Page 79 - 中国药房2023年10期

JAK2 130 kDa
p-JAK2 128 kDa
STAT3 88 kDa

A.对照组 B. LPS组 p-STAT3 86 kDa
β-actin 42 kDa
对照组 LPS组 1 mg/L黄芩苷组 抑制剂组
A.蛋白表达电泳图
对照组
0.5 LPS组
1 mg/L黄芩苷组
抑制剂组
a
C. 1 mg/L黄芩苷组 D.抑制剂组 0.4
图7 黄芩苷对各组细胞侵袭能力影响的显微图（×20） 0.3 a b
蛋白相对表达量 b
Cyclin D1 34 kDa 0.2 c c
caspase-3 32 kDa
0.1
β-actin 42 kDa
对照组 LPS组 1 mg/L黄芩苷组 抑制剂组 0
A.蛋白表达电泳图 JAK2 p-JAK2 STAT3 p-STAT3
B.蛋白表达柱形图
4 对照组 1.0 c 对照组 a：与对照组比较，P＜0.05；b：与LPS组比较，P＜0.05；c：与1 mg/L
LPS组
LPS组
mRNA相对表达量 3 2 1 b c 抑制剂组 c 蛋白相对表达量 0.6 a b 抑制剂组 c 黄芩苷组比较，P＜0.05
1 mg/L黄芩苷组
1 mg/L黄芩苷组
0.8
a
a
b
b
0.4
图9 黄芩苷对各组细胞中JAK2/STAT3信号通路相关
0 a 0.2 0 蛋白表达的影响
Cyclin D1 caspase-3 Cyclin D1 caspase-3
因子含量显著升高，24 h 和 48 h 细胞活力显著降低，提
B. mRNA和蛋白表达柱形图
a：与对照组比较，P＜0.05；b：与LPS组比较，P＜0.05；c：与1 mg/L 示LPS诱导hPDLSCs炎症模型构建成功，且LPS可以降
黄芩苷组比较，P＜0.05 低细胞的活力。与 LPS 组比较，1、10 mg/L 黄芩苷组
图8 黄芩苷对各组细胞中Cyclin D1、caspase-3 mRNA 细胞炎症因子含量显著降低，24 h 和 48 h 细胞活力显
和蛋白表达的影响
著升高，说明 1、10 mg/L 黄芩苷可以抑制 LPS 诱导的
胞中 p-JAK2 和 p-STAT3 蛋白相对表达量均显著升高 hPDLSCs 炎症，提高细胞的活力。与干预 24 h 时比较，
（P＜0.05）；与 LPS 组比较，1 mg/L 黄芩苷组细胞中 干预 48 h 时 LPS 组和 0.1、1 和 10 mg/L 黄芩苷组细胞活
p-JAK2 和 p-STAT3 蛋白相对表达量均显著降低（P＜ 力均显著降低，且 48 h LPS 组的细胞活力低于 50%，为
0.05）；与1 mg/L黄芩苷组比较，抑制剂组细胞中p-JAK2 排除细胞活力过低对后续实验的影响，本课题组最终选
和 p-STAT3 蛋白相对表达量均显著降低（P＜0.05）。结 择1 mg/L黄芩苷进行后续实验。结果表明，与对照组比
果见图9。 较，LPS 组细胞增殖率、迁移率、侵袭细胞数均显著降
4 讨论 低，细胞凋亡率均显著升高；经1 mg/L黄芩苷干预后，上
牙周炎是由龈下牙齿生物膜引发宿主炎症和免疫 述指标均显著改善，证明了黄芩苷可以促进LPS诱导的
反应引起的，可导致易感宿主中牙周组织的不可逆破 hPDLSCs的增殖、迁移和侵袭，抑制其凋亡，具有良好的
[11]
坏，常规治疗的效果欠佳，且易反复甚至加剧 。目前 医学应用前景。Cyclin D1 是细胞增殖过程中的标志蛋
已有临床研究表明，黄芩可用于牙周炎的相关治疗 ， 白，作为细胞周期蛋白依赖性激酶 4（Cyclin-dependent
[12]
而黄芩苷是从黄芩中提取的黄酮类化合物，具有抗炎、 kinase 4，CDK4）和CDK6的变构调节剂，可调节从G1期
[15]
[13]
抗氧化等多种药理作用 。有研究发现，黄芩苷可以抑 到 S 期的转变，Cyclin D1 的高表达可促进细胞增殖 。
制牙周炎的炎症反应，并诱导细胞中细胞程序性死亡- 细胞凋亡是一种多种因素诱导程序性细胞死亡的生物
[14]
配体 1 下调，抑制牙槽骨吸收，促进组织修复等 ，此外 学过程，caspase-3 是执行细胞凋亡的关键因子，活化后
[16]
黄芩苷还能够促进 hPDLSCs 增殖、黏附和迁移，诱导 可切割多种底物，在细胞凋亡中具有重要作用 。本研
[9]
hPDLSCs的成骨分化 。 究结果显示，LPS 可抑制细胞 Cyclin D1 mRNA 及蛋白
本研究结果显示，与对照组比较，LPS 组细胞炎症 表达，促进caspase-3 mRNA及蛋白表达，而1 mg/L黄芩

中国药房 2023年第34卷第10期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 10 · 1221 ·