Page 26 - 《中国药房》2022年23期

JAK2， STAT3 and NF-κB p65 were up-regulated significantly （P＜0.05）； the pathological observation of liver tissue showed that
the structure of hepatic cord was seriously disordered， there were many inflammatory cells infiltration of liver cells， and the liver
injury score was significantly increased （P＜0.05）. Compared with model group， pathological changes and above indexes in mice
were improved significantly in Arisaema Cum Bile low-dose and high-dose groups （P＜0.05）. CONCLUSIONS Arisaema Cum
Bile has a protective effect on CCl4-induced acute liver injury in mice， which may be related to the inhibition of inflammatory
response mediated by JAK2/STAT3/NF-κB signal pathway and antioxidant stress.
KEYWORDS Arisaema Cum Bile； acute liver injury； inflammatory response； oxidative stress； nuclear factor-κB p65； signal
transducer and activator of transcription protein 3； Janus kinase 2

肝脏在人体代谢、解毒过程中起着举足轻重的作 1.2 主要药品与试剂
用，是人体最主要的新陈代谢器官。外伤、病毒性感染、 天南星饮片（批号2005001）购于亳州市悦林药业有
自身免疫病变或摄入某些外源性化学物质（如药物、毒 限公司，由广东药科大学中药学院刘基柱教授鉴定为天
素、酒精等）都可导致肝损伤，严重的会发展成为肝硬化 南星科植物天南星Arisaema erubescens （Wall.） Schott的
[1]
甚至肝癌，危害人类健康 。近年，中医药在防治肝损伤 干燥块茎；联苯双酯滴丸（批号RF40009，规格1.5 mg/片）
[2]
方面获得了较大进展 。现代研究表明，中药可以通过 购于广州白云山星群药业股份有限公司；CCl4购于上
抗氧化自由基损伤、减少炎症和凋亡相关介质的产生、 海麦克林生化科技有限公司；丙氨酸转氨酶（alanine
改善肝功能、改善微循环、调节免疫功能等途径治疗肝 aminotransferase，ALT）、天冬氨酸转氨酶（aspartate ami‐
[3]
损伤 。此外，越来越多的证据表明，酪氨酸激酶2（Janus notransferase，AST）、超氧化物歧化酶（superoxide dis‐
kinase 2，JAK2）/信 号 传 导 及 转 录 激 活 因 子 3（signal mutase，SOD）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）测试盒
transducer and activator of transcription3，STAT3）/核因子 （批号分别为20210719、20210726、20210624、20210705）
κB（nuclear factor kappa-B，NF-κB）信号通路介导的持续 均购于南京建成生物工程研究所；小鼠肿瘤坏死因子α
肝脏炎症可能在肝星状细胞激活和肝损伤形成过程中 （tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素6（interleu‐
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发挥重要作用 。 kin-6，IL-6）酶联免疫吸附检测试剂盒（批号分别为
胆南星（Arisaema Cum Bile）为制天南星的细粉与 RX202412M、RX203049M）均购于泉州睿信生物科技有
牛、羊或猪的胆汁一起加工而成，或为生天南星细粉与 限公司；苏木素-伊红（HE）染液套装购于武汉塞维尔生
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牛、羊或猪的胆汁一起发酵加工而成 。其味苦、微辛， 物科技有限公司；RNAex Pro RNA 提取试剂盒、Evo-M-
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性凉，归肺、肝、脾经，具有清热化痰、息风定惊的功效 。 MLV 反转录预混型试剂盒、SYBR Green Pro Taq HS 预
胆南星主要含有胆汁酸类、黄酮类、核苷类、酚类、糖类 混型 qPCR 试剂盒（批号分别为 A4A0413、A4A0765、
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等成分 。现代药理研究结果表明，胆南星具有清热、抗 A4A0500）均购于湖南艾科瑞生物工程有限公司；兔
[6]
炎、镇痛、抗惊厥、抗氧化等作用 ，但其是否可通过抗 源 STAT3 抗体、兔源 JAK2 抗体、鼠源甘油醛-3-磷酸脱
炎、抗氧化的药理活性发挥对急性肝损伤的保护作用却 氢 酶（GAPDH）抗体（批号分别为 4729976、1372864、
4718884）均购于武汉博士德生物工程有限公司；兔源
鲜有报道。本研究以腹腔注射四氯化碳（CCl4 ）制备急
NF-κB p65 抗体、辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔 IgG
性肝损伤小鼠模型，探究胆南星对急性肝损伤的保护作
（H+L）二抗、辣根过氧化物酶标记的山羊抗小鼠 IgG
用，并基于 JAK2/STAT3/NF-κB 信号通路研究其可能的
（H+L）二 抗 、BCA 蛋 白 定 量 试 剂 盒（批 号 分 别 为
作用机制，为胆南星在防治化学性肝损伤方面的应用提
AF0246、A0208、A0216、P0012）均购于上海碧云天生物
供实验依据。
技术有限公司；超敏ECL发光液购于大连美仑生物技术
1 材料
有限公司；IL-6、TNF-α、18S 的 PCR 引物序列由生工生
1.1 主要仪器
物工程（上海）股份有限公司合成，详见表1。
本研究所用的主要仪器有SCIENTZ-48型高通量组
表1 PCR引物序列及扩增产物长度
织研磨机（宁波新芝生物科技股份有限公司），MX-S 型
引物 上游序列 下游序列 扩增产物长度/bp
涡旋混合仪、D1008E 型八联管离心机（美国 Scilogex 公
IL-6 5′-CCGGAGAGGAGACTTCACAG-3′ 5′-CAGAATTGCCATTGCACAAC-3′ 134
司），JY92-IIN型高速冷冻离心机（湖南湘仪离心机仪器 TNF-α 5′-ATGTCTCAGCCTCTTCTCATTC-3′5′-GCTTGTCACTCGAATTTTGAGA-3′ 179
有限公司），Epoch 2 型酶标仪（美国 BioTek 公司），UVP 18S 5′-AGTTCCAGCACATTTTGCGAG-3′ 5′-TCATCCTCCGTGAGTTCTCCA-3′ 166
ChemStudio/PLUS型多功能成像仪（德国Analytikjena公 1.3 动物
司），Colibri 140030型微量分光光度计（德国Berthold公 本研究所用动物为SPF级雄性C57BL/6小鼠，共50
司），Cycler720 型 PCR 扩增仪（美国 Thermal 公司）， 只，体质量15～17 g，购于广东省医学实验动物中心，动
LightCycler 96 型荧光定量 PCR 仪（美国 Roche 公司）， 物生产合格证号为 SCXK（粤）2018-0002。将小鼠饲养
DYY-6C型电泳仪（北京六一生物科技有限公司）等。 于相对湿度为55％～60％、温度为20～22 ℃、12 h黑暗/

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