Page 46 - 《中国药房》2023年9期

A.对照组 B.模型组 C. Wog低剂量组 D. Wog高剂量组

E.氨茶碱组 F. rRIPK1组 G. Wog高剂量+rRIPK1组
注：箭头所指为凋亡细胞
图2 各组大鼠肺上皮细胞凋亡观察显微图（TUNEL染色）
结果显示，与对照组比较，模型组大鼠 PIF、PEF、MV 降
RIPK1 76 kDa
低，FEV1/FVC 比值低于 0.7。临床上常以 FEV1/FVC 比
值低于 70% 作为诊断 COPD 的依据 ，这提示 COPD 大
[14]
RIPK3 56 kDa
鼠肺功能减弱，模型构建成功。经 Wog 干预后，COPD
p-MLKL 54 kDa 大鼠的 PIF、PEF、MV 升高，Wog 高剂量组大鼠 FEV1/
FVC 比值高于 0.7，表明 Wog 对烟熏联合气管注射 LPS
MLKL 54 kDa
诱导的COPD大鼠具有保护作用。
IL-1β、IL-6、TNF-α 是 COPD 发生发展过程中相关
GAPDH 37 kDa
的炎症因子，这些炎症因子可引起肺组织不同的病理改
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ Ⅶ [15]
Ⅰ：对照组；Ⅱ：模型组；Ⅲ：Wog低剂量组；Ⅳ：Wog高剂量组；Ⅴ： 变 。本研究发现，与对照组比较，模型组大鼠血清中
氨茶碱组；Ⅵ：rRIPK1组；Ⅶ：Wog高剂量+rRIPK1组 IL-1β、IL-6、TNF-α 水平升高，肺组织病理损伤严重，这
图3 各组大鼠肺组织中 RIPK1、RIPK3、MLKL、p- 与上述研究结果一致。据报道，在COPD大鼠肺组织中
[16]
MLKL蛋白表达的电泳图 存在细胞大量凋亡的现象 。本研究结果显示，与对照
表4 各组大鼠肺组织中 RIPK1/RIPK3/MLKL 信号通 组比较，模型组大鼠肺上皮细胞凋亡率升高，提示COPD
路相关 mRNA 及蛋白表达水平测定结果（x±s， 大鼠肺组织细胞凋亡异常，这也与文献报道情况相符。
n＝6） 此外，本研究还发现，经Wog干预后，COPD大鼠血清中
mRNA表达 蛋白表达 IL-1β、IL-6、TNF-α水平及肺上皮细胞凋亡率降低，肺组
组别 RIPK1/ RIPK3/ p-MLKL/
RIPK1 RIPK3 MLKL 织病理损伤减轻，表明Wog对烟熏联合气管注射LPS诱
GAPDH GAPDH MLKL
对照组 1.00 1.00 1.00 0.16±0.01 0.38±0.02 0.21±0.02 导的 COPD 大鼠的保护作用与抑制气道炎症反应和肺
a
a
a
a
a
模型组 2.88±0.19 2.42±0.17 1.93±0.14 1.38±0.12 1.14±0.10 0.84±0.06 a 上皮细胞凋亡有关。
Wog低剂量组 2.14±0.13 1.95±0.14 1.62±0.11 b 1.09±0.11 b 0.83±0.07 0.60±0.05 b 某些刺激因子，如炎症，可以启动 TNF-α 介导的坏
b
b
b
bc
bc
bc
Wog高剂量组 1.45±0.11 bc 1.23±0.12 1.12±0.10 0.38±0.02 0.51±0.04 0.32±0.02 bc
bc
b
b
氨茶碱组 1.43±0.10 1.21±0.11 b 1.11±0.09 0.37±0.03 0.49±0.03 0.34±0.03 b 死性凋亡信号通路，导致 RIPK1 的激活，激活的 RIPK1
b
b
b
rRIPK1组 3.35±0.21 2.86±0.23 2.23±0.20 1.82±0.24 1.45±0.12 0.98±0.02 b 与 RIPK3 相互作用并形成坏死体，坏死体中激活的
b
b
b
b
Wog高剂量+rRIPK1组 2.07±0.11 d 1.82±0.14 1.58±0.13 0.83±0.07 0.72±0.06 0.55±0.04 d
d
d
d
d
RIPK3使MLKL磷酸化并导致寡聚体形成，寡聚体易位
a：与对照组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与Wog低
[17]
至细胞膜并导致细胞膜损伤和坏死性细胞凋亡 。因
剂量组比较，P＜0.05；d：与Wog高剂量组比较，P＜0.05
此，RIPK1/RIPK3/MLKL信号通路是介导坏死性细胞凋
4 讨论 亡的主要通路之一。相关研究显示，抑制RIPK1/RIPK3/
COPD 是一种常见的慢性肺部疾病，可引起一些呼 MLKL 信号通路激活可减轻脑卒中大鼠神经元坏死样
[13]
吸道症状，包括咳嗽、呼吸困难和多痰 。为研究COPD 凋亡 。本研究结果显示，与模型组比较，rRIPK1 组大
[18]
的病理生理机制和探索潜在的治疗药物，本研究首先利 鼠 肺 组 织 中 RIPK1、RIPK3、MLKL mRNA 及 RIPK1、
用烟熏联合气管注射LPS的方法构建COPD大鼠模型。 RIPK3、p-MLKL 蛋 白 表 达 上 调 ，提 示 RIPK1/RIPK3/
· 1064 · China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 9 中国药房 2023年第34卷第9期