Page 66 - 《中国药房》2023年3期
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问题。过敏体质人群常因受到外界环境如过敏原（花                             照 品（批 号 AM268S）、五 味 子 乙 素 对 照 品（批 号
          粉、植物和尘螨）、食物、药物、空气污染等因素的刺激，                          AB266S）和五味子丙素对照品（批号 AM509W）均购自
          引发气道高反应和气道炎症，出现反复的呼吸困难、喘                            天津一方科技有限公司，纯度均大于 98%；卵白蛋白
          息、胸闷和咳嗽等症状 。西医多通过使用抗炎或支气                           （ovalbumin，OVA；批号9006-59-1）购自北京博奥生物集
                              [2]
                                         [3]
          管扩张药物来达到缓解病情的目的 ，但临床常用的皮                            团有限公司；百令胶囊（批号 18010016，规格每粒 0.5 g）
          质类固醇等激素类药物容易使人体产生耐药性，且长期                            购自杭州中美华东制药有限公司；γ 干扰素（interferon-
          使用会导致机体代谢紊乱。因此，越来越多的患者选择                            γ，IFN-γ）、白细胞介素4（interleukin-4，IL-4）和免疫球蛋
          中医辨证论治或中西医结合进行治疗。                                   白 E（immunoglobulin E，IgE）酶联免疫吸附检测试剂盒
              中医将过敏性哮喘定义为“哮病”，分为热哮、寒哮                        （批号分别为elisa3578、elisa1033、elisa2444）均购自上海
          等，其中寒哮的特征与西医的过敏性哮喘比较接近。因                            广锐生物科技有限公司；色谱级甲醇、乙腈购自德国
          此，从治疗寒哮的温肺散寒、化痰定喘类中药中寻找防                            Merck KGaA 公司，色谱级甲酸购自美国 Fisher 公司，其
                                              [4]
          治过敏性哮喘的有效药物已成为研究热点 。五味子为                            他试剂均为分析纯，水为屈臣氏蒸馏水。
          木兰科植物五味子 Schisandra chinensis（Turcz.）Baill 的                 表1 五味子药材样品的来源信息
          干燥成熟果实，具有收敛固涩、益气生津、补肾宁心的功                           编号  产地         获得途径             购买批号    采集时间
            [5]
          效 。在医圣张仲景的射干麻黄汤、小青龙汤以及临床                            S1  辽宁省铁岭市     购自哈尔滨三棵树中药材专业市场  18050137
                                                              S2  吉林省通化市     购自哈尔滨三棵树中药材专业市场  18040093
          经验方加味过敏煎、哮喘方等治疗过敏性哮喘的经典名
                                                              S3  吉林省白山市     购自哈尔滨三棵树中药材专业市场  18050276
          方中，五味子均发挥了敛肺、止咳、平喘之功                   [6―7] 。临床    S4  辽宁省抚顺市     购自哈尔滨三棵树中药材专业市场  18050251
                                             [8]
          亦有用五味子单方治疗经期哮喘的案例 。研究表明，                            S5  吉林省通化市     购自哈尔滨三棵树中药材专业市场  18060300
                                                              S6  黑龙江省哈尔滨市   自行采集                     2018年6月
          五味子中含有木脂素、黄酮、有机酸、挥发油等化学成
                                                              S7  黑龙江省五常市    购自哈尔滨三棵树中药材专业市场  18100052
            [9]
          分 ；五味子水煎液、五味子木脂素和挥发油均可通过抑                           S8  黑龙江省尚志市    自行采集                     2018年6月
          制辅助型 T 细胞 2（T helper 2 cell，Th2）相关炎症因子、             S9  辽宁省本溪市     购自哈尔滨三棵树中药材专业市场  19030122
          缓解肺部炎症浸润来改善哮喘症状                 [10―11] 。上述研究提      S10  黑龙江省尚志市   自行采集                     2019年5月
          示，五味子治疗哮喘的效果可观，且应用前景理想，但其                           1.3 动物
          潜在的药效物质基础还不十分明确。                                        本研究所用动物为健康SPF级雄性SD大鼠，共104
              五味子在临床常与其他中药配伍后以水煎液的形                           只，体质量为 170～190 g，购自长春市亿斯实验动物技
          式应用于治疗过敏性哮喘。因此，本研究采用超高效液                            术有限责任公司，实验动物生产合格证号为SCXK（吉）-
          相色谱-四极杆飞行时间串联质谱（UPLC-Q-TOF-MS/                      2018-0007。饲养室空气状况良好，温度适宜，相对湿度
          MS）技术分析不同批次五味子水煎液中的共有成分，并                           为40％～70％，12 h/12 h光照昼夜循环。实验前连续适
          采用灰色关联度和Pearson相关性分析法探讨其共有峰                         应性饲养 7 d，实验过程中食物和水充足。动物实验经
          与治疗过敏性哮喘之间的关系，筛选活性成分，旨在初                            哈尔滨商业大学药学院动物伦理委员会批准后实施（批
          步阐明五味子治疗过敏性哮喘的潜在药效物质基础。                             准号为201803009）。
          1 材料                                                2 方法
          1.1 主要仪器                                            2.1 不同批次五味子水煎液的 UPLC-Q-TOF-MS/MS
              本研究所用的主要仪器有 ACQUITY 型 UPLC 仪                    分析
         （美国 Waters 公司）、液相色谱-G6500 系列四极杆-飞行                   2.1.1 供试品溶液的制备 分别取 10 批五味子供试品
          时间质谱联用仪（美国 Agilent 公司）、BSA 型万分之一                    粉末各1 g，按料液比1∶10（g/mL，下同）加水回流提取1
          电子天平（北京赛多利斯天平有限公司）、iMark 型酶标                        h，过滤后滤渣再按1∶8的料液比加水回流提取1 h，过滤
          仪（上海伯乐生命医药产品有限公司）。                                  后合并 2 次滤液，置于水浴锅上浓缩成浸膏（得率为
          1.2 主要药品与试剂                                         13.5%～14.3%）。取全部浸膏，加适量乙腈定容于 10
              10批五味子药材分别购自各地药材市场或自采，经                         mL容量瓶中，制成质量浓度为0.1 g/mL（按生药量计）的
          哈尔滨商业大学药学院曲中原教授鉴定均为木兰科植                             五味子供试品溶液，经 0.22 μm 微孔滤膜过滤，收集滤
          物五味子 S. chinensis（Turcz.）Baill 的干燥成熟果实，药            液，并记为SG1～SG10，备用。
          材具体来源信息见表 1。五味子醇甲对照品（批号                             2.1.2 对照品溶液的制备 精密称取五味子醇甲、五味
          MUST-18031905）、戈 米 辛 J 对 照 品（批 号 MUST-              子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、戈米辛
          18041102）和戈米辛 M2 对照品（批号 MUST-18010412）              J、戈米辛 M2 对照品各 3.0 mg，分别置于 10 mL 容量瓶
          均购自成都曼斯特生物科技有限公司，纯度均大于                              中，加乙腈超声（功率200 W，频率40 kHz）5 min溶解，待
          98%；五味子醇乙对照品（批号AM407S）、五味子甲素对                       冷却后，用乙腈定容，得到各对照品质量浓度均为 0.3


          · 316 ·    China Pharmacy  2023 Vol. 34  No. 3                               中国药房  2023年第34卷第3期
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