Page 52 - 《中国药房》2023年18期

150 H1975细胞 24 h 150 H1299细胞 24 h 150 H1975细胞 24 h 150 H1299细胞 24 h
48 h 100 48 h 100 48 h 100 48 h
72 h
72 h
细胞存活率/% 50 细胞存活率/% 50 细胞存活率/% 50 细胞存活率/% 50
72 h
72 h
100
0 0 0 0
0 10 20 30 40 0 10 20 30 40 0 5 10 15 20 25 0 5 10 15 20 25
TPL浓度/（nmol/L） TPL浓度/（nmol/L） 吉非替尼浓度/（μmol/L） 吉非替尼浓度/（μmol/L）
A.不同浓度TPL作用不同时间对2种细胞存活率的影响 B.不同浓度吉非替尼作用不同时间对2种细胞存活率的影响
150 H1975细胞 TPL 5 nmol/L 2 H1975细胞 TPL 5 nmol/L 150 H1299细胞 TPL 5 nmol/L 4 H1299细胞 TPL 5 nmol/L
TPL 15 nmol/L TPL 15 nmol/L 100 TPL 15 nmol/L 3 TPL 15 nmol/L
细胞存活率/% 100 CI 1 细胞存活率/% 50 CI 2 1

50

0 0 0 0
0 5 10 15 20 25 0 0.5 1.0 0 5 10 15 20 25 0 0.2 0.4 0.6 0.8
吉非替尼浓度/（μmol/L） Fa 吉非替尼浓度/（μmol/L） Fa
C. TPL联合吉非替尼作用48 h对H1975细胞存活的影响 D. TPL联合吉非替尼作用48 h对H1299细胞存活的影响
图1 TPL、吉非替尼单用及两药联用对2种细胞敏感性的影响（x±s，n＝6）
3.2 TPL 联合吉非替尼对 H1975 细胞凋亡及周期分布 kcal/mol（1 kcal＝4.19 kJ）；而 TPL 与 EGFR 野生型编码
的影响 产物之间没有氢键，结合对接能量为－4.460 kcal/mol。
H1975细胞培养24 h或48 h时，各药物组细胞的凋 结果见图2。
亡率均较空白组显著升高（P＜0.05）。同时，与空白组比
3.4 TPL 联 合 吉 非 替 尼 对 H1975 细 胞 PI3K/Akt/
较，各药物组G0/G1期细胞的比例均显著升高，S期、G2/M
mTOR通路及自噬相关蛋白表达的影响
期（仅高浓度TPL组作用48 h和联用组）细胞的比例均显
与空白组比较，各药物组培养 24、48 h 时通路相关
著降低，且高浓度TPL组细胞的凋亡率及周期变化普遍
蛋白 PI3K、Akt、mTOR 的表达均显著下调，而自噬相关
较吉非替尼组，联用组较吉非替尼、TPL单用组，高浓度
蛋白MAP1LC3A、MAP1LC3B的表达均显著上调，且高
联用组较低浓度联用组更明显（P＜0.05）。结果见表1。
3.3 TPL与EGFR分子对接分析 浓度TPL组上述指标的变化均较吉非替尼组，联用组较
TPL 的羟基可与 EGFR T790M/L858R 突变编码产 吉非替尼、TPL 单用组，高浓度联用组较低浓度联用组
物的 Thr854 残基形成氢键，结合对接能量为－6.504 更明显（P＜0.05），结果见图3。
表1 TPL联合吉非替尼对H1975细胞凋亡率及周期分布的影响（x±s，n＝6，%%）
培养24 h 培养48 h
组别
凋亡率 G 0/G 1期比例 S期比例 G 2/M期比例 凋亡率 G 0/G 1期比例 S期比例 G 2/M期比例
空白组 11.32±2.25 57.60±4.63 21.49±2.60 10.71±1.03 22.16±2.38 61.23±8.21 30.64±5.13 20.85±3.91
吉非替尼组 27.52±2.33 a 63.15±5.04 a 16.31±1.41 a 9.86±0.42 35.47±2.55 a 65.20±4.23 a 21.03±2.08 a 18.73±4.05
低浓度TPL组 26.43±2.64 a 64.58±7.41 a 12.61±5.12 a 12.48±5.45 35.33±3.51 a 67.41±2.52 a 22.75±5.00 a 18.18±3.42
高浓度TPL组 38.93±6.56 abc 70.21±6.38 ab 10.96±4.58 ab 11.32±2.10 40.43±2.43 abc 74.61±6.23 abc 17.72±0.39 abc 16.68±0.62 a
低浓度TPL+吉非替尼组 46.69±2.64 abcd 77.82±5.26 abcd 6.63±1.24 abcd 7.12±1.49 abcd 50.78±2.30 abcd 85.79±4.73 abcd 11.81±3.29 abcd 9.80±2.44 abcd
高浓度TPL+吉非替尼组 52.12±4.81 abcde 85.69±6.42 abcde 4.43±0.26 abcde 5.49±0.69 abcde 62.54±3.66 abcde 93.87±6.90 abcde 7.24±0.58 abcde 5.70±0.28 abcde
a：与空白组比较，P＜0.05；b：与吉非替尼组比较，P＜0.05；c：与低浓度TPL组比较，P＜0.05；d：与高浓度TPL组比较，P＜0.05；e：与低浓度
TPL+吉非替尼组比较，P＜0.05。

A. H1975细胞 B. H1299细胞
图2 TPL与EGFR T790M/L858R突变和EGFR野生型编码产物结合的二维模型

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