Page 28 - 《中国药房》2023年4期
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LDH是存在于正常细胞胞质中的酶，当细胞膜受损                         pase-3被释放至胞质，当细胞发生凋亡时，caspase-3被活
          后，LDH 即被释放到细胞外，故可通过检测细胞上清液                          化成 cleaved caspase-3，从而启动和诱导凋亡；相反当
                                              [13]
          中 LDH 的含量来判断细胞膜的受损程度 。本研究结                          Bcl-2高表达时，Bcl-2/Bax同源二聚体解离增多，细胞凋
                                                                        [17]
          果显示，与对照组比较，低压缺氧组细胞上清液中 LDH                          亡受到抑制 。本研究结果显示，与对照组相比，低压
          含量显著升高；与低压缺氧组比较，7-HEC 组细胞上清                         缺氧组细胞中cleaved caspase-3蛋白的表达水平显著升
          液中LDH含量显著降低。这说明7-HEC对低压性缺氧                          高，Bcl-2/Bax比值显著下降；与低压缺氧组相比，7-HEC
          引起的细胞膜损伤具有改善作用。                                     组细胞中 cleaved caspase-3 蛋白的表达水平显著降低，
              有研究指出，MDA是脂质过氧化的标志产物，其含                         Bcl-2/Bax 比值显著升高。这提示 7-HEC 可减少低压缺
          量高低可反映氧化应激的严重程度，以及组织受氧自由                            氧诱导的细胞凋亡，其作用机制可能与抑制 caspase-3/
          基破坏的损伤程度；SOD是清除生物体内氧自由基的重                           Bax/Bcl-2凋亡信号通路的激活有关。
          要物质，兼具修复细胞的功能，当细胞内氧自由基水平                                综上所述，7-HEC可明显提高低压缺氧细胞的存活
          升高时，SOD 的生物合成及活性将有所增强，可用以间                          率，降低上清液中LDH含量，改善细胞周期阻滞，降低细
          接反映机体氧自由基的生成量及清除氧自由基的能                              胞凋亡率，从而显著减轻低压缺氧诱导的细胞损伤，其
            [14]
          力 。本研究结果显示，低压缺氧组细胞中 MDA 含量                          作用机制可能与抑制caspase-3/Bax/Bcl-2凋亡信号通路
          较对照组显著升高，SOD 活性较对照组显著降低，提示                          的激活有关。本课题组将进一步从细胞分子水平分析
          低压缺氧细胞的脂质过氧化反应增加，抗氧化能力减                             7-HEC保护作用的具体机制，为该化合物应用于高原低
          弱。与低压缺氧组比较，7-HEC 组细胞中 MDA 含量显                       压缺氧损伤的防护提供基础实验数据和研究线索。
          著降低，SOD 活性显著升高，提示该化合物可逆转细胞                          参考文献
                                                              [ 1 ]  VILLCA  N，ASTURIZAGA A，HEATH-FREUDENTHAL
          脂质过氧化反应增加、抗氧化能力减弱的现象，可通过
                                                                   A. High-altitude illnesses and air travel：pediatric considera-
          调控细胞氧化/抗氧化失衡而发挥对低压缺氧致细胞损
                                                                   tions[J]. Pediatr Clin North Am，2021，68（1）：305-319.
          伤的改善作用。
                                                              [ 2 ]  KUMARI P，WADHWA M，CHAUHAN G，et al. Hypo‐
              本研究应用Annexin Ⅴ-FITC/PI双染流式细胞术检
                                                                   baric hypoxia induced fear and extinction memory impair‐
          测了低压缺氧细胞的凋亡情况，结果显示，与对照组比                                 ment and effect of Ginkgo biloba in its amelioration：be‐
          较，低压缺氧组细胞的凋亡率显著升高；与低压缺氧组                                 havioral，neurochemical  and  molecular  correlates[J].  Be‐
          比较，7-HEC组细胞的凋亡率显著降低。这表明低压缺                               hav Brain Res，2020，387：112595.
          氧可诱导细胞凋亡，而 7-HEC 具有抑制细胞凋亡的作                         [ 3 ]  SHARMA  P，TULSAWANI  R.  Ganoderma  lucidum
          用。本研究应用流式细胞仪检测了 7-HEC 对细胞周期                              aqueous  extract  prevents  hypobaric  hypoxia  induced
          的影响，结果显示，低压缺氧组 G1期细胞比例较对照组                               memory  deficit  by  modulating  neurotransmission，neuro‐
          显著升高，S期、G2期细胞比例较对照组均显著降低，提                               plasticity and maintaining redox homeostasis[J]. Sci Rep，
                                                                   2020，10（1）：8944.
          示在低压缺氧条件下，细胞周期阻滞于 G1期；经 7-HEC
                                                              [ 4 ]  AKYUVA  Y，NAZıROĞLU  M.  Resveratrol  attenuates
          处理后，上述作用得到逆转，G1期的细胞比例明显降低，
                                                                   hypoxia-induced  neuronal  cell  death，inflammation  and
          G2期的细胞比例明显上升，S 期的细胞比例亦有上升趋
                                                                   mitochondrial  oxidative  stress  by  modulation  of  TRPM2
          势，提示 7-HEC 可使进入 DNA 复制期的低压缺氧细胞                           channel[J]. Sci Rep，2020，10（1）：6449.
          比例增加，可改善低压缺氧引起的细胞周期阻滞。此结                            [ 5 ]  PRAJIT  R，SRITAWAN  N，SUWANNAKOT  K，et  al.
          果与CCK-8实验结果相符。有研究指出，处于G1期的细                              Chrysin protects against memory and hippocampal neuro‐
          胞可对各种影响增殖与凋亡的信号进行整合和传递，进                                 genesis depletion in D-galactose-induced aging in rats[J].
                                                                   Nutrients，2020，12（4）：1100.
          而决定细胞是否进行分裂、凋亡或延迟分裂，即进入 G0
          期 [15―16] 。结合上述实验结果显示，7-HEC 可能通过改善                  [ 6 ]  SONG  J  H，MOON  K Y，LEE  S  C，et  al.  Inhibition  of
          低压缺氧致 PC12 细胞周期阻滞而提高细胞存活率、减                              hypoxia-inducible  factor-1α  and  vascular  endothelial
          少细胞凋亡和促进细胞增殖，但具体机制有待后续研究                                 growth factor by chrysin in a rat model of choroidal neo‐
                                                                   vascularization[J]. Int J Mol Sci，2020，21（8）：2842.
          进一步验证。
                                                              [ 7 ]  MANI R，NATESAN V. Chrysin：sources，beneficial phar‐
              细胞凋亡是一种主动的程序性死亡方式，受抗凋亡
                                                                   macological activities，and molecular mechanism of action
          蛋白和促凋亡蛋白的严格调控。通常情况下，抗凋亡蛋
                                                                   [J]. Phytochemistry，2018，145：187-196.
          白Bcl-2和促凋亡蛋白Bax以相对稳定的比例存在于细                         [ 8 ]  马慧萍，景临林，樊鹏程，等 .7-羟乙基白杨素的合成方
          胞内，二者的表达失衡是造成细胞凋亡的关键因素：当                                 法及其在制备抗缺氧药物中的应用：CN104926769A
          Bax 表达增多时，Bcl-2/Bax 同源二聚体增多，在缺氧刺                         [P]. 2015-09-23．
          激下，细胞线粒体膜受损，作为凋亡执行蛋白酶的 cas‐                                                            （下转第412页）


          · 406 ·    China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 4                               中国药房  2023年第34卷第4期
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