Page 22 - 《中国药房》2023年17期

Dubosiella and Akkermansia. Through correlation analysis， it was found that the relative abundance of Lactobacillus， Streptococcus
and Escherichia-Shigella was positively related to the levels of inflammatory factor IL-1β， IL-6 and TNF-α （P＜0.05 or P＜0.01）.
The relative abundance of Lachnospira， Dubosiella， Firmicutes was significantly negatively correlated with the levels of inflammatory
factors mentioned above （P＜0.05 or P＜0.01）. CONCLUSIONS SGD may improve ALI by reducing lung tissue injury and
inflammatory response and regulating flora structure in rats.
KEYWORDS Shaoyao gancao decoction； acute lung injury； intestinal flora； 16S rRNA sequencing； inflammatory response

急性肺损伤（acute lung injury，ALI）是一种常见而 塞米松（dexamethasone，DEX）原料药（批号 C13694947，
复杂的炎症性疾病，由肺内外各种致病因素引起。其特 纯度≥98%）购自上海麦克林生化科技有限公司；LPS
征是急性、进行性呼吸窘迫和持续低氧血症，病死率高 （批号527N031）购自上海索莱宝生物科技有限公司；白
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达 40% 。机械通气和激素给药是目前较为有效的ALI 细胞介素 1β（interleukin-1β，IL-1β）、IL-6、肿瘤坏死因
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治疗方案 ，但仍缺乏副作用较小的有效治疗药物。ALI 子 α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）酶联免疫吸附检测
属于中医“爆喘”“喘脱”范畴 ，治疗上主要涉及清热解 （enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）试剂盒（批
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毒、活血化瘀、益气扶正等中药及方剂 。芍药甘草汤 号分别为 ZC-36391、ZC-36404、ZC-37624）购自上海茁
（Shaoyao gancao decoction，SGD）源于张仲景之《伤寒杂 彩生物科技有限公司。
病论》，2018年作为第一批经典名方收录在《古代经典名 1.3 动物
方目录》中。该方由芍药和炙甘草2味药材组成。方中 本研究所用动物为 SPF 级雄性大鼠，共 60 只，体重
白芍性微寒，能够养血调经、敛阴止汗；甘草性平，能够 （200±20） g，由北京华阜康生物科技有限公司提供，动
补脾益气、清热解毒、缓急止痛。现代研究和临床实践 物生产许可证号为 SCXK（京）2019-0008。大鼠饲养于
也证实，SGD具有显著的抗炎、镇痛、止咳、平喘、调节免 通风良好、室温 18～25 ℃、相对湿度 50%～70% 的动物
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疫等作用，对多种炎症性疾病有显著的治疗作用 。选 房中，饲养期间确保大鼠能够自由进食与饮水。本动物
用SGD治疗ALI具有中医理论与现代研究基础。 实验获得了贵州中医药大学动物实验伦理委员会批准
肺肠轴理论与中医基础理论“肺与大肠相表里”揭 （伦理批准号20210133）。
示了肺脏与胃肠道的关联性，二者胚胎起源相同、结构 2 方法
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相似 。现代研究亦证实肺和肠道在生理和病理条件下 2.1 SGD的制备
相互影响。如近年研究表明，肠道微生物能够影响肺功 SGD由白芍和炙甘草按1∶1（m/m）配伍组成。称取
能，参与多种肺系疾病，包括支气管哮喘、肺癌、ALI和慢 白芍、炙甘草各55 g，加入600 mL水 ，浸泡30 min，用电
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性阻塞性肺疾病等 。而肺部疾病也可表现出肠道菌群 陶炉以武火（1 200 W）煮沸后再以文火（600 W）煎煮至
改变的特征，如采用粪菌移植治疗手段可显著降低 Toll 300 mL，滤液减压浓缩，得到按生药量计为 2.0 g/mL 的
样受体 4/核因子 κB 信号通路活性和氧化应激水平，从 SGD药液，置于4 ℃冰箱中保存备用。
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而改善脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导的 ALI 。 2.2 大鼠分组、给药及ALI模型建立
可见，机体肠道菌群的改变对于肺部疾病的发生、发展 将60只大鼠按随机数字表法分为正常组（CON组，
和治疗都起着重要作用。本研究拟探讨 SGD 对 ALI 大 生理盐水）、模型组（MOD 组，生理盐水）、阳性对照组
鼠肠道菌群的影响，从而阐明其防治 ALI 的作用机制， （DEX 组，5 mg/kg 地塞米松） 和芍药甘草汤低、中、高
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为中医药治疗ALI提供实验依据。 剂量组（SGD-L、SGD-M、SGD-H 组，给药剂量以生药量
1 材料 计分别为 5.8、11.6、23.2 g/kg，分别为临床等效剂量的
1.1 主要仪器 0.5、1、2倍 ），每组10只。各组大鼠每天灌胃1次，灌胃
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本研究所用主要仪器为 FlexStation3 型多功能酶标 体积均为10 mL/kg，连续7 d。末次给药30 min后，CON
仪（美国Molecular Devices公司）、AE/240型十万分之一 组大鼠气道滴注等体积的生理盐水，其余各组大鼠气道
电子天平[梅特勒-托利多（上海）仪器有限公司]、KQ- 滴注LPS（5 mg/kg）建立ALI模型 。
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500DE型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）、 2.3 样本采集
H1650R型冷冻高速离心机（湘潭湘仪仪器有限公司）。 造模 12 h 后，麻醉大鼠，经气管注射冰磷酸盐缓冲
1.2 主要药品与试剂 液5 mL灌洗左肺，30 s后缓慢回抽，重复2次，收集肺泡
白芍（批号220101）、炙甘草（批号210601）饮片均购 灌洗液（bronchial alveolar lavage fluid，BALF）并置于离
自贵州一品药业连锁有限公司，经贵州中医药大学药学 心管中，在4 ℃下以3 000 r/min离心15 min，取上清液置
院孙庆文教授鉴定白芍为毛茛科植物芍药 Paeonia lac‐ 于－80 ℃冰箱中保存备用。随后取右肺上叶用于病理
tiflora Pall. 的干燥根，炙甘草为豆科植物甘草 Glycyr‐ 形态学观察，右肺下叶则用于计算肺组织湿/干重比。取
rhiza uralensis Fisch.的干燥根和根茎的炮制加工品。地 粪便置于－80 ℃冰箱中冻存备用。

· 2064 · China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 17 中国药房 2023年第34卷第17期