Page 23 - 《中国药房》2023年18期
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痔疮是临床常见的肛肠科疾病，病灶位于肛门部 （辽）2020-0001。所有大鼠于温度（24±2）℃、相对湿度
位，其常见症状包括肛门溃疡、直肠肿胀等，具有较高的 （60±10）%的环境下适应性喂养1周后进行实验。动物
发病率，任何年龄段均可发生，严重影响患者的生活质 实验通过长春中医药大学实验动物伦理委员会批准，批
[1]
量 。有研究认为，痔疮的发病原因包括肛管下黏膜静 准号为2021218。
[2]
脉曲张、肛管部位静脉瓣因压迫导致静脉回流障碍等 。 2 方法
临床常用的治疗方法有药物治疗、门诊手术治疗和外科 2.1 不同剂量加味三黄膏的制备
手术治疗，但手术治疗容易损伤肛门周围括约肌，而致 按照相关文献方法 和前期预实验结果进行制备：
[6]
患者大便失禁，术后肛门口疤痕挛缩，严重者可致肛门 取大黄、黄芩、黄连各 5.0 g，酌予断碎，加入米醋没过药
狭窄、排便困难 [3―4] 。 材，浸泡过夜；锅中加入80 g猪油预热，将上述药材同置
三黄膏始载于《医心方》，原方由大黄、黄连、黄芩 3 锅中炸枯，去渣，滤过得药油；取 1.0 g 冰片与 2.5 g 地榆
味药材组成，本研究在此基础上加入地榆、冰片 2 味药 粉末（过120目筛），置于药油中，加入适量蜂蜡混匀，冷
材，其中地榆具有凉血止血、清热解毒、培清养阴、消肿
却至室温，即得药膏 50 g，作为中剂量加味三黄膏。同
敛疮的功效，冰片用于治疗疮疡肿痛、溃后不敛。5味药
法制备低、高剂量加味三黄膏（5味药材的取样量分别为
材均有清热燥湿、泻火解毒的功效，共奏清热凉血、解毒
中剂量的1/2和2倍）。
消肿之功。临床研究表明，三黄膏能有效减轻患者的痔
2.2 大鼠肛门溃疡实验
疮水肿，缓解疼痛，同时对患者术后肛门疼痛、出血、瘢
2.2.1 分组、建模与给药
[5]
痕形成等有明显的改善和预防作用 ，但其作用机制尚
取大鼠70只，随机取10只作为空白组，其余大鼠按
不明确。本研究利用冰醋酸和巴豆油建立大鼠肛门溃
[7]
照相关文献方法 建立肛门溃疡模型：将经 99% 冰醋酸
疡和肿胀模型，对加味三黄膏治疗模型大鼠的药效机制
溶液充分浸泡的滤纸片（直径 6 mm）置于大鼠肛门，使
进行研究，旨在为阐明加味三黄膏治疗痔疮的作用机制
滤纸片紧密接触肛周皮肤及黏膜，并于 40 s 时更换 1 次
提供参考。
滤纸片，80 s时取下滤纸片。根据前期预实验结果，为了
1 材料 防止模型大鼠死亡，将造模成功且体重排名前10位的大
1.1 主要仪器
鼠作为模型组，其余造模成功的大鼠随机分为中药阳
本研究所用主要仪器包括 AB265-S 型十万分之一
[8]
性对照组（马应龙麝香痔疮膏 1 g/kg） 、西药阳性对照
分析天平（瑞士 Mettler Toledo 公司）、CP223C 型电子天
组（复方角菜酸酯乳膏，按照人鼠体表面积换算药物剂
平（美国 OHAUS 公司）、INFINITE M200PRO 型多功能
[9]
量为 1 g/kg） 和加味三黄膏低、中、高剂量组（185、370、
酶标仪[美谷分子仪器（上海）有限公司]、CX23型光学显
740 mg/kg），每组 10 只。各给药组大鼠每天在肛门内
微镜（日本 Olympus 公司）、DT5-2B 型低速台式离心机
2 cm处涂抹相应药物1次，连续给药15 d。
（北京时代北利离心机有限公司）等。
2.2.2 指标考察
1.2 主要药品与试剂
分别于给药前（第 0 天）及给药第 6、9、11、13、15 天
黄连、大黄、黄芩、地榆、冰片饮片均购自长春宏检
称量各组大鼠体重，计算体重增加量；观察肛门溃疡情
大药房，经长春中医药大学药学院姜大成教授鉴定均为
况，测量肛门溃疡的最大直径，并计算溃疡面积：溃疡面
真品；兔瞬时受体电位通道 V1（transient receptor poten‐
2
2
积（mm）＝π×（溃疡面最大直径/2）；同时参考相关文
tial channel V1，TRPV1）抗体、兔 P 物质抗体、辣根过氧
[10]
献方法 ，根据溃疡面积大小、炎症液体渗出情况和肛
化物酶标记的山羊抗兔IgG（H＆L）抗体、免疫组化试剂
盒（批号分别为 bs-23926R、bs-0065R、bs-40295G-HRP、 周肿胀情况对给药第 15 天的大鼠进行肛门溃疡等级评
IHC001）和苏木精-伊红（HE）染液均购自北京博奥森 价：+++表示有大量炎症液体渗出，溃疡面积大于 35
2
生物技术有限公司；马应龙麝香痔疮膏（批号 210235， mm ，肛门边缘为暗红色，红肿隆起大于1.3 mm；++表示
2
规格 10 g/支）和复方角菜酸酯乳膏（批号LCJ9275，规格 有较多炎症液体渗出，溃疡面积为 25～35 mm ，肛门边
20 g/支）均购自长春宏检大药房；白细胞介素 2（inter‐ 缘为红色；+表示有少量炎症液体渗出，溃疡面积为
2
leukin-2，IL-2）、IL-4、肿瘤坏死因子 α（tumor necrosis 15～＜25 mm ，肛门边缘为淡粉色。
factor-α，TNF-α）酶联免疫吸附试验（ELISA）检测试剂 2.3 大鼠直肠肿胀实验
盒均购自上海优选生物科技有限公司；伊文思蓝购自上 2.3.1 分组、建模与给药
海麦克林生化科技股份有限公司；其余试剂均为分 取大鼠70只，随机取10只作为空白组，其余大鼠按
析纯。 照相关文献方法于肛门内注入巴豆油混合液（蒸馏水、
[11]
1.3 动物 吡啶、乙醚、6% 巴豆油按体积比 1∶4∶5∶10 混合 ）造成
健康成年SD雌性大鼠，8～10周龄，体重（210±10） 大鼠直肠黏膜水肿，以建立直肠肿胀模型，直肠在接触
[12]
g，购自宏达生物科技有限公司，生产许可证号为SCXK 巴豆油 6 h 后达到肿胀峰值 。根据前期预实验结果，
中国药房 2023年第34卷第18期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 18 · 2193 ·
