Page 51 - 《中国药房》2023年9期
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α-SMA                            42 kDa


                                                                     IL-1β                           32 kDa

                                                                    SOCS1                            23 kDa

                                                                  p38 MAPK                           38 kDa
               A.正常组小鼠ASMCs            B.造模组小鼠ASMCs
                图2 ASMCs的形态观察显微图(×200)
                                                                 p-p38 MAPK                          43 kDa

                                                                     β-actin                         42 kDa

                                                                            Ⅰ   Ⅱ   Ⅲ   Ⅳ   Ⅴ   Ⅵ
                                                                Ⅰ:空白组;Ⅱ:模型组;Ⅲ:Rhy-SLN组;Ⅳ:SOCS1过表达组;Ⅴ:
                                                             SOCS1-RNAi组;Ⅵ:SB203580组
                                                             图4 各组ASMCs中α-SMA、IL-1β、SOCS1、p38 MAPK、
                  A. α-SMA                B. Desmin
                                                                  p-p38 MAPK蛋白表达的电泳图
                                                             4 讨论

                                                                 哮喘是过敏原刺激后由免疫球蛋白 E 介导的炎症
                                                             疾病,以气道炎症、气道高反应和气道重塑为主要特征,
                                                                                            [14]
                                                             现已成为世界流行的慢性疾病之一 。哮喘的发作会
                                                             诱导炎症反应并刺激 ASMCs 增殖,ASMCs 增殖在中央
                   C. DPAI                 D. Merge          气道表现为平滑肌细胞的增生,在小气道主要表现为平
         图3 正常组小鼠 ASMCs 的鉴定结果(免疫荧光染色,                        滑肌细胞的肥厚,同时伴有上皮异常、血管增生及黏液
               ×200)                                         腺体肥大等现象,从而增强气道的反应性,导致哮喘 。
                                                                                                         [15]
         表1 各组ASMCs吸光度值及α-SMA 、IL-1β、SOCS1、                      钩藤为我国传统中药,是治疗哮喘方剂麻藤定喘方
               p38 MAPK、p-p38 MAPK 蛋白表达水平的检测                 的臣药,该方具有清热平肝、祛风解痉、清热化痰、平喘
               结果(x±s,n=3)                                   的功效。钩藤碱是从钩藤中提取的主要有效成分,具有

          组别        吸光度值   α-SMA  IL-1β  SOCS1  p38 MAPK p-p38 MAPK  抗炎、降血压、舒张血管及扩张气道平滑肌等多种药理
          空白组      0.590±0.023  1.00±0.11  1.00±0.06  1.00±0.07  1.00±0.04  1.00±0.06  作用 。然而,钩藤碱存在水溶性差、生物利用度相对
                                                                 [16]
          模型组      0.815±0.029 a  4.63±0.32 a  4.24±0.25 a  0.49±0.04 a  6.84±0.45 a  5.96±0.51 a  较低等缺陷 。本课题组前期研究将钩藤碱制备成固
                                                                       [17]
          Rhy-SLN组  0.697±0.027 b  3.57±0.42 b  2.56±0.31 b  1.19±0.12 b  4.66±0.54 b  3.71±0.24 b
          SOCS1过表达组  0.681±0.045 b  1.94±0.18 b  3.95±0.28  1.67±0.14 b  5.06±0.46 b  4.01±0.52 b  体脂质纳米粒,可较好地解决钩藤碱水溶性差的缺陷,
          SOCS1-RNAi组  0.914±0.035 b  6.39±0.48 b  4.48±0.32  0.79±0.08 b  7.79±0.75 b  8.89±0.79 b  且已被证实具有缓解小鼠哮喘的作用 。基于此,笔者
                                                                                              [18]
          SB203580组  0.574±0.051 b  2.08±0.36 b  4.28±0.56  0.42±0.05  5.42±0.29 b  1.13±0.14 b
                                                             进一步研究 Rhy-SLN 改善哮喘的具体作用机制。本研
             a:与空白组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05
                                                             究结果显示,与模型组比较,Rhy-SLN组、SOCS1过表达
          3.4  Rhy-SLN 对 ASMCs 中 α -SMA、IL-1β、SOCS1、
                                                             组和 SB203580 组 ASMCs 吸光度值显著降低,这说明
          p38 MAPK、p-p38 MAPK蛋白表达的影响
                                                             Rhy-SLN、过 表 达 的 SOCS1 及 p38  MAPK 抑 制 剂
              与空白组比较,模型组 ASMCs 中 α-SMA、IL-1β、
                                                             SB203580均可抑制小鼠AMSCs增殖。
          p38 MAPK 和 p-p38 MAPK 蛋白表达水平均显著升高                      IL-1β 是一种促炎细胞因子,在哮喘的生理病理过
         (P<0.05),SOCS1 蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。                                                        [19]
                                                             程中发挥重要作用,可调控 ASMCs 的增殖 。SOCS1
          与 模 型 组 比 较 ,Rhy-SLN 组 、SOCS1 过 表 达 组 和            是细胞因子转导抑制因子家族成员之一,也是抑制炎症
          SB203580 组 ASMCs 中 α -SMA、p38  MAPK 和 p-p38        反应通路的一类关键调控因子 ,其可通过调控 p38
                                                                                         [20]
          MAPK蛋白表达水平均显著降低,SOCS1蛋白表达水平                        MAPK 信号通路活性,影响 AMSCs 增殖 。α-SMA 是
                                                                                                [21]
         (SB203580 组除外)显著升高(P<0.05),Rhy-SLN 组                反映 AMSCs 数量的敏感指标,是哮喘早期气道重塑的
          ASMCs 中 IL-1β 蛋白表达水平显著降低(P<0.05),                  重要指标之一 。本研究结果显示,与模型组比较,
                                                                          [22]
          SOCS1-RNAi 组 ASMCs 中 α-SMA、SOCS1、p38 MAPK          Rhy-SLN 组 和 SB203580 组 AMSCs 中 α -SMA、IL-1β
          和 p-p38 MAPK 蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。                 (SB203580 组除外)、p38 MAPK 和 p-p38 MAPK 蛋白表
          结果见表1、图4。                                          达水平均显著降低,SOCS1蛋白表达水平(SB203580组


          中国药房  2023年第34卷第9期                                                China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 9    · 1069 ·
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