Page 30 - 《中国药房》2023年4期
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weight  and  skeletal  muscle  weight  were  increased  significantly  in  imperatorin  group （P＜0.05）；  food  intake  increased，  while  the
          expressions of tumor weight and volume were decreased significantly （P＜0.05）； the expressions of above proteins and genes were
          improved  significantly （P＜0.05）.  CONCLUSIONS  Imperatorin  can  improve  the  tumor  cachexia  state，  the  mechanism  of  which
          may be related to the regulation of ubiquitin-proteasome pathway and anti-apoptosis.
          KEYWORDS     imperatorin； cancer cachexia； muscle atrophy； mice



              肿瘤恶病质是一种以骨骼肌质量持续损失为特征                           Na，货号G1121）购自北京索莱宝科技有限公司；BCA蛋
                                               [1]
          的多因素综合征，或伴随着脂肪组织的损耗 ，传统的营                           白定量试剂盒（货号P0011）购自上海碧云天生物技术有
          养支持不能完全逆转。其伴随着肌原纤维蛋白水解、脂                            限公司；苏木素-伊红（HE）染料、麦胚凝聚素（WGA）染
          肪组织分解增加、胰岛素抵抗、能量代谢异常和食物摄                            料均购自武汉赛维尔生物科技有限公司，货号分别为
                  [2]
          入量减少 ，从而降低患者的治疗效果和生活质量，进一                           G1001、GDP1020；兔源肌细胞生成素（Myogenin，Myog）
                                                              单克隆抗体、兔源肌肉萎缩盒 F 蛋白（Muscle atrophy F
                               [3]
          步恶化肿瘤患者的病情 。2020 年全球有 1 930 万新发
                                                              box，MAFbx）多克隆抗体均购自英国 Abcam 公司，货号
                                          [4]
          癌症病例和近 1 000 万癌症死亡病例 ，然而 50%～80%
                                                              分别为 ab1835、ab168372；兔源 B 细胞淋巴瘤 2（B-cell
          的晚期癌症患者会出现恶病质，其中至少20%直接因恶
                                                              lymphoma-2，Bcl-2）单克隆抗体、兔源 Bcl-2 相关 X 蛋白
                    [5]
          病质而死亡 ，而非因为肿瘤本身。肿瘤恶病质发病机
                                                             （Bcl-2 associated X protein，Bax）单克隆抗体、山羊抗兔
          制复杂，迄今为止，仍然缺乏有效的干预手段，治疗方法                           辣根过氧化物酶标记的IgG二抗、山羊抗鼠辣根过氧化
                                 [6]
          多为营养治疗加体育锻炼 。在药物治疗方面，醋酸甲                            物酶标记的IgG二抗均购自美国CST公司，货号分别为
          地孕酮作为唯一一个获批用于治疗肿瘤相关恶病质的                             15071、89477、7074S、7076S；兔源磷酸化信号转导和转
          药物，临床上常用其来刺激食欲，使得患者体质量增加，                           录因子 3（phosphorylation-signal transducer and activator
                                              [7]
          但其增加的是体脂含量而不是骨骼肌质量 。在肿瘤恶                            of transcription 3，p-STAT3）单克隆抗体、兔源信号转导
                                               [8]
          病质中，骨骼肌又是蛋白质丢失的主要部位 ，肌肉质量                           和转录因子3（signal transducer and activator of transcrip‐
          和力量慢慢丧失，导致患者身体功能下降，且骨骼肌萎                            tion 3，STAT3）多克隆抗体、兔源胱天蛋白酶 3（Cas‐
                                                     [9]
          缩降低了患者对几种常见癌症治疗方法的耐受性 ，因                            pase3）单克隆抗体均购自武汉爱博泰克生物科技有限公
          此研究肿瘤恶病质引起肌肉萎缩的治疗方法具有重要                             司，货号分别为 AP0705、A1192、A19654；鼠源微管蛋白
                                                             （β-tubulin）单克隆抗体（货号 bsm-33034M）购自北京博
          的临床意义。
                                                              奥森生物技术有限公司；ECL超灵敏化学发光检测试剂
              欧前胡素是一种天然的呋喃香豆素类化合物，广泛
                                                              盒（货号SQ201）购自上海雅酶生物科技有限公司；引物
                          [10]
          存在于各类植物中 。欧前胡素的药理作用广泛，主要
                                                              序列由生工生物工程（上海）股份有限公司设计合成，详
          集中在抗氧化、抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗病毒、抗过敏和神
                                                              见表1。
          经保护方面     [11―12] 。因此，本研究通过构建肿瘤恶病质小
                                                                    表1 RPS18等基因引物序列和引物长度
          鼠模型，旨在探索欧前胡素改善肿瘤恶病质肌肉萎缩的
                                                              基因   上游引物（5′→3′）       下游引物（3′→5′）       引物长度/bp
          作用效果及机制，以期为临床治疗肿瘤恶病质提供更多                            RPS18  GTAACCCGTTGAACCCCATT  CCATCCAATCGGTAGTAGCG  85
          实验依据。                                               Myog  AGAGGAAGTCTGTGTCGGTGGAC  GTAGGCGCTCAATGTACTGGATGG  177
                                                              MAFbx  GTCGGCAAGTCTGTGCTGGTG  AGGCAGGTCGGTGATCGTGAG  138
          1 材料                                                Bcl-2  CCGTCGTGACTTCGCAGAGATG  ATCCCTGAAGAGTTCCTCCACCAC  97
          1.1 主要仪器                                            Bax  TTTGCTACAGGGTTTCATCCAGGATC TGCTGTCCAGTTCATCTCCAATTCG  143
                                                              Caspase3 GCTTCTTCAGAGGCGACTACTGC  GCAAGCCATCTCCTCATCAGTCC  131
              本研究所用主要仪器有ABI ViiA7型实时荧光定量
                                                              1.3 动物与细胞
          PCR 仪、NanoDrop 2000 型核酸蛋白浓度分析仪（美国
                                                                  SPF 级雄性 C57BL/6J 小鼠（6 周龄）15 只，体质量
          Thermo Fisher Scientific 公司），Ⅸplore Standard 型荧光
                                                              18～22 g，购于上海计划生育研究所实验动物经营部，生
          倒置显微镜（日本Olympus公司），Mini型蛋白电泳系统
                                                              产许可证号为 SCXK（沪）2018-0006。动物实验已通过
          电泳仪和转膜仪（美国 Bio-Rad 公司），KZ-Ⅲ-F 型低温
                                                              上海市第六人民医院动物福利伦理委员会批准，编号为
          型研磨仪（武汉赛维尔生物科技有限公司），Amersham
                                                              DWLL2022-0545。小鼠肺癌 LLC 细胞购于中国科学院
          Imager 600 型化学发光成像仪（美国 GE Healthcare Bio-           典型培养物保藏委员会细胞库。
          Sciences AB公司）。                                     2 方法
          1.2 主要药品与试剂                                         2.1 动物分组、建模及给药
              欧前胡素（货号 MUST-21030804，纯度＞98%）购自                     将 15 只雄性 C57BL/6J 小鼠随机分为空白对照组、
                                                                                                       [13]
          成都曼思特生物科技有限公司；羧甲基纤维素钠（CMC-                          模型组和欧前胡素组，每组 5 只。参考相关文献 的方

          · 408 ·    China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 4                               中国药房  2023年第34卷第4期
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