谱柱，以乙腈-四氢呋喃混合溶液（体积比 12∶
1 材料 1）为流动相A、0.3%甲酸溶液为流动相B进行梯度洗脱
1.1 主要仪器 （0～15 min，8%A→12%A；15～25 min，12%A→16%A；
本研究所用主要仪器有Agilent 1200型高效液相色 25～38 min，16%A→15%A；38～45 min，15%A→20%A；
谱（HPLC）仪（美国Agilent公司）、KQ-700型超声波清洗 45～50 min，20%A→34%A；50～55 min，34%A→100%A）；

· 2728 · China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 22 中国药房 2023年第34卷第22期