Page 79 - 《中国药房》2023年1期

碎机粉碎成最粗粉（粉末饮片并未对粉碎的粒径进行规 1 700 1 3 5 6 7 8
1 600
定，但前期本课题组研究发现六味地黄方中粉及以下粒 1 500
1 400
径粉末在煎煮过程中会形成黏稠的胶状物，难以过滤）， 1 300
1 200
1 100
置于陶瓷药罐中煎煮，按照“2.3.1”项下的方法取样（样 1 000
900
品依次记为T1～T16）并制备成粉末饮片供试品溶液。 U/mV 800
700
2.4 不同煎煮时间传统饮片和粉末饮片的化学特征指 600
500
纹图谱分析 400
300
200
2.4.1 精密度试验 精密量取同一供试品溶液（样品 100
S9）10 μL，按“2.1”项下色谱条件连续进样测定 6 次，记 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120
录峰面积。以獐芽菜苷为参照峰计算得各共有峰相对 t/min
图2 不同煎煮时间粉末饮片的指纹图谱及对照指纹图
保留时间的 RSD＜1.2%（n＝6），相对峰面积的 RSD＜
谱R
1.5%（n＝6），表明方法精密度良好。
2.4.2 稳定性试验 精密量取同一供试品溶液（样品 2.4.5 共有峰标定 通过将2种饮片的对照指纹图谱R
S9）10 μL，分别在室温下放置0、4、8、12、16、20、24 h时， 与混合对照品溶液的色谱图（取“2.2”项下对照品溶液按
按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。以獐芽菜 “2.1”项下色谱条件进样测定所得）进行比对，指认共有
苷为参照峰计算得各共有峰相对保留时间的 RSD＜ 峰。结果显示，在传统饮片指纹图谱中，共指认出5个色
0.2%（n＝6），相对峰面积的 RSD＜1.4%（n＝6），表明供 谱峰，分别为5-羟基糠醛（1号峰）、莫诺苷（3号峰）、獐芽
试品溶液于室温放置24 h内稳定性良好。 菜苷（5号峰）、二氢槲皮素（6号峰）、丹皮酚（7号峰）；在
2.4.3 重复性试验 取同一样品（样品 S9）6 份，按 粉末饮片指纹图谱中，共指认出6个色谱峰，分别为5-羟
“2.3.1”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1”项下色谱条
基糠醛（1号峰）、莫诺苷（3号峰）、獐芽菜苷（5号峰）、二
件进样测定，记录峰面积。以獐芽菜苷为参照峰计算得
氢槲皮素（6号峰）、丹皮酚（7号峰）、苯甲酰芍药苷（8号
各共有峰相对保留时间的RSD＜0.6%（n＝6），相对峰面
峰）。结果见图3。
积的RSD＜1.6%（n＝6），表明该方法重复性良好。
2.5 不同煎煮时间传统饮片和粉末饮片中 8 个指标成
2.4.4 特征图谱的建立及分析 分别取不同煎煮时间
分的含量测定
的粉末饮片和传统饮片供试品溶液，按照“2.1”项下色谱
2.5.1 色谱条件与系统适用性试验 分别精密吸取
条件进样测定，记录色谱图。将色谱图导入《中药色谱
“2.2”项下混合对照品溶液和“2.3”项下的 2 种供试品溶
指纹图谱相似度评价系统（2012 年版）》中，分别以 S1、
T1的图谱为参照图谱，设置时间窗宽度为0.1 min，采用 液，按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图。结果
多点校正法进行色谱峰的自动匹配，分别生成不同煎煮 显示，各待测成分峰与其相邻峰间的分离度均大于 1.5，
时间传统饮片和粉末饮片样品的指纹图谱（图1、图2）； 理论板数以 5-羟基糠醛计大于 3 000，表明本方法的系
采用中位数法分别生成传统饮片和粉末饮片的对照指 统适用性较好。
纹图谱R，并以对照指纹图谱R为参照进行相似度评价。 2.5.2 线性关系及定量限、检测限考察 精密吸取“2.2”
结果显示，在 16 批传统饮片的图谱中共得到 5 个共有 项下混合对照品溶液 0.2、0.4、0.8、1.0、1.6、2.0 mL，置于
峰，在16批粉末饮片的图谱中共得到6个共有峰，2种饮 2 mL 容量瓶中，加甲醇定容，摇匀，按“2.1”项下色谱条
片的色谱图与各自对照指纹图谱 R 的相似度均在 0.98 件进行分析，以各待测成分质量浓度为横坐标（X）、峰面
以上。 积为纵坐标（Y）进行线性回归。同时，精密吸取“2.2”项
1 3 7
1 600 5 6 下混合对照品溶液适量，倍比稀释后按“2.1”项下色谱条
1 500
1 400 件进行分析，以信噪比3∶1和10∶1时的质量浓度分别作
1 300
1 200 为检测限和定量限。结果表明，8 个待测成分均在其考
1 100
1 000 察质量浓度范围内线性关系均良好（r≥0.999 0）。结果
900
U/mV 800 见表1。
700
600
500 2.5.3 精密度试验 精密吸取“2.2”项下混合对照品溶
400
300
200 液，按“2.1”项下色谱条件重复进样测定 6 次，记录峰面
100
0 积。结果显示，5-羟基糠醛、儿茶素、莫诺苷、马钱苷、獐
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120
t/min 芽菜苷、二氢槲皮素、丹皮酚、苯甲酰芍药苷峰面积的
图1 不同煎煮时间传统饮片的指纹图谱及对照指纹图 RSD分别为2.88%、1.16%、0.73%、1.07%、1.00%、1.25%、
谱R 1.27%、1.23%（n＝6），表明仪器的精密度良好。

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