Page 29 - 《中国药房》2022年24期

cleaved-caspase-3 17 kDa
caspase-9 46 kDa
1.5 对照组
Bax 21 kDa b SPS低浓度组
SPS中浓度组
Bcl-2 26 kDa 1.0 SPS高浓度组
β-actin 45 kDa b a a
b a
0.5 b a
b a
p62 62 kDa a b
LC3-Ⅰ 16 kDa 0
LC3-Ⅱ 14 kDa
cleaved-caspase-3 caspase-9 Bax Bcl-2
beclin-1 52 kDa B. cleaved caspase-3、caspase-9、Bax、Bcl-2蛋白表达柱形图
β-actin 45 kDa
2.5
PI3K 85 kDa b b 对照组 3
2.0 SPS低浓度组 对照组
mTOR 289 kDa a b SPS低浓度组
1.5 b SPS中浓度组 2 a b SPS中浓度组
SPS高浓度组 a b SPS高浓度组
Akt 55 kDa 1.0 b b b b 1 b a
0.5 b b b
β-actin 45 kDa
0 0
对照组 SPS低 SPS中 SPS高
浓度组 浓度组 浓度组 p62 LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ beclin-1 PI3K mTOR Akt
A.电泳图 C. p62、beclin-1蛋白表达和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ柱形图 D. PI3K、mTOR、Akt蛋白表达柱形图
a：与对照组比较，P＜0.05；b：与对照组比较，P＜0.01
图7 SPS对SMMC-7721细胞凋亡、自噬和PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达的影响
[15]
相关 。beclin-1是自噬小体形成所必需的蛋白，其表达 [ 2 ] 孙阳， 杨婧， 张琪琪， 等 . 红花多糖对肝癌细胞增殖阻
[16]
水平与自噬水平呈正相关 。Western blot 实验结果表 滞的机制探讨[J]. 中国实验方剂学杂志， 2014， 20
明，经不同浓度SPS干预后，细胞中p62蛋白的相对表达 （13）： 156-159.
[ 3 ] 杨婧， 戚基萍， 王锐， 等 . 红花多糖对人宫颈癌 Hela 细
量均显著降低，beclin-1 蛋白的相对表达量和 LC3Ⅱ/
胞增殖和 VEGF 表达的影响[J]. 中国实验方剂学杂志，
LC3Ⅰ均显著升高，表明SPS可诱导细胞发生自噬效应，
2016， 22（8）： 111-114.
其作用效果随SPS浓度升高而加强。 [ 4 ] 刘楠， 朱琳， 李纳， 等 . 红花多糖通过阻断 PI3K/Akt/
研究证实，PI3K/Akt/mTOR信号通路是调节细胞自 mTOR 通路诱导人乳腺癌 MDA-MB-435 细胞凋亡的机
[17]
噬的主要信号通路 。研究表明，PI3K与生长因子受体 制研究[J]. 中草药， 2018， 49（18）： 4374-4379.
的结合可改变下游 Akt 的结构，对凋亡相关蛋白的表达 [ 5 ] 陈明， 王举涛， 吴珍妮， 等 . 半枝莲总黄酮通过 PI3K/
产生影响，从而调节细胞的凋亡与自噬；mTOR 蛋白则 AKT/mTOR 通路诱导肿瘤细胞自噬的体内实验研究
可负反馈调节细胞自噬，对凋亡的作用具有正、负两重 [J]. 中国中药杂志， 2017， 42（7）： 1358-1364.
[18]
性 。此外，PI3K、Akt、mTOR 的快速激活还可促进相 [ 6 ] GALLUZZI L， GREEN D R. Autophagy-independent
functions of the autophagy machinery[J]. Cell， 2019， 177
[19]
关蛋白的合成，抑制自噬小体的形成 。Western blot实
（7）： 1682-1699.
验结果显示，经不同浓度 SPS 干预后，细胞中与该通路
[ 7 ] 王锐， 李娅兰， 白皓天， 等. 基于星点设计-效应面法优
相关蛋白的相对表达量均显著降低，提示 SPS 能诱导 化红花多糖提取工艺研究[J]. 海南医学院学报， 2022，
SMMC-7721 细胞的凋亡及自噬，这可能与抑制 PI3K/ 28（5）：332-338.
Akt/mTOR信号通路的表达有关。 [ 8 ] 杨婧， 张帅， 王冬梅， 等 . 超微粉碎联合超声法提取红
综上所述，SPS有可能通过抑制PI3K/Akt/mTOR信 花中多糖工艺研究[J]. 哈尔滨商业大学学报（自然科学
号通路来诱导人肝癌 SMMC-7721 细胞发生凋亡和自 版）， 2014， 30（3）： 354-356， 360.
噬，可作为治疗肝癌的候选天然活性成分。在后续研究 [ 9 ] 魏文科 . 介绍一种观察凋亡细胞形态学特征的染色方
法：苏木素伊红染色法（HE 染色法）[J]. 生物学通报，
中，本课题组拟进一步结合PI3K/Akt/mTOR信号通路抑
2003， 38（5）： 49-50.
制剂进行深入探讨，为肝癌治疗药物研发提供新的思路
[10] SHEN H， YAO Z F， ZHAO W P， et al. miR-21 enhances
与方向。
the protective effect of loperamide on rat cardiomyocytes
参考文献 against hypoxia/reoxygenation， reactive oxygen species
[ 1 ] 刘莲， 张红霞， 陈蕾， 等. 扶正化瘀方对肝癌患者MMP- production and apoptosis via regulating Akap8 and Bard1
3 和 ESM-1 表达的影响[J]. 中医学报， 2019， 34（5）： expression[J]. Exp Ther Med， 2019， 17（2）： 1312-1320.
1065-1069. （下转第2972页）

中国药房 2022年第33卷第24期 China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 24 · 2967 ·