Page 56 - 《中国药房》2023年1期

表2 XCQ-9 干预 24、48 h 后各组细胞的凋亡率测定结 破坏，从而导致肿瘤细胞不可控制地生长，因此在研究
果（x±s，n＝＝3，%%） 抗肿瘤药物时，通常将凋亡和周期阻滞作为抗肿瘤效果
组别 24 h 48 h 评价的两大指标 [13―14] 。本研究发现，XCQ-9 可以抑制
空白对照组 6.93±0.88 5.92±1.52 Jurkat 细胞的增殖，同时促进 Jurkat 细胞的凋亡，并诱导
XCQ-9 2.5 μmol/L组 5.53±0.31 4.48±1.07 Jurkat 细胞发生 G2期阻滞。这提示，XCQ-9 具有一定的
XCQ-9 5 μmol/L组 10.19±0.57 a 12.79±2.99 b
XCQ-9 10 μmol/L组 25.64±0.93 a 34.64±6.25 a 抗白血病活性。
a：与空白对照组比较，P＜0.01；b：与空白对照组比较，P＜0.05 凋亡是由Caspase介导的一种非炎症形式的程序性
细胞死亡 。其中，Caspase-9 活化后（即 Cleaved Cas‐
[15]
3.3 XCQ-9对Jurkat细胞周期的影响
pase-9）可以启动 Caspase 级联反应，使凋亡执行者 Cas‐
与空白对照组比较，XCQ-9 10 µmol/L 组干预 24 h
pase-3 活化（即 Cleaved Caspase-3） 。与 Caspase 家族
[16]
后及XCQ-9 5、10 µmol/L组干预48 h后，细胞中处于G2期
的其他成员相比，Caspase-3处于Caspase级联的末端，其
的比例均显著升高（P＜0.01）。结果见表3、图3。
激活是启动凋亡程序的必经之路，可以水解底物 PARP
表3 XCQ-9 干预 24、48 h 后各组细胞的细胞周期占比
（Cleaved PARP 是 Cleaved Caspase-3 水解的产物，是凋
测定结果（x±s，n＝＝3，%%）
[17]
亡的标志），从而抑制DNA修复，使细胞凋亡 。本研究
24 h 48 h
组别 结果显示，XCQ-9可上调Jurkat细胞中Cleaved Caspase-
G 1期 S期 G 2期 G 1期 S期 G 2期
空白对照组 40.71±4.30 38.14±1.98 19.87±6.57 42.63±2.05 38.87±2.18 17.19±1.13 9、Cleaved Caspase-3 和 Cleaved PARP 蛋白的表达，这可
XCQ-9 2.5 µmol/L组 39.81±3.02 40.12±2.45 18.87±4.24 37.59±3.16 39.20±1.75 21.55±2.72 能是诱导其发生凋亡的重要原因。
XCQ-9 5 µmol/L组 35.49±3.02 36.44±9.78 32.96±0.69 30.00±3.11 29.63±6.37 38.70±3.30 a 细胞周期是由检查点、细胞周期蛋白依赖性激酶和
a
XCQ-9 10 µmol/L组 23.87±2.42 24.21±1.61 47.63±3.83 18.07±15.32 25.89±1.94 45.31±1.82 a
细胞周期蛋白共同调节的、高度保守的、严格控制的过
a：与空白对照组比较，P＜0.01
程 。CDK1 是细胞周期进程的核心，其失调可导致
[18]
3.4 XCQ-9对细胞中凋亡和周期蛋白表达的影响结果 肿瘤侵袭性发展、染色体不稳定和细胞增殖加强 。
[19]
与空白对照组比较，XCQ-9 10 µmol/L 组细胞中 Cyclin B1在细胞生长发育过程中发挥着重要的作用，在
CDK1和Caspase-9蛋白表达显著下调（P＜0.01），XCQ-9
细胞分裂中期达到高峰，在分裂后期下降，被认为是 G2
2.5、5、10 µmol/L 组细胞中 Cyclin B1、Cleaved Caspase-3 期阻滞的标志 。本研究结果显示，XCQ-9 可下调
[20]
和 Cleaved PARP 蛋白表达均显著上调（P＜0.05 或 P＜ Jurkat细胞中CDK1的表达，上调Cyclin B1的表达，进一
0.01），5、10 µmol/L 组细胞中 Cleaved Caspase-9 蛋白表 步验证XCQ-9是通过阻滞G2期来发挥作用的。
达显著上调（P＜0.01）。结果见图4、表4。 综上，XCQ-9可通过Caspase途径来促进细胞凋亡，
4 讨论 主 要 通 过 上 调 Cleaved Caspase-9、Cleaved Caspase-3、
肿瘤的发生是由于受到遗传因素、环境因素和基因 Cleaved PARP 蛋白促进细胞凋亡，下调 CDK1 和上调
突变等的综合影响，使得细胞增殖与死亡之间的稳态被 Cyclin B1 蛋白使细胞发生 G2期阻滞来抑制细胞增殖，
1.1 1.1 1.1 1.1
1.0 1.0 1.0 1.0
0.8 0.8 0.8 0.8
（ ×10 3 ） 0.6 （ ×10 3 ） 0.6 （ ×10 3 ） 0.6 （ ×10 3 ） 0.6
24 h
count 0.4 count 0.4 count 0.4 count 0.4
0.2 0.2 0.2 0.2
0 0 0 0
0.7 1.6 2.4 3.2 4.1 0.7 1.6 2.4 3.2 4.1 0.7 1.6 2.4 3.2 4.1 0.7 1.6 2.4 3.2 4.1
PE-A（×10） PE-A（×10） PE-A（×10） PE-A（×10）
6
6
6
6
1.1 1.1 1.1 1.1
1.0 1.0 1.0 1.0
0.8 0.8 0.8 0.8
（ ×10 3 ） 0.6 （ ×10 3 ） 0.6 （ ×10 3 ） 0.6 （ ×10 3 ） 0.6
48 h
count 0.4 count 0.4 count 0.4 count 0.4
0.2 0.2 0.2 0.2
0 0 0 0
0.7 1.6 2.4 3.2 4.1 0.7 1.6 2.4 3.2 4.1 0.7 1.6 2.4 3.2 4.1 0.7 1.6 2.4 3.2 4.1
6
6
6
PE-A（×10） PE-A（×10） PE-A（×10） PE-A（×10）
6
A. 空白对照组 B. XCQ-9 2.5 μmol/L组 C. XCQ-9 5 μmol/L组 D. XCQ-9 10 μmol/L组
图3 XCQ-9作用24、48 h后各组细胞周期检测的流式细胞图
· 50 · China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 1 中国药房 2023年第34卷第1期