Page 52 - 《中国药房》2022年23期

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表5 各组大鼠肾组织中 MDA、SOD、ROS、OPN 水平 pH 值，从而促进草酸钙结晶的形成 。本研究结果显
的检测结果（x±s） 示，与空白组相比，模型组大鼠 24 h 尿量、尿液 pH 值均
2+
2+
组别 n ROS MDA/（nmol/mg） SOD/ （U/mg） OPN/（ng/mL） 降低，尿液中 Ca 、Ox 含量及血清中 Cr、BUN、Ca 含量
空白组 10 187.12±30.39 0.41±0.13 49.60±7.63 22.48±4.59 均升高，且肾组织病理损伤较为严重，可见大量弥漫性
模型组 8 296.35±41.57 a 1.01±0.21 a 24.58±4.47 a 30.60±3.49 a
石淋清颗粒低剂量组 8 252.36±21.97 b 0.82±0.18 b 31.35±3.55 b 24.34±3.95 c 分布的结晶。经石淋清颗粒干预后，大鼠 24 h 尿量、尿
2+
石淋清颗粒中剂量组 10 249.82±40.30 c 0.78±0.22 b 32.01±3.21 b 24.05±3.89 c 液 pH 值均升高，尿液中 Ca 、Ox 含量及血清中 Cr、
石淋清颗粒高剂量组 8 234.56±41.09 c 0.76±0.18 b 35.30±9.73 c 23.76±3.92 c BUN、Ca 含量均降低，且大鼠肾组织损伤得到改善，黑
2+
SIRT3抑制剂组 8 290.06±23.46 0.94±0.21 24.11±4.56 28.38±3.63
色结晶相对减少、呈散状分布。这表明石淋清颗粒可抑
a：与空白组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与模型组
比较，P＜0.01 制大鼠肾脏结晶的形成。
ROS的产生不仅损伤肾脏功能，还会促进结晶在肾
3.7 石淋清颗粒对大鼠肾组织中 SIRT3、FOXO3a、
[14]
脏的沉积，其主要来源于线粒体 。相关研究发现，肾
SOD2 mRNA和蛋白表达的影响
结石患者体内抗氧化酶（如SOD、谷胱甘肽过氧化物酶）
与 空 白 组 比 较 ，模 型 组 大 鼠 肾 组 织 中 SIRT3、
水平降低，且经手术处理后，患者体内 MDA 水平降
FOXO3a、SOD2 mRNA 和蛋白表达水平均显著降低
低 [4，14] 。研究表明，OPN在肾结石患者体内存在高表达，
（P＜0.01）。与模型组比较，石淋清颗粒各剂量组大鼠
[15]
从而在肾结石的形成过程中具有重要的作用 。经石
肾组织中上述指标 mRNA 和蛋白表达水平均显著逆转
淋清颗粒干预后，大鼠肾组织中 ROS、MDA、OPN 水平
（P＜0.05 或 P＜0.01）；SIRT3 抑制剂组大鼠肾组织中上
均降低，SOD水平升高，肾小球基膜、足突细胞和肾小管
述指标 mRNA 和蛋白表达水平差异无统计学意义（P＞
上皮细胞中的线粒体损伤均减轻。这表明石淋清颗粒
0.05）。结果见图5、表6。
可通过抗氧化作用改善大鼠肾小球足突细胞和肾小管
SIRT3 28 kDa 上皮细胞的线粒体损伤。
相关研究表明，抑制 SIRT3 在细胞中的表达，可促
FOXO3a 97 kDa
[16]
进ROS的产生，从而增强氧化应激，进一步损伤细胞 。
SOD2 25 kDa FOXO3a 是参与细胞抗氧化的重要成员之一，其可从多
种细胞刺激（生长因子、代谢应激、氧化应激）中接收信
GAPDH 37 kDa
号 [17―18] ，从而发挥抗氧化作用。另有研究发现，SIRT3的
空白组 模型组 石淋清 石淋清 石淋清 SIRT3抑
颗粒低 颗粒中 颗粒高 制剂组 去乙酰化可调节FOXO3a的活性，二者共同在线粒体中
剂量组 剂量组 剂量组
图5 各组大鼠肾组织中 SIRT3、FOXO3a、SOD2 蛋白 发挥促进氧化应激相关基因转录的作用，进而增加
[19]
表达的电泳图 SOD2 的生成，从而改善细胞和组织的氧化损伤 。本
研究结果显示，经石淋清颗粒干预后，大鼠肾组织中
表6 各 组 大 鼠 肾 组 织 中 SIRT3、FOXO3a、SOD2
SIRT3、FOXO3a、SOD2 mRNA和蛋白表达水平均升高，
mRNA和蛋白表达水平的检测结果（x±s，n＝3）
而经 SIRT3 抑制剂+石淋清颗粒干预后，上述指标表达
SIRT3 FOXO3a SOD2
组别
mRNA 蛋白 mRNA 蛋白 mRNA 蛋白 水平差异无统计学意义，且肾组织损伤较为严重，黑色
空白组 1.00±0.00 0.68±0.09 1.00±0.00 0.78±0.05 1.00±0.00 0.74±0.05 结晶弥漫分布，肾小球和肾小管上皮细胞线粒体损伤严
模型组 0.57±0.04 a 0.43±0.04 a 0.51±0.03 a 0.28±0.05 a 0.48±0.04 0.30±0.04 a 重。这表明石淋清颗粒可通过激活SIRT3/FOXO3a信号
a
石淋清颗粒低剂量组 0.70±0.05 b 0.54±0.05 b 0.62±0.08 b 0.46±0.07 b 0.78±0.10 0.46±0.04 b
c
c
石淋清颗粒中剂量组 0.76±0.07 c 0.55±0.03 b 0.70±0.06 c 0.53±0.08 c 0.78±0.12 0.51±0.05 c 通路活性，发挥抗氧化作用，进而抑制肾结石的形成。
石淋清颗粒高剂量组 0.77±0.02 c 0.60±0.07 c 0.76±0.04 c 0.54±0.09 c 0.81±0.06 0.56±0.12 c 综上所述，石淋清颗粒可有效抑制大鼠草酸钙肾结
c
SIRT3抑制剂组 0.50±0.03 0.38±0.05 0.53±0.03 0.21±0.09 0.48±0.10 0.30±0.07
石的形成，改善肾损伤，其作用机制可能与提高抗氧化
a：与空白组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与模型组
作用和激活SIRT3/FOXO3a信号通路有关。
比较，P＜0.01
参考文献
4 讨论
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肾结石是一种慢性代谢性、高复发性疾病，其发生
203-212.
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· 2862 · China Pharmacy 2022 Vol. 33 No. 23 中国药房 2022年第33卷第23期