Page 57 - 《中国药房》2023年5期

2.5 一叶萩碱的含量测定 2.5.7 稳定性试验 取一叶萩药材样品（编号 YYQ-7）
2.5.1 色 谱 条 件 色 谱 柱 为 Waters XBridge C18 （4.6 1 g，精密称定，按“2.5.3”项下方法制备供试品溶液，按
mm×250 mm，5 µm），流 动 相 为 乙 腈 -0.01％ 三 乙 胺 “2.5.1”项下色谱条件在制备后 0、4、6、8、10、12、24 h 分
（30∶70，V/V），流速为 1.0 mL/min，检测波长为 255 nm， 别进样测定，计算峰面积。结果显示，峰面积的 RSD 为
柱温为 30 ℃，进样量为 10 µL。在此色谱条件下，供试 0.98%（n＝7），表明供试品溶液在室温下 24 h 内稳定性
品溶液中一叶萩碱的分离度良好，不受其他成分干扰。 良好。
HPLC图见图5。 2.5.8 加样回收率试验 取15.13 mg一叶萩碱对照品，
置于500 mL容量瓶中，加三氯甲烷溶解并定容，即得质
120
110 1
100 量浓度为 0.030 26 mg/mL 的对照品溶液。取一叶萩药
90
80 S3 材样品（编号YYQ-7）6份，每份约0.5 g，精密称定，分别
电压/mV 70 1 精密加入上述对照品溶液（质量浓度为0.030 26 mg/mL）
60
50
40 S2
30 50 mL，按“2.5.3”项下方法制备供试品溶液，按“2.5.1”项
20
10
0 S1 下色谱条件进样测定，计算加样回收率，结果见表2。由
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 表 2 可知，一叶萩碱的平均加样回收率为 97.47%，RSD
时间/min
S1：空白对照；S2：一叶萩碱对照品溶液；S3：供试品溶液（编号 为1.63%（n＝6），表明该方法准确度良好。
YYQ-7）；1：一叶萩碱 表2 加样回收率试验结果（n＝6）
图5 一叶萩碱含量测定的HPLC图 取样量/g 样品含量/mg 加标量/mg 测得量/mg 回收率/% 平均回收率/% RSD/%
0.506 2 1.524 1.513 2.980 96.24
2.5.2 对照品溶液的制备 取一叶萩碱对照品适量，精
0.503 8 1.517 1.513 3.012 98.83
密称定，加无水乙醇充分溶解，配制成质量浓度为 26.2 0.500 7 1.508 1.513 3.019 99.90
97.47 1.63
µg/mL的对照品溶液。 0.502 6 1.513 1.513 2.979 96.85
0.501 2 1.509 1.513 2.981 97.27
2.5.3 供试品溶液的制备 参考文献[13]，取一叶萩药 0.500 3 1.506 1.513 2.955 95.75
材粉末（过三号筛）约 1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，
2.5.9 样品含量测定 取16批一叶萩药材样品粉末（过
精密加入氨水1 mL，再精密加入三氯甲烷50 mL，密塞，
三号筛），每份约1 g，精密称定，按“2.5.3”项下方法制备
称定质量，静置12 h，超声30 min，再称定质量，用三氯甲
供试品溶液，按“2.5.1”项下色谱条件进样测定，以外标
烷补足减失的质量，滤过；精密量取续滤液10 mL，置蒸
法计算样品中一叶萩碱的含量，每批样品平行测定3次，
发皿中蒸干，残渣加无水乙醇溶解并转移至25 mL容量
取平均值，结果见表3。由表3可知，16批样品中一叶萩
瓶中，加无水乙醇定容，摇匀，进样前过 0.22 μm 微孔滤 碱的含量在 1.003～6.872 mg/g 之间。考虑到质量标准
膜，即得。 制定的适用性和药材来源的差异性，本研究以略低于一
2.5.4 线性关系考察 精密吸取“2.5.2”项下对照品溶
叶萩碱含量最低值设限，初步拟定本品中一叶萩碱含量
液 2、4、6、8、12、16、20 µL，注入 HPLC 仪中，按“2.5.1”项
不得低于1.00 mg/g。
下色谱条件测定峰面积。以峰面积为纵坐标（Y）、进样 表3 16批一叶萩药材样品中一叶萩碱的含量测定结果
量为横坐标（X）进行线性回归，得回归方程为Y＝4.000 0× （n＝3，mg/g）
2
6
3
10 X－7.959 2×10（R ＝0.999 8）。结果显示，一叶萩碱 编号 批号 一叶萩碱含量 编号 批号 一叶萩碱含量
的进样量在0.052 4～0.524 0 µg范围内与峰面积成良好 YYQ-1 2020091201 2.024 YYQ-9 2021062509 1.029
YYQ-2 2020091202 2.959 YYQ-10 2021070110 5.470
的线性关系。
YYQ-3 2020081003 6.872 YYQ-11 2021071411 3.406
2.5.5 重复性试验 取同批一叶萩药材样品（编号 YYQ-4 2020081004 1.818 YYQ-12 2021071412 2.979
YYQ-7）6 份，每份约 1 g，精密称定，按“2.5.3”项下方法 YYQ-5 2020081005 2.572 YYQ-13 2021072013 1.538
YYQ-6 2021060806 4.560 YYQ-14 2021072014 1.493
制备供试品溶液，按“2.5.1”项下色谱条件进样测定，以 YYQ-7 2021060807 3.017 YYQ-15 2021072115 1.003
外标法计算样品中一叶萩碱的含量。结果显示，一叶萩 YYQ-8 2021062708 3.797 YYQ-16 2021072116 3.056
碱的平均含量为3.017 mg/g，RSD为2.13%（n＝6），表明 3 讨论
该方法重复性良好。 3.1 TLC鉴别条件的选择
2.5.6 精密度试验 精密吸取一叶萩碱对照品溶液 10 在一叶萩碱的TLC鉴别中，笔者前期考察了静置时
μL，按“2.5.1”项下色谱条件重复进样测定 6 次，计算峰 间（1、2、3 h）、点样量（2、3、4 μL）对鉴别结果的影响，结
面积。结果显示，峰面积的 RSD 为 0.50%（n＝6），表明 果显示当样品静置3 h、点样量为4 μL时，所得色谱图分
仪器精密度良好。 离度较好、比移值（Rf 值）适宜、斑点清晰。在芦丁的

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