Page 60 - 《中国药房》2023年5期
P. 60

目前，针对桑白皮汤的研究主要集中于临床疗效和                          0.45 μm微孔滤膜滤过，收集滤液，即得。
                      [3]
          作用机制方面 ，而有利于新药制剂研发的物质基准涉                            2.1.2 不同煎煮时间桑白皮汤汤剂供试品溶液的制
          及甚少。国家药品监督管理局发布的《古代经典名方中                            备 参考文献[7―8]方法并进行优化后制备。称取处方
          药复方制剂简化注册审批管理规定》明确了“经典名方                            量饮片（桑白皮、法半夏、黄芩、 苦杏仁、浙贝母、炒栀
          物质基准”研制为经典名方制剂申报和研制的必经阶                             子、炒紫苏子、黄连各 3 g）共 11 份，分别置于陶瓷药罐
            [4]
          段 ，但目前对于物质基准的制备并没有统一的标准，因                           中，加水 350 mL，浸泡 60 min 后取样 1 mL（记为 S1），武
          此针对具体的经典名方物质基准还需具体研究。鉴于                             火沸腾后取样 1 mL（记为 S2），调节电陶炉功率至文火
          此，本研究依据《按古代经典名方目录管理的中药复方                            保持微沸，分别于头煎煮沸5、10、15、20、25、30 min时取
          制剂药学研究技术指导原则（试行）》以及《医疗机构中                           样各 1 mL（记为 S3～S8）；过滤，滤渣加水 300 mL 再次
          药煎药室管理规范》制备桑白皮汤煮散和汤剂2种物质                            煎煮，分别于二煎煮沸5、10、20 min 后过滤，滤液与各头
          基准  [5―6] ，采用高效液相色谱（HPLC）法建立上述 2 种物                 煎液合并，混匀后取样各1 mL（记为S9～S11）。将S1～
          质基准的特征图谱和含量测定方法，比较二者煎煮过程                            S11 样品分别用甲醇定容至 5 mL 容量瓶中，涡旋混匀，
          中桑皮苷A、栀子苷、小檗碱、黄芩苷、槲皮素、木犀草素                          用0.45 μm微孔滤膜滤过，收集滤液，即得。
          6 种指标成分含量的变化趋势，为桑白皮汤的制剂开发                           2.1.3 对照品溶液的制备 分别精密称取桑皮苷A、栀
          提供实验基础。                                             子苷、小檗碱、黄芩苷、槲皮素、木犀草素对照品适量，置
          1 材料                                                于不同具塞锥形瓶中，分别加甲醇溶解并定容至10 mL
          1.1 主要仪器                                            容量瓶中，密塞，称定质量，超声（功率 200 W，频率 40
              本研究所用主要仪器有Agilent 1260型HPLC仪（美                  kHz）处理10 min，放置至室温，再次称定质量，加甲醇补
          国Agilent公司，配置二极管阵列检测器），GL224型万分                     足减失的质量，制备成质量浓度分别为506.00、1 089.00、
          之一电子分析天平（德国 Sartorius 公司），KQ-1000 型医                499.00、1 010.00、522.00、510.00 μg/mL 的单个对照品溶
          用超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），XH-C 型                         液。精密吸取单个对照品溶液各 1 mL至 10 mL容量瓶
          旋涡混合器（金坛区西城新瑞仪器厂）。                                  中，加甲醇至刻度线，用 0.45 μm 微孔滤膜滤过，收集滤
          1.2 主要药品与试剂                                         液，即得混合对照品溶液。
              桑白皮（产地安徽，批号 22020831A）饮片购自扬子                    2.2 色谱条件
          江药业集团江苏龙凤堂中药有限公司，法半夏（产地甘                                采用 Supersil C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，
          肃，批号 D2022011）、黄芩（产地甘肃，批号 202201）、                  以甲醇（A）-0.1% 磷酸水溶液（B）为流动相进行梯度洗
          苦杏仁（产地河北，批号202201-1）饮片均购自四川新荷                       脱（0～10 min，5%A→20%A；10～50 min，20%A→30%A；
          花中药饮片股份有限公司，浙贝母（产地浙江，批号                             50～85 min，30%A→40%A；85～120 min，40%A→50%A；
          202201）、炒栀子（产地江西，批号202201）、炒紫苏子（产                   120～140  min，50%A→60%A；140～150  min，60%A→
          地 安 徽 ，批 号 22020731A）、黄 连（产 地 重 庆 ，批 号              90%A；150～155  min，90%A→95%A；155～160  min，
          20220101-01）饮片均购自马鞍山井泉中药饮片有限公                       95%A→5%A）；流速为1.0 mL/min；检测波长为254 nm；
          司，上述饮片经江苏省中医院药学部副主任中药师吴磊                            柱温为35 ℃；进样量为5 μL。
          鉴定均为真品；黄芩苷对照品（批号JZ21042102，纯度≥                      2.3 桑白皮汤物质基准特征图谱的建立
          98%）购自南京景竹生物科技有限公司；桑皮苷 A、小檗                         2.3.1 精密度试验 精密吸取“2.1.2”项下供试品溶液
          碱、木犀草素、槲皮素、栀子苷对照品（批号分别为                            （S8），按 “2.2” 项下色谱条件连续进样测定6次，记录色
          210717、210514、210711、210706、211008，纯度均不低于           谱图。以黄芩苷为参照峰，计算得各共有峰相对峰面积
          98%）均购自南京聚康医药化工有限公司；甲醇、磷酸均                          的 RSD＜3.36%、相对保留时间的 RSD＜1.06%（n＝6），
          为色谱纯，水为纯净水，其他试剂均为分析纯。                               表明仪器精密度良好。
          2 方法与结果                                             2.3.2 稳定性试验 取“2.1.2”项下供试品溶液（S8），室
          2.1 溶液的制备                                           温放置0、4、8、16、20、24 h后，分别按“2.2”项下色谱条件
          2.1.1 不同煎煮时间桑白皮汤煮散供试品溶液的制                           进样测定，记录色谱图。以黄芩苷为参照峰，计算得各
          备 参考文献[7―8]方法并进行优化后制备。称取处方                          共有峰相对峰面积的 RSD＜3.82%、相对保留时间的
          量饮片（桑白皮、法半夏、黄芩、 苦杏仁、浙贝母、炒栀                          RSD＜1.27%（n＝6），表明该供试品溶液在室温放置 24
          子、炒紫苏子、黄连各3 g）共6份，分别捣成颗粒（过4目                        h内稳定性良好。
          筛不过 10 目筛），置于陶瓷药罐中，加水 400 mL，浸泡                     2.3.3 重复性试验 按“2.1.2”项下方法平行制备6份供
          60 min后取样1 mL（记为T1），武火沸腾后取样1 mL（记                   试品溶液（S8），分别按“2.2”项下色谱条件进样测定，记
          为 T2），调节电陶炉功率至文火保持微沸，分别于煮沸                          录色谱图。以黄芩苷为参照峰，计算得各共有峰相对峰
          5、10、15、20 min时取样各1 mL（记为T3～T6）。将T1～                面积的RSD＜4.24%、相对保留时间的RSD＜1.53%（n＝
          T6样品分别用甲醇定容至5 mL容量瓶中，涡旋混匀，用                         6），表明该方法重复性好。


          · 566 ·    China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 5                               中国药房  2023年第34卷第5期
   55   56   57   58   59   60   61   62   63   64   65