Page 45 - 《中国药房》2023年6期
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应较为常见，50%～60%的患者会发生不同程度的恶心、                        2 方法与结果
          呕吐等反应（详见甲磺酸伊马替尼胶囊药品说明书），因                          2.1 色谱与质谱条件
          此很多患者会服用质子泵抑制剂、中药等缓解上述不良                           2.1.1 色谱条件 以ChromCore C18 （50 mm×2.1 mm，
                                                                                         TM
          反应，但目前关于此类药物对伊马替尼体内代谢的影响                           3.0 μm）为色谱柱，0.1%甲酸甲醇溶液（A）-0.1%甲酸溶
          说法不一。一般认为，与中性/碱性环境相比，伊马替尼                          液（B）为流动相进行梯度洗脱（0～0.5 min，32%A；0.5～
          在酸性条件下更易游离而被机体吸收，故提高体内环境                           2.0 min，32%A→75%A；2.0～4.0 min，75%A）；流速为
                                          [6]
          的pH值可有助于减少伊马替尼的吸收 。                                0.3 mL/min；柱温为40 ℃；进样量为5 μL。
              有研究表明，氢氧化铝、氢氧化镁、碳酸钙、西甲硅                        2.1.2 质谱条件 离子源为电喷雾离子源，以多反应监
                                                                                                       4
          油的复方制剂不会影响伊马替尼及其代谢产物 N-去甲                          测模式进行正离子扫描；碰撞气压力为6.00×10  Pa，气
                                                                                                       5
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          基伊马替尼在健康志愿者体内的药动学参数                   [7―8] 。质子    帘气压力为2.00×10  Pa，雾化气压力为4.48×10  Pa，辅
                                                                               5
          泵抑制剂对伊马替尼口服吸收影响的报道较少，仅有 1                          助气压力为4.48×10  Pa；喷雾电压为5 500 V；雾化温度
          篇文献指出奥美拉唑不会影响伊马替尼在健康志愿者                            为 550 ℃；用于定量分析的离子对分别为 m/z 494.5→
                          [9]
          体内的药动学行为 。鉴于现有证据有限，临床只能尽                           394.4（伊马替尼，去簇电压为 62 V，碰撞能为 36 eV）、
          量避免二者联用，但为了防治伊马替尼的不良反应，很                           m/z 480.5→394.4（N-去甲基伊马替尼，去簇电压为60 V，
          多患者不得不服用质子泵抑制剂等药物。奥美拉唑是                            碰撞能为 35 eV）、m/z 497.6→394.1（内标，去簇电压为
          临床广泛应用的口服质子泵抑制剂，与伊马替尼联合使                           63 V，碰撞能为33 eV）。
                                                             2.2 溶液的制备
          用的可能性较大。基于此，本研究拟采用高效液相色
                                                             2.2.1 标准溶液 精密称取伊马替尼和 N-去甲基伊马
          谱-串联质谱（LC-MS/MS）法测定大鼠血浆中伊马替尼
                                                             替尼对照品各10 mg，分别置于50 mL容量瓶中，以甲醇
          及其代谢产物N-去甲基伊马替尼的浓度，考察奥美拉唑
                                                             溶解并定容，制得伊马替尼和N-去甲基伊马替尼质量浓
          对伊马替尼及其代谢产物药动学行为的影响，为临床安
                                                             度均为 200 μg/mL 的储备液。取上述各成分储备液适
          全合理用药提供参考。
                                                             量，分别用甲醇稀释，制得质量浓度均为 2、5、20、200、
          1 材料
                                                             1 000、2 000、3 750、5 000 ng/mL的系列标准溶液。取上
          1.1 主要仪器
                                                             述系列标准溶液各20 μL至试管中，于60 ℃下以氮气流
                                           TM
              本研究所用主要仪器有 API 4000+ 型三重四极杆
                                                             吹干，残渣加大鼠空白血浆 20 μL，涡旋混合，制得伊马
          串联质谱系统（美国AB公司）、1290 Ⅱ型高效液相色谱
                                                             替尼和 N-去甲基伊马替尼质量浓度分别均为 2、5、20、
          仪（美国 Agilent 公司）、V6 型漩涡混合器（美国 Essen‐
                                                             200、1 000、2 000、3 750、5 000 ng/mL 的标准血浆样品。
          scien公司）、Allegra 64R Centrifuge型低温高速台式离心
                                                             同法另行配制伊马替尼和 N-去甲基伊马替尼质量浓度
          机（美国Beckman Coulter公司）等。
                                                             分别均为2、5、1 000、3 750 ng/mL的血浆质控样品。
          1.2 主要药品与试剂
                                                             2.2.2 内标溶液 精密称取内标对照品 10 mg，置于
              伊马替尼对照品（批号 S102608，纯度≥99%）购自
                                                             100 mL 容量瓶中，加入甲醇溶解并定容，制得内标母
          美国 Selleck Chemicals 公司；N-去甲基伊马替尼（批号
                                                             液。取上述母液适量，用甲醇稀释，制得质量浓度为
          404844-02-6，纯度＞90%）购自上海易恩化学技术有限                    300 ng/mL的内标溶液。
          公司；伊马替尼-d3 对照品（内标，批号 2020011901，纯                  2.3 血浆样品预处理
          度＞97%）购自青岛英纳维生物科技有限公司；奥美拉                              精密量取血浆样品 20 μL 于试管中，加入内标溶液
          唑对照品（批号100367-201305，纯度99.9%）购自中国食                 60 μL，涡旋混合2 min，再以12 000 r/min离心10 min，取
          品药品检定研究院；色谱级乙腈和甲醇均购自德国                             上清液进样测定。
          Merck 公司；色谱级甲酸购自美国 Tedia 公司；其余试剂                   2.4 分析方法的验证
          均为分析纯，水为超纯水。                                           按照2020年版《中国药典》（四部）通则“生物样品定
          1.3 实验动物                                           量分析方法验证指导原则”的要求对方法的专属性、线
              SPF级雄性Wistar大鼠，体质量为230～250 g，由济                性、精密度、准确度、提取回收率、基质效应和稳定性等
          南朋悦实验动物繁育有限公司提供，实验动物生产许可                           进行考察 。结果表明，内源性杂质不干扰伊马替尼、
                                                                     [10]
          证号为 SCXK（鲁）2019 0003。所有大鼠均饲养于室温                    N-去甲基伊马替尼和内标的测定（色谱图略）。以待测
         （25±1）℃、相对湿度 60% 的动物房内，并自由摄食、饮                      成分质量浓度（x）为横坐标、待测成分与内标峰面积比
          水。本研究方案通过青岛大学附属医院伦理委员会批                            值（y）为纵坐标进行线性回归，得伊马替尼的回归方程
          准，批件号为QYFYWZLL27364。                               为 y＝8.32×10 x－1.53×10 （r＝0.999 5），N-去甲基
                                                                          －3
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          中国药房  2023年第34卷第6期                                                 China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 6    · 679 ·
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