Page 61 - 《中国药房》2023年3期

法”项下第二法进行检测 。每个样本平行测定3次，取 2.3.3 供试品溶液的制备 取菊三七药材粉末（过 3 号
[15]
平均值。结果显示，15 批药材的水分含量为 8.88%～ 筛）1 g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，在通风橱中加浓
12.60%，平均值为 10.76%，详见表 2。考虑到药材来源 氨试液 2 mL，浸润 30 min 后加入三氯甲烷-甲醇（4∶1，
[16]
的差异，本研究以略高于最高测定值设限 ，初步拟定 V/V，下同）溶剂 25 mL，称定质量，超声（频率 40 kHz，功
菊三七药材的水分不得过13.00%。 率700 W）提取60 min，放冷，再次称定质量，并用三氯甲
表2 15 批菊三七样品中水分、总灰分、酸不溶性灰分、 烷-甲醇溶剂补足减失的质量，摇匀，滤过，即得供试品
水溶性浸出物含量测定结果（x±s，n＝3，%%） 溶液。
编号 水分 总灰分 酸不溶性灰分 水溶性浸出物 2.3.4 测定波长的选择 精密吸取对照品溶液和供试
jsq-1 10.70±0.02 6.23±0.02 1.41±0.00 34.66±0.10 品溶液（jsq-15）2 mL，分别置于分液漏斗中，加入溴甲酚
jsq-2 12.60±0.07 4.59±0.10 0.96±0.09 53.91±0.22
jsq-3 11.07±0.03 6.31±0.09 1.40±0.07 39.31±0.19 绿溶液和三氯甲烷各5 mL，充分振摇后静置分层，连续
jsq-4 10.24±0.04 7.69±0.11 1.62±0.10 45.86±0.80 萃取3次，合并三氯甲烷层，加入适量无水硫酸钠脱水。
jsq-5 10.30±0.03 9.95±0.15 3.45±0.25 44.87±0.47 将三氯甲烷层溶液转入25 mL容量瓶中，加三氯甲烷至
jsq-6 10.63±0.03 8.41±0.31 1.40±0.20 41.73±0.72
jsq-7 10.60±0.04 11.02±0.02 2.08±0.10 21.71±0.43 刻度，摇匀。以三氯甲烷作为空白溶液，取对照品溶液
jsq-8 10.82±0.02 8.94±0.51 1.79±0.47 21.71±0.23 和供试品溶液在200～760 nm波长范围内进行扫描。结
jsq-9 9.97±0.05 7.65±0.95 1.38±0.36 47.74±1.31 果显示，对照品溶液和供试品溶液的最大吸收波长均为
jsq-10 11.89±0.15 9.19±0.13 1.47±0.08 37.77±0.95
jsq-11 11.63±0.02 8.36±0.12 0.82±0.17 37.69±0.44 415 nm，故确定本研究的测定波长为 415 nm，图谱详
jsq-12 8.88±0.04 7.20±0.06 0.89±0.14 47.10±1.46 见图1。
jsq-13 11.74±0.03 4.43±0.08 1.42±0.16 50.22±1.04
0.5 0.5
jsq-14 10.09±0.07 5.94±0.04 0.56±0.21 44.62±1.61 0.4 0.4
jsq-15 10.25±0.03 5.21±0.23 0.73±0.11 48.73±0.38 0.3 0.3
Abs 0.2 Abs 0.2
2.1.2 总灰分和酸不溶性灰分 取 15 批菊三七药材粉 0.1 0.1
末（过2号筛），各约4 g，按2020年版《中国药典》（四部） 0 0
200 300 400 500 600 700 200 300 400 500 600 700
“通则 2302 灰分测定法”项下总灰分和酸不溶性灰分测 波长/nm 波长/nm
A.千里光碱对照品 B.菊三七供试品
[15]
定法进行检测 。每个样本平行测定 3 次，取平均值。
图1 千里光碱对照品和菊三七供试品的光谱图
结果显示，15 批药材的总灰分含量为 4.43%～11.02%，
2.3.5 线性关系考察 精密吸取千里光碱对照品溶液
平 均 值 为 7.41%；酸 不 溶 性 灰 分 的 含 量 为 0.56%～
0.6、0.8、1、1.2、1.4、1.6 mL，分别置于分液漏斗中，加入
3.45%，平均值为1.43%，详见表2。考虑到药材来源的差
溴甲酚绿溶液和三氯甲烷各5 mL，充分振摇2 min，然后
[16]
异，本研究以略高于最高测定值设限 ，初步拟定菊三七药
静置 30 min；分取三氯甲烷层，连续萃取 3 次，合并三氯
材中总灰分不得过11.50%，酸不溶性灰分不得过3.70%。
2.2 水溶性浸出物含量测定 甲烷层，加入适量无水硫酸钠脱水。将三氯甲烷层转移
按 2020 年版《中国药典》（四部）“通则 2201 浸出物 至 25 mL 容量瓶中，加三氯甲烷至刻度，摇匀。以三氯
测定法”项下水溶性浸出物测定法中的热浸法进行测 甲烷作为空白溶液，采用 TU-1950 型双光束紫外-可见
定，以水作为溶剂 。每个样本平行测定 3 次，取平均 分光光度计在 415 nm波长处测定各对照品溶液的吸光
[15]
值。结果显示，15 批药材中水溶性浸出物的含量为 度。以吸光度为纵坐标（Y）、对照品质量浓度为横坐标
21.71%～53.91%，平均值为 41.18%，详见表 2。考虑到 （X）绘制标准曲线，得到线性回归方程为 Y＝64.17X－
[16]
药材来源的差异，本研究以略低于最低测定值设限 ， 0.10（r＝0.999 6）。结果显示，千里光碱对照品溶液在
初步拟定菊三七药材中水溶性浸出物不得少于20.70%。 0.004 8～0.012 9 mg/mL范围内线性关系良好。
2.3 总生物碱含量测定 2.3.6 精密度试验 精密吸取 1.2 mL 千里光碱对照品
采用紫外分光光度法测定菊三七中总生物碱含量， 溶液，按“2.3.5”项下方法处理后，测定其在 415 nm 波长
具体方法如下。 处的吸光度，重复测定6次。结果显示，千里光碱吸光度
2.3.1 显色剂的制备 称取溴甲酚绿 250 mg，置于 500 的RSD为0.40%（n＝6），表明仪器精密度良好。
mL容量瓶中，加入乙酸-醋酸钠缓冲液（取醋酸钠9 g，加 2.3.7 稳定性试验 精密吸取供试品溶液（jsq-15），按
入冰醋酸 4.9 mL，加水稀释至 500 mL，即得 pH 为 4.5 的 “2.3.5”项下方法处理后，分别在室温下放置 0、15、30、
乙酸-醋酸钠缓冲液）溶解并定容，摇匀，即得显色剂—— 45 min，然后测定其在415 nm波长处的吸光度。结果显
溴甲酚绿溶液。 示，千里光碱吸光度的 RSD 为 2.20%（n＝4），表明供试
2.3.2 千里光碱对照品溶液的制备 取千里光碱对照 品溶液在室温下放置45 min内稳定性较好。
品 10.04 mg，精密称定，置于 50 mL 容量瓶中，加入三氯 2.3.8 重复性试验 取样品（jsq-15）粉末6份，每份约1
甲烷定容，摇匀，即得。 g，精密称定，按“2.3.3”项下方法制备供试品溶液，再按

中国药房 2023年第34卷第3期 China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 3 · 311 ·