Page 34 - 《中国药房》2023年14期
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tissue  all  increased  significantly （P＜0.05）.  After  giving  Cur-SLN-FL，  the  above  indexes  were  all  improved  to  certain  extent.
          CONCLUSIONS Cur-SLN-FL can improve the pulmonary inflammatory reaction in COPD model mice， and its mechanism may be
          through  regulating  the  NLRP3  signaling  pathway，  inhibiting  the  expressions  of  caspase-1，  NF-κB  and  IL-1β，  thus  alleviating  the
          process of pulmonary fibrosis in COPD model mice.
          KEYWORDS     flower  lactose；  curcumin  solid  lipid  nanoparticles；  power  inhalation；  pulmonary  irritation；  chronic  obstructive
          pulmonary disease； NLRP3 inflammatory corpuscles


              慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary          1.2 主要药品与试剂
          disease，COPD）是以气道的慢性炎症为主要特征的疾                           Cur-SLN-FL（批号 20210312）为实验室自制；RIPA
          病，炎症细胞释放炎症介质和破坏性酶是COPD发展的                           细胞裂解液试剂盒、BCA蛋白浓度测定试剂盒、5×蛋白
          核心。有报道指出，阻断核苷酸结合寡聚化结构域样受                            上样缓冲液（批号分别为 P00138、P0010、P0015）均购自
          体蛋白 3（nucleotide-binding oligomerization domain-like   上海碧云天生物技术有限公司；兔抗鼠NLRP3、caspase-1、
          receptor protein-3，NLRP3）炎症小体的活化可能是治疗               核因子 κB（nuclear factor of kappa B，NF-κB）、白细胞介
          COPD局部炎症反应的重要靶点之一 。NLRP3炎症小                         素 1β（interleukin-1β，IL-1β）抗体，DAB 显色试剂盒，兔
                                          [1]
          体的过度激活可与胱天蛋白酶 1（caspase-1）相互作用，                     抗小鼠 β-肌动蛋白（β-actin）单克隆抗体（批号分别为
          使caspase-1进行自身激活，从而引起炎症反应              [2―3] 。      12621873002、12CM405B、12J18、BM221118、12I16B26、
              姜黄素（curcumin，Cur）是来源于姜科草本植物姜黄                   BM0627）均购自武汉博士德生物工程有限公司；超敏
                                        [4]
          的根茎中的一种脂溶性多酚类色素 。现代药物研究发                            ECL 化学发光试剂盒（批号 17122220）购自沈阳万类生
          现，Cur通过细胞外信号调节途径抑制炎症因子，最终抑                          物科技有限公司；猪胰蛋白酶（批号 20Yy06S10165）购
                                [5]
          制脂多糖诱导的气道炎症 。因而，Cur作为肺部炎症治                          自天津鼎国生物技术有限责任公司；注射用盐酸替来他
          疗药物已成为近年来研究的热点。目前Cur作用机制的                           明-盐酸唑拉西泮（批号20201118）购自吉林省华牧动物
                                                              保健品有限公司；吸入用布地奈德混悬液（批号327583）
          研究已深入到细胞和分子水平，但在 COPD 的研究中，
                                                              购自阿斯利康药业（中国）有限公司；其余试剂均为分析
          针对 Cur 的靶点机制报道还较少。近期研究发现，Cur
                                                              纯或实验室常用规格，水为纯净水。
          能够抑制 NLRP3 炎症小体表达，对肾脏损伤及心血管
          内 皮 炎 症 反 应 均 具 有 改 善 作 用     [6―7] 。 因 此 ，本 文 以    1.3 实验动物
          NLRP3炎症小体通路作为研究切入点，以期为Cur应用                             雄性 SPF 级 KM 小鼠 60 只，体重为 20～22 g，动物
                                                              生产许可证号为 SCXK（京）2019-0008；雄性 SPF 级 SD
          于COPD的治疗提供研究基础。
                                                              大鼠 18 只，体重为 180～210 g，动物生产许可证号为
              Cur本身存在溶解度小、易被代谢、血药浓度低等特                        SCXK（京）2016-0011，均购自北京维通利华实验动物技
                                                [8]
          点，使得病灶部分很难维持有效的药物浓度 。笔者前
                                                              术有限公司。动物饲养于天津市医药科学研究所动物
          期制备了花形乳糖（flower lactose，FL）装载 Cur 固体脂               实验室，12 h 光/12 h 暗循环、温度 20～24 ℃、相对湿度
          质纳米粒（solid lipid nanoparticles，SLN）吸入微粉（Cur-        40%～70%，自由进食饮水。动物实验经天津市医药科
          SLN-FL），实现Cur的肺内靶向递送          [9―10] 。本研究在前期
                                                              学 研 究 所 伦 理 委 员 会 批 准（批 准 号 IMPS-EAEP-Z-
          研究基础上采用气管内滴注猪胰蛋白酶（1 000 U/kg）复
                                                              18JCQNJC13500-02）。
          制 COPD 模型，以布地奈德混悬液为阳性对照药物，肺                         2 方法
          部吸入受试药物Cur-SLN-FL，研究该受试药物对COPD                      2.1 Cur-SLN-FL的制备及其粒径、载药量的检测
          模型小鼠肺部炎症的改善作用，探讨其可能的分子调控
                                                                  称取处方量的泊洛沙姆 188 和吐温-80，在 75 ℃磁
          机制，为 Cur-SLN-FL 改善 COPD 模型小鼠肺部炎症反                   力搅拌下加入适量水作为水相；另称取处方量的Cur、单
          应提供可靠的研究依据。                                         硬脂酸甘油酯和硬脂酸聚氧乙烯酯，在相同温度和转速
          1 材料                                                下加入适量无水乙醇，完全溶解后作为有机相。在
          1.1 主要仪器                                            80 ℃、1 020 r/min恒温磁力搅拌下将有机相缓慢注入水
              本研究所用主要仪器有PL203型精密电子天平（瑞                        相中，滴加完毕后，继续恒温搅拌3 h使其浓缩。趁热将
          士 Mettler Toledo 公司），HELOS-OASIS 型激光粒度仪             热乳液以 1∶1（V/V）加入 0～2 ℃的冷水中，低温固化 2
         （德国 Sympatec 公司），EG1150H 型生物组织包理机、                   h，即得黄色的Cur-SLN混悬液，然后经冷冻干燥将其微
          RM 21351型切片机（德国Leica公司），B071型显微摄影                   粉化制得 Cur-SLN 冻干粉，最后将冻干粉以 2∶1 的比例
          器材（日本 Olympus 公司），Nikon Ci-L 型显微镜（日本                与 FL 混匀后过筛，即得 Cur-SLN-FL       [9―10] 。同法制备空
          Nikon公司），MEK-7222K型全自动血细胞分析仪（日本                     白SLN-FL，备用。
          光电工业株式会社），BJ-PW-FM 型大鼠/小鼠干粉定量                           取 3 g Cur-SLN-FL 过 200 目筛，采用激光粒度仪测
          雾化器、BJ-PW-R 型液体定量雾化器（深圳市伯建生物                        定其粒径；而后采用超滤离心法测定其载药量。每个实
          科技有限公司）。                                            验重复3次。


          · 1692 ·    China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 14                            中国药房  2023年第34卷第14期
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